简介：摘要GMP，英文全称GOODMANUFACTURINGPRACTICE，其中文意思是“药品生产质量管理规范”或“良好作业规范”。它是用于制药，食品和其他行业中较为普遍的强制性标准。本标准要求相关企业控制原材料质量，公司原有工作，设施设备，包装运输等。在标准的要求下，可以形成一个系统有利于改善企业环境，及时发现生产过程中的问题1。在制药企业中，制药设备是制药过程中必不可少的生产设备，制药设备GMP功能是制药生产过程中的控制和管理功能，因此，本文对这个论题的论述有着十分重要的现实意义。

简介：目的分离、培养成年食蟹猴脑室下区神经前体细胞并研究其生物学特性。方法取成年食蟹猴脑室下区组织，经木瓜蛋白酶和脱氧核糖核酸酶消化后，接种于DMEM-F12无血清培养基中。结果神经前体细胞可以增殖形成神经球，经免疫细胞化学方法检验这些细胞呈现巢蛋白nestin阳性．神经球分化后的细胞表达胶质细胞的标记物及神经元的标记物。脑室下区来源的神经球进行自主分化时可分化成神经元和胶质细胞，但分化成神经元的比例都很少。结论从食蟹猴脑室下区分离培养的细胞可以在体外增殖形成神经球．并可分化为神经元和胶质细胞，符合神经前体细胞的生物学性状。

简介：目的:观察角膜缘干细胞培养液对血管内皮细胞增殖的影响。方法:分别培养角膜缘干细胞及球结膜上皮细胞,并通过免疫组化检测AE-5蛋白鉴别角膜缘干细胞。搜集两组培养细胞的上清液加入培养的人脐静脉血管内皮细胞中,并设立对照组。培养24h后通过MTT法检测细胞增殖情况并进行统计学分析。结果:角膜缘干细胞AE-5染色呈阴性,而球结膜上皮细胞为阳性。加入角膜缘干细球结膜上皮细胞和对照组培养液的血管内皮细胞MTT值分别为2.097±0.079,1.981±0.034和1.990±0.044。三组间有显著性差异(F=9.169,P=0.000)。加入角膜缘干细胞培养上清液的血管内皮细胞增殖活性明显高于其他两组(P=0.005和P=0.007)。结论:角膜缘干细胞培养液能够促进血管内皮细胞的增殖,这可能是角膜缘干细胞的特征。本研究从功能学角度为角膜缘干细胞理论提供更多的依据。

简介：过程性评价是新课程实践的基本要求，细胞培养技术是本校新开设的一门理实一体的项目化教学课程，在新课程的实施中，评价组织是重要的组成部分。如何在项目教学中以任务引领的方式，以典型人物任务设计教学任务，并根据行业发展需要和完成职业岗位实际工作任务所需要的知识、能力、素质要求，结合职业资格证书标准要求有效实施过程性评价，是本课程一直尝试探索的教学模式。介绍理实一体项目化教学中实施过程性考核方案的具体做法，对在实施过程中出现的几点问题做出总结。

简介：目的构建出一种新型的微孔水凝胶并用于体外培养原代软骨细胞。方法利用双乳液法制备明胶微球,然后用罗丹明染色液标记后包埋在水凝胶,观察明胶微球降解情况,再用此方法获得的微球制备微孔海藻酸钠水凝胶培养原代软骨细胞,通过荧光显微镜观察活/死细胞检测结果,并使用细胞活力检测试剂（CCK8）方法测定细胞活力值。结果在显微镜下观察到,明胶微球在37℃的培养环境下能够自然降解,水凝胶内部产生微孔。活/死细胞染色结果观察到原代软骨细胞能够在材料中均匀地分布和生长,在微孔边缘生长的软骨细胞甚至能够突破边缘,将空腔位置占据生长。细胞活力检测数据提示微孔水凝胶组软骨细胞的增殖能力高于对照组细胞。结论通过明胶降解的特性构建出的新型微孔水凝胶材料,具有良好的细胞相容性,并在水凝胶内部形成微孔,可有效地产生边缘效应,有利于体外培养原代软骨细胞。

