简介：摘要目的探讨骨骼肌细胞Syncytin-1过表达对脊髓前角运动神经元-骨骼肌细胞-施万细胞共培养模型炎性因子、钠离子依赖性中性氨基酸转运体1(ASCT1)和神经保护因子的影响。方法(1)体外原代培养脊髓前角运动神经元、骨骼肌细胞、施万细胞，免疫荧光染色分别检测细胞胆碱乙酰转移酶(ChAT)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙结合蛋白B(S100B)的表达进行鉴定。(2)将Syncytin-1重组质粒及空载质粒分别转染骨骼肌细胞后24 h，与另外2种细胞混合，分别建立3种细胞的共培养模型(Syncytin-1重组质粒转染组：Syncytin-1重组质粒转染的骨骼肌细胞、脊髓前角运动神经元、施万细胞混合；空载质粒转染组：空载质粒转染的骨骼肌细胞、脊髓前角运动神经元、施万细胞混合)。于倒置显微镜下观察共培养细胞形态及连接的变化。共培养48 h后应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测2组共培养细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)的浓度，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting分别检测2组共培养细胞Syncytin-1、ASCT1、TNF-α、iNOS、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果(1)免疫荧光染色检测显示：脊髓前角运动神经元中ChAT阳性表达细胞、骨骼肌细胞中α-SMA阳性表达细胞、施万细胞中S100B阳性表达细胞均占95%以上，且定位在细胞质内。(2)Syncytin-1重组质粒转染组及空载质粒转染组共培养细胞的数量及形态未见明显差异。与空载质粒转染组比较，Syncytin-1重组质粒转染组共培养细胞上清液TNF-α、iNOS及VEGF的浓度均增高，细胞TNF-α、iNOS、Syncytin-1、VEGF mRNA和蛋白的表达均增高，ASCT1 mRNA和蛋白的表达均降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论骨骼肌细胞Syncytin-1过表达可以引起共培养细胞炎性因子释放、ASCT1表达降低、神经保护因子VEGF表达增高。

简介：随着对侵袭性真菌感染认识的提高，早期经验性抗真菌治疗被越来越多的临床医师采用，但在非移植、非粒细胞缺乏领域经验治疗的作用尚未明确，早期诊断是提高治疗准确性、降低过度治疗以及由此产生的真菌耐药、医疗资源耗费及不良反应增加等的关键。由于组织病理和培养技术的灵敏度低、耗时长，难以满足临床需要，非培养技术成为近年研究热点，并已被批准用于血液系统恶性疾病、实体器官移植受者等免疫受损人群侵袭性真菌感染的诊断“，在非移植、非粒细胞缺乏的重症患者中也受到广泛重视。

简介：目的在验证不同浓度叶酸培养影响人正常肝细胞系增殖、周期和迁移能力的基础上,应用转录组测序（RNASeq）技术筛选差异表达基因,为进一步探讨叶酸缺乏与基因差异表达以及正常肝细胞恶性转化之间的相关性打下基础。方法不同浓度叶酸培养（无叶酸组0mg/L,正常叶酸组40mg/L）的人正常肝细胞系QSG-77016个月,应用CCK-8实验检测细胞增殖、流式细胞技术检测细胞周期、细胞凋亡、Transwell小室检测细胞迁移;利用RNA-Seq技术对两组细胞中的mRNA进行检测,筛选差异mRNA;通过用实时定量PCR对RNA-Seq的结果进行验证,并结合统计学和生物信息学方法分析差异mRNA。结果无叶酸培养显著提高QSG-7701细胞的增殖能力,促进细胞由静止期进入分裂期,促进细胞的迁移能力;RNA-Seq检测得到含有16774条差异mRNA的数据集,初步分析显示其中391条差异mRNA可能与不同浓度叶酸培养相关,其中上调的115条,下调的276条;随机对其中11条进行实时定量PCR验证,72.73%的结果与RNA-Seq一致;分析显示,差异mRNA相对应的基因与细胞周期等生理过程以及多种肿瘤的发生、发展密切相关。结论最终筛选出参与叶酸调控正常肝细胞恶性转化相关的基因,RNA-Seq技术能有效地用于差异基因地筛选。

