简介:摘要:目的 探讨干细胞培养所需饲养层的制备方法。 方法 采用胰蛋白酶消化法,将小鼠胚胎制成细胞悬液接种培养。用丝裂霉素 C处理 MEF细胞制备饲养层,观察处理后的细胞活力及有无再增殖现象。结果 采用 0.0625% 胰蛋白酶消化小鼠胚胎组织获得高活力的 MEF细胞,用丝裂霉素 C处理前后 MEF细胞无明显增值,细胞活力在 90%以上。结论:该方法可获得高活力的 MEF细胞。丝裂霉素 C处理后的 MEF细胞种植到明胶包被的 6孔板中,在 1周内可用于干细胞的培养。
简介:摘要:目的 探讨干细胞培养所需饲养层的制备方法。 方法 采用胰蛋白酶消化法,将小鼠胚胎制成细胞悬液接种培养。用丝裂霉素 C处理 MEF细胞制备饲养层,观察处理后的细胞活力及有无再增殖现象。结果 采用 0.0625% 胰蛋白酶消化小鼠胚胎组织获得高活力的 MEF细胞,用丝裂霉素 C处理前后 MEF细胞无明显增值,细胞活力在 90%以上。结论:该方法可获得高活力的 MEF细胞。丝裂霉素 C处理后的 MEF细胞种植到明胶包被的 6孔板中,在 1周内可用于干细胞的培养。
简介:摘要:目的:MDCK细胞为犬肾成纤维细胞,呈不规则圆型梭状。本实验是为了选择优质的细胞培养基础培养基,满足MDCK细胞贴壁增殖的需要,制备优良的MDCK细胞,为下一步制备流感病毒疫苗打下好的基础。方法:本次实验研究主要是选择不同的细胞培养基础培养基,MEM、DMEM(高糖)、DMEM(低糖),采用来源于美国ATCC提供的MDCK细胞进行贴壁连续传代培养,连续同等条件下传3代,通过镜下观察及细胞计数比较MDCK细胞,应用不同培养基连续传代培养的效果。结果:通过显微镜下观察及细胞计数,综合评价细胞生长效果,选择出适合于MDCK细胞贴壁培养的最佳基础培养基。结论:通过对以上结果的分析,MEM基础培养基及DMEM(H)基础培养基均可用于MDCK细胞培养,但是MEM基础培养基可保持稳定的细胞对数生长期,DMEM(H)促进细胞前期生长较快。