简介：以固定化人工膜（immobilizedartificialmembrane，IAM）为基质动态固定胰蛋白酶，研究缓冲液种类、浓度、pH值对胰蛋白酶在IAM上的固载率和酶活性的影响。本课题选择硼酸盐、磷酸盐、Tris？HCl三种缓冲液体系，考察了缓冲液浓度及pH值对IAM固载胰蛋白酶的影响，并建立以酪蛋白为底物测定固定化胰蛋白酶的活性的方法，优化了动态固定化胰蛋白酶的条件，为进一步研究在线固定化酶解反应器奠定基础。

简介：胰蛋白酶在近江牡蛎的酶解工艺中酶解温度、加酶量、底物浓度和pH等因素对水解度影响较大。通过正交试验和从能源、节省时间和操作方便性等角度出发，确定牡蛎酶解的最佳工艺条件为：温度45℃，加酶量1．2％，底物浓度1：2，pH7．0，酶解时间5h。

简介：

简介：目的通过测定转基因食品的胰蛋白酶抑制剂活性，为建立转基因食品营养评价标准提供数据。方法首先通过探讨胰蛋白酶-底物-胰蛋白酶抑制剂的剂量反应关系，建立转基因食品胰蛋白酶抑制荆活性测定的最佳反应体系，并以此为基础分析了部分转基因玉米、大豆的胰蛋白酶抑制剂活性及与亲本食品的差别。结果所检转基因食品胰蛋白酶抑制剂活性大多与亲本食品差别不大，尽管个别产品出现胰蛋白酶抑制剂活性增高或降低现象，但都在可接受范围。结论在规范检测技术前提下加强对非转基因食品基础数据建设对制定转基因食品营养评价标准十分必要。

简介：目的：探索果蝇脑神经元胰蛋白酶急性分离的新方法.方法：解剖果蝇晚三龄幼虫脑组织,用胰蛋白酶化学消化并辅以机械微振荡法分离制备单个细胞,用果蝇细胞培养液适当孵育.在倒置相差显微镜下对其进行形态学观察和分类,结合全细胞膜片钳技术对其电生理学特性进行初步研究.结果：该方法成功制备出三类大小和形态各异、活性较好的果蝇脑神经元,未见神经胶质细胞;以三型细胞为电生理学研究对象,记录到五种类型的全细胞外向钾电流.结论：我们建立的果蝇晚三龄幼虫脑细胞急性分离方法简便易行,稳定可靠.

简介：摘要目的考察不同胰蛋白酶及消化后是否弃去胰蛋白酶对Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney，MDCK)细胞消化效果的影响，并评价培养基中添加胎牛血清对减轻胰蛋白酶细胞毒性的作用。方法选用5种胰蛋白酶分别消化MDCK细胞，消化5 min后弃去胰蛋白酶为弃去组，不弃去为保留组。观察消化过程，记录细胞达到不同状态所需的时间。完全消化后，检测细胞的活率、结团率、直径。以不同浓度的胰蛋白酶消化MDCK细胞，按培养基是否添加胎牛血清分为含血清和无血清组，检测细胞活性。结果重组胰蛋白酶消化时间长于动物源胰蛋白酶。保留和弃去组细胞活率均值都大于94.77%，结团率均值均大于34.56%，直径均值分别为17.33和16.97 μm且差异有统计学意义(t＝4.632, P<0.001)。细胞活性随胰蛋白酶添加量呈现梯度变化。含血清和无血清组的细胞活性差异有统计学意义(t＝12.545, P<0.001)。结论5种胰蛋白酶均可完全解离贴壁MDCK细胞，其中重组胰蛋白酶消化时间较长，作用温和，比较适合生产。弃去胰蛋白酶再继续消化的做法可行且有益，胰蛋白酶浓度对细胞活性有影响，胎牛血清可以减轻胰蛋白酶的潜在毒性。

简介：目的探讨类胰蛋白酶（tryptase）和类糜蛋白酶（chymase）在过敏反应死亡中表达及其与过敏反应死亡和冠心病猝死的关系,为过敏反应死亡的病理诊断和法医学鉴定提供新的形态学依据。方法从本教研室2008—2011年尸检档案中挑选病例70例,并搜集其原始档案资料、福尔马林固定包埋的心脏及肺脏蜡块,复阅HE切片。分为四组：A组：冠心病猝死（SCD,20例）;B组：冠心病非猝死者（CHD,20例）;C组：过敏性猝死（10例）;D组：阴性对照（无明显动脉粥样硬化病变的死者,20例）。应用免疫组化染色（SP法）和图像定量分析法,观察每例肺脏、心脏的类胰蛋白酶和类糜蛋白酶染色情况和光密度。结果SCD组、CHD组、过敏反应死亡组缺血心肌及肺脏内tryptase表达的OD值均高于阴性对照组,各组间比较均有显著差异（P〈0.05）。肺脏内chymase表达的OD值在SCD组、CHD组和过敏反应死亡组均大于阴性对照组（P〈0.05）,SCD组、CHD组和过敏反应死亡组两两比较均无统计学意义（P〉0.05）。结论类糜蛋白酶虽然在过敏反应死亡和冠心病猝死时表达有增强,但是表达量比较少,两者之间基本相同,该蛋白酶作为鉴别过敏反应死亡和冠心病猝死证据尚不充分。类胰蛋白酶在过敏反应死亡和冠心病猝死心和肺表达显著增强,可以作为过敏反应死亡和冠心病猝死医学鉴别的重要参考指标之一。