简介：这些均提示TGFβ1在肝损伤引起的细胞凋亡中起作用,抑制细胞凋亡可达到保护肝细胞损伤的目的,体内及体外试验均发现它们可诱导肝细胞发生凋亡（1）

简介：摘要目的探究敲减角质形成细胞KRT5基因对共培养黑素细胞黑素含量的影响，以解释屈侧网状色素沉着症（DDD）的色素增加性皮损形成的机制。方法通过成簇的规律间隔的短回文重复序列-相关蛋白9（CRISPR-Cas9）技术获得KRT5基因杂合突变的HaCaT细胞，将转染非靶向单向导RNA：Cas9蛋白复合物的HaCaT细胞设为对照组，分别与人原代黑素细胞HEMn体外共培养。免疫荧光观察共培养细胞中细胞角蛋白及黑素小体表达；差异胰酶消化获得不同共培养组中黑素细胞，检测细胞内黑素含量。免疫组化检测1例KRT5突变DDD患者皮损和正常对照皮肤中黑素细胞特异性前黑素小体蛋白17（Pmel17）的表达改变。结果Sanger测序显示，实验组HaCaT细胞KRT5基因第1外显子起始密码子发生杂合突变（c.1delA），对照组HaCaT细胞KRT5基因未发生突变。Western印迹显示，实验组HaCaT细胞KRT5蛋白表达水平（0.60 ± 0.05）显著低于对照组（1.00 ± 0.00，t = 32.38，P = 0.001）。HEMn细胞与实验组HaCaT细胞共培养体系中Pmel17标记的黑素小体较与对照组共培养体系增多，且细胞内黑素含量增加52.5%，差异具有统计学意义（t = -3.48，P = 0.025）。KRT5突变DDD患者皮损组织中Pmel17表达量较正常对照皮肤增加。结论本研究通过CRISPR-Cas9诱导KRT5基因突变的HaCaT细胞，与黑素细胞在体外建立共培养细胞模型，验证了其对共培养黑素细胞的影响，为进一步研究角质形成细胞与黑素细胞相互作用机制以及皮肤色素异常的发病机制提供了初级研究模型。

简介：目的：探讨建立一种新的从膨胀液中提取脂肪间充质干细胞（ADSCs）的分离方法。方法：收集含有脂肪间充质干细胞的膨胀液，然后从膨胀液中分离出脂肪间充质干细胞并进行体外培养，观察培养间充质干细胞生长状态，流式细胞术检测间充质干细胞干性标记物，细胞生长曲线比较新方法与运用传统方法分离脂肪间充质干细胞的增殖活性，多向诱导分化鉴定其向成骨，成软骨及成脂方向分化的能力。结果：成功建立了一种新的从膨胀液中提取脂肪间充质干细胞的分离方法；分离自膨胀液的间充质干细胞数量虽然低于与等体积脂肪组织来源的间充质干细胞，但细胞生长曲线分析结果表明其增殖速度快，生长至第8天时，密度基本等同于脂肪组织来源间充质干细胞。间充质干细胞表面分子标记物CD73，CD90，CD105，CD45，CD34，CD11b，CD19，HLA—DR表达测定结果显示正常，阳性细胞率与脂肪组织来源的干细胞相近。多向诱导分化结果显示从膨胀液中分离的脂肪间充质干细胞可以向成脂、成骨和成软骨三向分化。结论：新方法分离的细胞确为脂肪间充质干细胞，符合国际干细胞协会规定的定义标准。