简介：摘要一种用于动物细胞培养的新型微载体利用葡聚糖和环氧氯丙烷进行交联反应，得到葡聚糖凝胶，即微载体，并用精氨酸对微载体进行修饰，使微载体在细胞培养液中表面带上正电荷，进而吸附细胞，使细胞贴附在表面生长。由于精氨酸酸性羧酸酯基团，这个方案为细胞培养提供了与市售Cytodex1微载体相比具更低的表面pH，理论上表面pH值可以做到7.0左右，其结果是更适宜pH的微载体。将产物初步用于VERO细胞培养，得到了较好的结果。细胞在微载体上生长良好，和目前广泛使用的Cytodex1微载体效果相仿。

简介：背景与目的：目前对胶质瘤干细胞（braingliomastemcells,BGSCs）的研究仍以细胞实验研究为主,因此培养出大量合格的BGSCs是所有相关研究的首要步骤。本实验用一种新的较简化的方法从临床人脑胶质瘤标本中进行脑胶质瘤干细胞的培养纯化。方法：对17例脑胶质瘤患者的手术标本进行处理,无血清悬浮培养法进行干细胞培养。肿瘤细胞球形成后,进行增殖实验、单克隆形成实验以及诱导分化实验,并用免疫细胞化学方法检测相关的标志物。连续传代＋条件培养方式进行分离纯化。结果：17例标本中共有8例成功培养出肿瘤细胞球,连续传代后仍然具有良好的增殖能力,单克隆形成实验证实单个肿瘤球细胞即可形成新的肿瘤细胞球。免疫细胞化学检测显示肿瘤球细胞表达胶质瘤干细胞的标志物CD133,诱导分化后的肿瘤球细胞可以表达成熟神经细胞的标志物GFAP和TU-20。以上结果证明培养出的肿瘤球细胞即为脑胶质瘤干细胞。结论：用无血清干细胞培养基对脑胶质瘤组织进行处理培养,用条件培养＋连续传代的方法即可快捷高效地获得大量高纯度脑胶质瘤干细胞。此方法大大节约了费用和时间,可以满足后续脑胶质瘤干细胞实验研究的要求。

简介：摘要：所谓的细胞培养，就是将一些有机体的组织分离出来，分成不同的个体，或者是从体内分离出来的个体。自1885年由德国的罗克斯用生理盐水培育出鸡胚胎，至今已经有130余年的发展历程。在此期间，该技术得到了长足的进步，尤其是60年代后期，该技术达到了顶峰，在培养容器、培养基以及培养方式上都有了新的突破。由于其操作简便，周期短，成本低廉，因此，无论是在科学的研究还是在实际的生产中，都得到了越来越多的重视。基于此，本文研讨三维荧光光谱在细胞培养中的应用及其效果、

简介：

简介：目的：经改良和优化,建立高纯度BALB/c小鼠大脑皮质神经元培养的方法。方法：采用L-多聚赖氨酸包被细胞培养板,取新生BALB/c小鼠（出生24h内）大脑皮质组织,经0.25%胰酶消化后吹打成单个细胞,按1×10^6/孔接种于35mm的六孔板中,用神经元细胞培养种植液培养6h后换神经元细胞培养饲养液,培养40h时加入阿糖胞苷抑制神经胶质细胞的生长,随时观察神经元培养情况。结果：培养5d的神经元细胞形态最为典型;经免疫荧光方法鉴定,神经元细胞纯度为93%。结论：经方法改良与优化,获得了高纯度的原代培养小鼠大脑皮质神经元细胞