简介：摘要酶作为一种生物催化剂具有高效、高选择性、催化反应条件温和、无污染等特点，在食品、医药和化工等产业中的得到了广泛认同。近年来，酶的固定化技术的发展使游离酶不稳定和易变性等缺点得以克服。本实验通过利用包埋-交联法将胰蛋白酶固定化，在不同频率的电刺激下，分析交变电场对固定化胰蛋白酶催化活性的影响。研究表明包埋-交联法固定化胰蛋白酶性能较理想，在交变电场下固定化的胰蛋白酶催化苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)时，不同频率下的吸光度有明显变化，说明改变反应体系所在的交变电场频率可以改变固定化胰蛋白酶的活性。

简介：摘要目的观察类胰蛋白酶对肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原和蛋白水解酶激活受体-2(PAR-2)表达的影响，探讨类胰蛋白酶在肝纤维化中的作用。方法用Percoll密度梯度离心法分离、培养大鼠HSC，经系列浓度类胰蛋白酶作用后，应用RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和PAR-2mRNA的表达。结果类胰蛋白酶(1～100ng/ml)能够促进HSCⅠ型胶原及PAR-2mRNA的表达，此作用呈剂量依赖性(各实验组与对照组比较，P<0.05）。结论类胰蛋白酶可能通过PAR-2作用于HSC，促进HSC表达Ⅰ型胶原，参与肝纤维化的发生发展过程。

简介：摘要α-1抗胰蛋白酶缺乏症是一种常染色体共显性遗传性疾病，以血液中低水平的α-1抗胰蛋白酶为标志，临床上主要表现为年轻患者的肺气肿和急/慢性肝损伤甚至肝癌等，治疗方法包括对症治疗和α-1抗胰蛋白酶的补充，但无法阻止肝脏纤维化的进展。目前国内已有10余例该疾病的报道，但是对该疾病的认识仍然不足，生物治疗药物空白。现就肝细胞移植治疗该疾病的研究进展进行介绍。

简介：

简介：通过检测尿液样本中的某些指标诊断膀胱肿瘤是目前研究的一个热点，作者采用相关技术验证了一系列具有一定临床应用价值的膀胱肿瘤标志物。在本文中介绍4种潜在的无创诊断膀胱肿瘤的标志物。作者总共检测124例患者的尿液样本，其中63例确诊为膀胱肿瘤，61例为正常对照。

简介：在真核生物细胞中,许多具有生物活性的多肽和蛋白是在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白酶切割后激活形成的.弗林蛋白酶(Furin)就是这个内切蛋白酶家族重要成员之一,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长医子、血清蛋白、基质金属蛋白酶、受体、病毒囊膜蛋白和细菌外毒素等.近年来Furin得到了迅速而广泛的研究,本文简介了它的表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染的关系,以及它的抑制剂.

简介：摘要目的探讨胎膜早破（PROM）孕妇外周血和胎膜组织中氧化型α1-抗胰蛋白酶（ox-AAT）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）表达的临床意义。方法回顾性分析2019年4月至2020年4月江苏省滨海县人民医院收治的95例PROM产妇的临床资料，依据是否合并组织学绒毛膜羊膜炎（HCA）分为PROM合并HCA组（31例）和PROM未合并HCA组（64例），另选择同期50例正常妊娠产妇作为健康对照组。比较各组外周血和胎膜组织中ox-AAT、NE表达水平。结果PROM合并HCA组外周血ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（2.34 ± 0.02） ng/L比（1.50 ± 0.12）和（0.32 ± 0.04） ng/L和（0.48 ± 0.08）ng/L比（0.13 ± 0.06）和（0.11 ± 0.05） ng/L]，PROM未合并HCA组外周血ox-AAT水平高于健康对照组[（1.50 ± 0.12） ng/L比（0.32 ± 0.04）ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。PROM合并HCA组胎膜组织中ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（0.031 ± 0.005） ng/L比（0.015 ± 0.002）和（0.009 ± 0.003） ng/L、（0.020 ± 0.002） ng/L比（0.003 ± 0.001）和（0.002 ± 0.001） ng/L]，PROM未合并HCA组胎膜组织中ox-AAT水平高于健康对照组[（0.015 ± 0.002） ng/L比（0.009 ± 0.003） ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关分析显示外周血中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.879， P<0.05），胎膜组织中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.875， P<0.05）。PROM合并HCA组和PROM未合并HCA组胎盘早剥发生率较健康对照组高[32.26%（10/31）、20.31%（13/64）比4.00%（2/50）]，PROM合并HCA组新生儿肺炎发生率较PROM未合并HCA组和健康对照组高[25.81%（8/31）比9.38%（6/64）和2.00%（1/50）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论ox-AAT在PROM产妇外周血和胎膜组织中过表达，NE在合并HCA的PROM外周血和胎膜组织中过表达，ox-AAT和NE表达增强与围生期不良结局密切相关。