简介：摘要目的研究激光照射对体外培养的婴儿血管瘤内皮细胞相关生长因子及细胞凋亡的影响。方法活化培养的婴儿血管瘤内皮细胞分为3组，强脉冲光（IPL）组（23 J/cm2，照射1次）、激光组（1 064 nm Nd：YAG激光，90 J/cm2，照射1次）和对照组（不照射激光）。照射后第1、3、7天，RT-PCR检测血管内皮生长因子（VEGF）、VEGF受体2（VEGFR-2）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA的表达，Western印迹检测VEGFR-2蛋白表达，ELISA检测细胞上清液中VEGF和bFGF的含量，流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与对照组相比，1 064 nm Nd：YAG激光照射后第7天，VEGF mRNA（0.363±0.021比1.000±0.023）、VEGFR-2 mRNA（0.483±0.017比1.001±0.031）、bFGF mRNA（0.402±0.040比1.000±0.004）表达均下降，VEGFR-2蛋白表达下降（0.332±0.055比0.768±0.096），VEGF[（69.389±24.179）ng/L比（334.506±13.084）ng/L]和bFGF[（2.386±0.151）ng/L比（9.165±0.232）ng/L]分泌减少，细胞凋亡率（18.413%±2.654%比4.300%±0.036%）上升，差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比，IPL组照射后第7天VEGF mRNA（0.436±0.041比1.000±0.023）、VEGFR-2 mRNA（0.493±0.037比1.001±0.031）、bFGF mRNA（0.490±0.044比1.000±0.004）表达下降，VEFGR-2蛋白表达下降（0.406±0.037比0.768±0.096），VEGF[（128.858±6.063）ng/L比（334.506±13.084）ng/L]和bFGF[（2.723±0.471）ng/L比（9.165±0.232）ng/L]分泌减少，细胞凋亡率上升（16.597%±1.877%比4.300%±0.036%），差异均有统计学意义（P<0.05）。结论1 064 nm Nd：YAG激光可能通过调节VEGF/VEGFR-2信号通路上的关键因子，以及细胞凋亡发挥对血管瘤内皮细胞的抑制作用，从而达到治疗血管瘤的作用。

简介：研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇（anan-damide，AEA）对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法：对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养，并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0，0．1，1．0，10／μmol／L的无血清培养液，作用24h后提取细胞上清液，并将细胞置于倒置显微镜下摄像，计算机图像分析系统计算细胞面积。用ELISA法检测PGE2浓度的变化。结果：AEA可以产生明显的细胞舒张效应，呈浓度依赖性。而且在一定范围内可以成剂量依赖性的促进PGE2的表达。与对照组均有显著性差异（P〈0．05）。结论：AEA可引起小梁细胞的舒张和促进PGE2的释放。

简介：目的研究体外分离、培养人左心耳c-kit＋（CD117）心脏干细胞（c-kit＋CSCs）的技术方法,为进一步研究心脏干细胞生物学特性、药物筛选和以后的临床应用提供技术支持.方法心脏手术中切取部分左心耳组织,经Ⅱ型胶原酶消化,接种培养、传代后进行流式细胞表面标志鉴定和无菌分选.结果通过单纯的酶消化方法可以成功地从人左心耳组织中分离出单个干细胞,流式细胞仪鉴定其表型为经典的心脏干细胞表型——c-kit＋,多次传代后c-kit＋持续高表达,无菌分选后可获得高纯度的c-kit＋心脏干细胞.结论本研究技术可从人左心耳组织中分离培养出阳性率较高的c-kit＋心脏干细胞,无菌分选后可获得高纯度的c-kit＋心脏干细胞,进一步培养短期内可获得大量的用于实验和临床的c-kit＋心脏干细胞.