简介：摘要目的比较不同公司生产的无血清培养基对病毒性疫苗生产用Vero细胞培养效果，及基因工程胰蛋白酶的细胞消化效果，以判断是否适用。方法实验组用VirusPro Vero-A培养基进行Vero细胞的培养，用Trpzyme消化细胞。对照组用VP-SFM培养基进行细胞培养，用TrypLE Select消化细胞。两组Vero细胞以相同密度接种在T175培养瓶中，以相同的培养条件和传代方法在T175瓶和细胞工厂中各培养3代。培养期间观察细胞的上清液、形态以及汇合度，消化后检测细胞活率并计算细胞收获量。采用配对t检验比较两组消化液的pH值、总消化时长、37 ℃消化孵育时长、细胞活率以及细胞收获量。结果两组细胞生长状态均良好。配对t检验显示，实验组消化液的pH值(6.99)、总消化时长(17.28 min)和37 ℃消化孵育时长(6.93 min)均值均大于对照组消化液(分别为6.75、12.34 min、3.30 min)，细胞活率(94.79%)及细胞收获量(T175瓶：3.91×107个；细胞工厂：1.90×109个)均值均高于对照组的(分别为90.20%、3.33×107个、1.26×109个)，且差异有统计学意义(t值分别为9.17、3.46、2.98、2.31和4.38，P值均<0.05)。结论实验组无血清培养基培养效果较好，实验组基因工程胰蛋白酶细胞消化液温和、细胞损伤小，均适用于Vero细胞。

简介：摘要目的比较人脐带Wharton′s Jelly来源间充质干细胞（WJ-MSC）与脂肪来源间充质干细胞（AD-MSC）培养上清对内皮细胞血管新生的促进作用。方法酶消化法分离获得WJ-MSC及AD-MSC，分别收集其培养上清并与内皮细胞共培养。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测内皮细胞中促进血管新生相关基因和抑制血管新生基因的表达；Matrigel体外成管实验检测其对内皮细胞管网状结构形成的作用。结果WJ-MSC和AD-MSC培养上清分别与内皮细胞共培养后，内皮细胞促血管新生相关基因的表达水平显著升高，抑制血管新生相关基因表达降低（P<0.01），与对照组相比，WJ-MSC组及AD-MSC组内皮细胞体外管网状结构的形成均显著高于对照组（43.2 mm±9.2 mm和94.3 mm±13.2 mm，86.1 mm±7.2 mm，P<0.01）。结论WJ-MSC与AD-MSC培养上清对内皮细胞血管新生均具有促进作用，且二者的促进作用相当。

简介：以金姜花（Hedychiumgardnerianum）试管苗为外植体,采用薄层细胞培养技术,研究了不同薄层部位和不同6-BA浓度对薄层不定芽诱导的影响;采用流式细胞术和根尖染色体技术两种方法对不同培养代数薄层再生植株的倍性进行了鉴定.结果表明：从试管苗茎基部第1条根附近切取的薄层出芽能力最强;在不定芽诱导培养基MS＋5.0mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA中,从1棵试管苗所切薄层最高可获得10.7个不定芽;不定芽在成苗培养基1/2MS＋0.5mg/LIBA＋1g/L活性炭中长成完整植株;再生植株驯化后移栽室外,存活率高达90%以上.再生植株经过多次继代培养后仍能保持二倍体倍性,与亲本植株一致,表现出良好的遗传稳定性.

简介：摘要目的评价采用细胞培养法以及实时荧光定量PCR法在流感病毒检测中的临床价值。方法选择我中心于2018年6月-2019年8月收集采集到的流感样病例的350份咽拭子样本为研究对象，对其分别采取细胞培养法以及实时荧光定量PCR法进行检测，比较两种检验方式的阳性检出率。结果实时荧光定量PCR法阳性检出率为11.43%高于细胞培养法的2.86%，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论实时荧光定量PCR法在临床检测中具有简单快捷、简单快捷以及灵敏度高等优势，可应用于流感爆发初期大面积快速筛查。

简介：【摘要】目的：观察分析实时荧光定量PCR与细胞培养在流感病毒检测中的应用效果。方法：于2019年01月--2020年12月采集的2605例疑似流感样本作为课题对象，均进行实时荧光定量PCR检测、细胞培养检测。对比分析两种不同方法获得的阳性检出率。结果：细胞培养阳性检出率明显低于实时荧光定量PCR阳性检出率（p