简介：摘要目的探讨胎膜早破（PROM）孕妇外周血和胎膜组织中氧化型α1-抗胰蛋白酶（ox-AAT）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）表达的临床意义。方法回顾性分析2019年4月至2020年4月江苏省滨海县人民医院收治的95例PROM产妇的临床资料，依据是否合并组织学绒毛膜羊膜炎（HCA）分为PROM合并HCA组（31例）和PROM未合并HCA组（64例），另选择同期50例正常妊娠产妇作为健康对照组。比较各组外周血和胎膜组织中ox-AAT、NE表达水平。结果PROM合并HCA组外周血ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（2.34 ± 0.02） ng/L比（1.50 ± 0.12）和（0.32 ± 0.04） ng/L和（0.48 ± 0.08）ng/L比（0.13 ± 0.06）和（0.11 ± 0.05） ng/L]，PROM未合并HCA组外周血ox-AAT水平高于健康对照组[（1.50 ± 0.12） ng/L比（0.32 ± 0.04）ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。PROM合并HCA组胎膜组织中ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（0.031 ± 0.005） ng/L比（0.015 ± 0.002）和（0.009 ± 0.003） ng/L、（0.020 ± 0.002） ng/L比（0.003 ± 0.001）和（0.002 ± 0.001） ng/L]，PROM未合并HCA组胎膜组织中ox-AAT水平高于健康对照组[（0.015 ± 0.002） ng/L比（0.009 ± 0.003） ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关分析显示外周血中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.879， P<0.05），胎膜组织中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.875， P<0.05）。PROM合并HCA组和PROM未合并HCA组胎盘早剥发生率较健康对照组高[32.26%（10/31）、20.31%（13/64）比4.00%（2/50）]，PROM合并HCA组新生儿肺炎发生率较PROM未合并HCA组和健康对照组高[25.81%（8/31）比9.38%（6/64）和2.00%（1/50）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论ox-AAT在PROM产妇外周血和胎膜组织中过表达，NE在合并HCA的PROM外周血和胎膜组织中过表达，ox-AAT和NE表达增强与围生期不良结局密切相关。

简介：

简介：癫痫持续或反复发作可导致不可逆性脑损害。钙蛋白酶（calpain）是一种Ca2＋依赖的蛋白酶，参与神经细胞的坏死、凋亡，在癫痫的病理生理发展过程中起着重要作用。

简介：摘要目的比较不同公司生产的无血清培养基对病毒性疫苗生产用Vero细胞培养效果，及基因工程胰蛋白酶的细胞消化效果，以判断是否适用。方法实验组用VirusPro Vero-A培养基进行Vero细胞的培养，用Trpzyme消化细胞。对照组用VP-SFM培养基进行细胞培养，用TrypLE Select消化细胞。两组Vero细胞以相同密度接种在T175培养瓶中，以相同的培养条件和传代方法在T175瓶和细胞工厂中各培养3代。培养期间观察细胞的上清液、形态以及汇合度，消化后检测细胞活率并计算细胞收获量。采用配对t检验比较两组消化液的pH值、总消化时长、37 ℃消化孵育时长、细胞活率以及细胞收获量。结果两组细胞生长状态均良好。配对t检验显示，实验组消化液的pH值(6.99)、总消化时长(17.28 min)和37 ℃消化孵育时长(6.93 min)均值均大于对照组消化液(分别为6.75、12.34 min、3.30 min)，细胞活率(94.79%)及细胞收获量(T175瓶：3.91×107个；细胞工厂：1.90×109个)均值均高于对照组的(分别为90.20%、3.33×107个、1.26×109个)，且差异有统计学意义(t值分别为9.17、3.46、2.98、2.31和4.38，P值均<0.05)。结论实验组无血清培养基培养效果较好，实验组基因工程胰蛋白酶细胞消化液温和、细胞损伤小，均适用于Vero细胞。

简介：大豆胰蛋白酶抑制剂是大豆中主要的抗营养因子，降低了大豆制品的营养质量和食用安全性，在大豆制品加工过程中必须使其失活。介绍了通过热处理、微波技术、压力处理、超声波处理、高压脉冲电场、化学还原、酚类化合物络合、酶法水解、微生物发酵及亲和色谱分离等钝化大豆胰蛋白酶抑制剂的方法。

简介：