简介：

简介：美国加利福尼亚大学洛杉矶分校宣布，该校研究人员用一种基于纳米技术的新方法，成功地对癌细胞进行了检测。该校琼森癌症中心在声明中说，癌细胞通常要比建康细胞更柔软一些，根据这个特点，科研人员使用纳米显微镜等设备触探细胞并检测其柔软度，当细胞的柔软度较高时，则表明它已经发生了癌变。

简介：美国加利福尼亚大学洛杉矶分校研究人员用一种基于纳米技术的新方法，成功地对癌细胞进行了检测。

简介：摘要细胞工程是四大生物工程之一，在生物、医学等许多领域取得了开创性的研究成果。细胞融合方法得到不断更新，融合率也得到逐步提高。该技术在细胞遗传学、单克隆抗体及种质资源的开发利用等方面的研究具有重要意义。因此本文对细胞融合的定义机理、应用及融合技术方面的相关研究成果进行总结和阐述。

简介：肝细胞移植在治疗急性肝衰竭和遗传代谢性肝病等方面有着十分广阔的应用前景。但肝细胞分离技术仍不完善,需进行深入研究和探讨,以提高细胞的活性和数量,保留细胞功能。文章就肝细胞基本的分离方式及主要实验物种的相关分离方法的进展进行综述。

简介：摘要目的探讨滤除白细胞输血技术在输血中的应用效果。方法将我院64例输血患者，按照输血方式的不同将其分为观察组和对照组，每组32例。观察组采取滤除白细胞输血技术措施,对照组采取常规输血措施。结果观察组中,无效0例，有效32例，输血有效率100%;对照组中,无效2例，有效30例，输血有效率93.75%。观察组输血有效率显著高于对照组,且差异较大,存在统计学意义(P<0.05)。结论将滤除白细胞输血技术运用于输血工作中,充分满足患者生理和心理上的需求,有助于提高疗效,可帮助患者及时恢复,对临床症状和预后的改善具有良好的促进作用，效果显著，输血满意度高，值得临床推广与运用。

简介：

简介：摘要

简介：摘要：单细胞技术指的是将单个细胞进行分离、分析和操作的技术。通过使用高通量单细胞测量仪器和分离和扩增单个细胞的方法，单细胞技术可以破解不同细胞之间的异质性，以便进行深入的研究和了解细胞在基因表达、蛋白质结构和亚细胞组织等方面的变化。这一技术自问世以来，为研究干细胞组织修复与药物研发领域带来了新的可能与潜力。本文将探究单细胞技术在干细胞组织修复与药物研发中的应用。

简介：背景：干细胞转化技术研究已成为干细胞研究的一个活跃领域,对干细胞基础研究及临床研究均产生巨大的推动作用。目的：对干细胞转化技术研究现状及进展做一综述。方法：在标题和摘要中,以＂Stemcells,Transformation,differentiation＂或＂干细胞,转化,分化＂为主题检索词,检索中国期刊全文数据库（CNKI）、PubMed数据库中2000年1月至2015年4月关于干细胞分化技术的文章。优先选择近期发有或发表在权威杂志上的文章。初检得到121篇文章,根据纳入标准,选择其中的64篇进行综述。结果与结论：干细胞转化技术近些年来取得了较大的进展,包括改进培养液的配比,增加特定的诱导因子、蛋白质、酶、受体,注射特定的基因,使用新氧化剂,改善培养微环境,在低氧环境下培养,使用支架,采用转基因技术,三维球形培养,共培养等。干细胞转化新技术的诞生和使用,显著提高了干细胞的转化率,为人类难治性疾病的治疗带来希望。

简介：【摘要】目的：探讨免疫细胞化学技术在胸腹水细胞学诊断中的意义。方法：我院选取于2019年6月至2020年6月接收的190例胸腹水患者的胸腹水细胞为研究对象，每位患者提取出两份标本，分为研究组和对照组，研究组采用免疫细胞化学法，对照组应用常规脱落细胞学，比较两组的总检出率。结果：研究组总检出率高于对照组，差异十分显著且具有统计意义(P＜0.05)。结论：免疫细胞化学技术对胸腹水性质的判断及确定肿瘤的类型有重要的辅助作用，能提高准确率。