简介：目的探讨大鼠原代神经细胞培养体系对放射性损伤敏感性及其损伤机制。方法建立大鼠原代星形胶质细胞-神经元共培养体系,原代神经元培养体系以及原代星形胶质细胞培养体系并分别随机分为对照组（始终正常培养）,放射损伤组（对细胞实施X射线单次照射）。72h后,对比评价不同组细胞死亡率、凋亡以及活性氧（ROS）含量变化。结果X射线照射引起原代神经元培养体系细胞死亡率[（68.0±5.2）%]及ROS含量（103.6±8.8）升高最为明显。共培养体系细胞损伤较轻,星形胶质细胞培养体系则无明显损伤。原代神经元培养体系和原代星形胶质细胞-神经元共培养体系中放射损伤组的细胞死亡率及ROS含量与同体系内对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）。原代神经元培养体系放射损伤组的细胞死亡率及ROS含量与其余两种培养体系同组相应指标的差异也有统计学意义（P〈0.05）。神经元放射性损伤的主要表现是异常凋亡。结论放射损伤后原代神经元培养体系ROS含量明显增高,导致神经元凋亡失调。因此,ROS可能成为放射性脑损伤一个新的治疗靶点。

简介：

简介：摘要目的观察经细胞培养灭活验证的狂犬疫苗接种后的免疫效果，评价其安全性，为临床应用安全有效的狂犬疫苗提供依据。方法使用经细胞培养灭活验证的狂犬疫苗，选择14～62岁暴露者共50例作为研究对象，按照国家药品临床管理规定和中国生物制品规程狂犬病疫苗免疫检测标准，观察50例研究对象免疫接种后，局部反应，全身反应和抗体水平。结果所有接种对象抗体阳性率为100%，抗体几何平均滴度（GMT）为70.12×103nmol.(s.L)﹣1（4.02IU/ml），轻度局部副反应的发生率为0.91%，轻度全身副反应的发生率为1.03%，所有接种对象均未出现严重局部副反应和严重的全身副反应。结论本研究所使用的基于细胞培养灭活验证的狂犬疫苗具有良好的安全性，轻度副反应发生率低，无严重副反应，免疫保护效果好，具有临床应用价值。

简介：目的：探讨建模时间长短及不同糖浓度培养基对糖尿病大鼠下颌骨来源成骨细胞培养的影响为胰岛素经人工种植牙给药建立细胞模型。方法：链脲霉素诱导I型糖尿病大鼠模型，建模后10d及40d取其下颌骨，分别于葡萄糖含量为5．5mmol／L（低糖组）和25mmol／L（高糖组）的培养基中进行成骨细胞培养，观察细胞的形态及生长情况。细胞计数法检测生长增殖能力，碱性磷酸酶染色法、茜素红钙结节染色法分别检测分化及矿化能力。结果：细胞增殖能力由大到小依次为建模10d低糖组〉建模10d高糖组〉建模40d低糖组〉建模40d高糖组（p〈0．05），分化能力建模10d低糖组〉建模40d低糖组、建模10d高糖组及建模40d高糖组（p〈0．01）。建模10d低糖组可形成钙结节，其他组未能形成钙结节。结论：建模时间延长、高糖培养对糖尿病大鼠下颌骨来源成骨细胞的各项生物学活性指标均产生负面影响，其中建模时间主要抑制了细胞增殖，而高糖培养主要抑制了细胞的分化和矿化。

简介：重症肝功能衰竭是导致死亡的主要疾病之一。目前,肝移植是其唯一有效的临床治疗手段,但供体不足及伦理等问题,使不能及时得到治疗而死亡的患者正在逐年增多,随着组织工程学的发展,人们都寄希望于生物型人工肝脏。笔者正在研究开发三维立体肝细胞培养支架材料,探索体外肝组织再构筑技术和方法,实现高效生物型人工肝脏。笔者研究根据半乳糖残基与肝实质细胞表面的脱唾液酸糖蛋白受体的特异性结合作用,利用半乳糖残基化学改性天然高分子多糖壳聚糖,改善壳聚糖的肝实质细胞亲和性,并制成三维多孔海藻酸／半乳糖化壳聚糖海绵体肝细胞培养支架。从培养细胞形态学和肝功能等生化学分析角度考察了用该支架培养肝实质细胞的聚集体形成及肝功能等。