简介：目的构建长链非编冯RNABRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BREAS1的全长目的片段，将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDHCMVMC8EF1分别双酶切后进行连接，转化到感受态大肠杆菌后，通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落，提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒，并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2，分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BREAS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BREAS1全长序列，经过双酶切、连接、转化、筛选及I）NA测序，成功构建重组慢病毒载体质粒pCDH-BRE-AS1。通过荧光显微镜检测，几乎昕有经过嘌呤霉素筛选的OSRC2细胞均具有绿色荧光，显示其被重组慢病毒感染；荧光实时定量PCR显示，感染了RNABRE-AS1慢病毒的OSRC2细胞中，BREAS1的表达水平上升了38．5倍。EdU插入实验显示BREASl抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体，并证明BREAS1能抑制肾癌细胞增殖。

简介：目的构建针对人抑凋亡基因Livin的小干扰RNA（siRNA）重组表达质粒载体。方法通过分子克隆技术,设计并合成具有基因特异性的3组寡核苷酸片段,克隆到pmU6质粒载体,并经菌落PCR鉴定及测序鉴定,Livin的siRNA序列成功克隆到重组表达质粒载体中。结果经菌落PCR鉴定及测序鉴定证实,人Livin的siRNA序列成功克隆到表达载体中,插入序列正确。结论成功构建了LivinsiRNA质粒表达载体,为后续研究降低或沉默Livin基因表达后能否有效抑制膀胱癌细胞增殖和促进细胞凋亡奠定了基础。

简介：追求健康是人生的需要，是建设创新型国家的需要，也是提高人类生存质量增强自我保健能力的一件大事，它是构建社会主义和谐社会的重要组成部分。

简介：目的探讨以纤维蛋白凝胶为支架，通过组织工程技术以胃．重建膀胱的可行性。方法从实验动物获取膀胱黏膜，体外培养并扩增移行上皮细胞。分别通过纤维蛋白凝胶（实验组）和keratinocyte-SFM（对照组）将单个细胞悬液移植于带血管蒂的去黏膜胃片，将胃片缝成囊状（新膀胱），固定于腹壁。于术后2、4、6、8周取胃片进行组织学及免疫组化分析。结果实验组术后随时间延长新膀胱有不同程度挛缩；HE染色提示胃囊腔面有上皮样细胞覆盖，2周时细胞覆盖率约50％，4—8周时约70％。这些细胞分布不均匀，分层不明显；上皮样细胞AE1／AE3染色和CK7染色均阳性。对照组各标本均严重挛缩，腔隙消失，无上皮覆盖。结论将体外培养扩增的尿路上皮细胞通过纤维蛋白凝胶移植至去黏膜胃片，可以使去黏膜胃片移行上皮化，从而重建膀胱。

简介：目的优化经尿道前列腺切除术的操作方法.方法在170例次经尿道前列腺切除过程中,对某些习惯性操作进行尝试性改进.主要改进要点是,直视进镜、穿刺造瘘、强凝弱切、气化电切、不切"11～12～01"点.结果优化操作,可放宽适应证、提高手术效率、减少术中出血、降低术后并发症.结论优化操作值得推广.

简介：目的：构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法：应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR、WesternBlot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果：测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论：成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。

简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.

简介：小分子RNA在基因表达调控方面起着至关重要的作用。10年前研究发现小分子双链RNA（dsRNA）进入细胞后能导致同源性基因表达沉寂，即RNA干扰现象（RNAi）。RNAi是由与靶基因具有同源性的dsRNA诱发的，这些dsRNA可产生于细胞内，由RNA酶Dicer将长的双链RNA分子切割成21个碱基对片断而生成；也可以在细胞外人工合成，然后引入细胞。dsRNA与细胞内Argonaute蛋白结合，形成RNA诱导沉寂复合物，

简介：肾脏疾病是症状性高血压最常见的原因，而高血压又是慢性肾脏疾病患者心脑血管疾病死亡的重要危险因素。因此，在肾脏疾病患者中，控制血压对肾脏疾病的预后至关重要，同样对肾脏疾病进行治疗也是消除某些继发性高血压的关键。在大多数肾脏疾病中，高血压随肾脏疾病进展而加重。

简介：据统计，在美国有三千万男性因吸烟或吸二手烟而患阳痿，加上由于其它原因引起的阳痿患者二千万，差不多占了美国成年男性将近一半。而这个问题，也是一个世界性的普遍问题，近年来日益攀高的离婚率与此也有相当大的关系。对于阳痿的治疗，西医的办法不是很多，而中医则是采用一般的中药（壮阳药），和一般的常规针灸治疗，但有时效果往往欠佳。特别是患者有糖尿病，或者是有心理障碍，或者是前列腺病等。笔者经过多年临床观察及研究，发现采取下述太极针灸方法，有时往往有其独特的疗效。

简介：狼疮肾炎是系统性红斑狼疮重要的并发症，是狼疮患者发生肾衰竭和死亡的主要原因。在20世纪的50年代，WHOⅣ型狼疮肾炎的患者极少能生存5年，而现在80％的患者能达到10年。这些成就得益于免疫抑制剂的发展，霉酚酸酯（MMF）是一种用于诱导和维持狼疮肾炎缓解的免疫抑制剂，相对易于被患者耐受，常被用于肾、肝和心脏移植术后，

简介：1.数值范围号的使用应统一,一般使用浪纹连接号＂~＂。例如：5至10可写成5~10;但5万至10万应写成5万~10万。2.幂次相同的参数范围：前一个参数的幂次不能省略。例如3×10~9~5×10~9不能写成3~5×10~9,但可以写成（3~5）×10~9。3.百分数范围：前一个参数的百分号不能省略。例如：20%~30%不能写成20~30%。

简介：1.数值范围号的使用应统一,一般使用浪纹连接号＂~＂。例如：5至10可写成5~10;但5万至10万应写成5万~10万。2.幂次相同的参数范围：前一个参数的幂次不能省略。例如3×109~5×109不能写成3~5×109,但可以写成（3~5）×109。3.百分数范围：前一个参数的百分号不能省略。例如：20%~30%不能写成20~30%。

简介：代谢综合征（metabolicsyndrome，MS）是由中心性肥胖启动，以胰岛素抵抗（insulinresistence，IR）为共同病理生理基础，表现为肥胖、糖代谢异常、高血压、高脂血症等多种代谢紊乱的临床征候群。近年来的研究表明MS通过肥胖等多种因素综合作用引起并导致肾损害，而肾损害又可以进一步加重MS，所以，肾脏在MS发生过程中发挥举足轻重的作用。

简介：CD71分子，又称转铁蛋白受体（TfR），是与细胞的成熟、增殖、分化密切相关的分子，在许多类型的细胞表面均有表达。目前对CD71的研究已涉及到血液、肿瘤等许多与免疫相关的领域，但国内外对它与肾脏疾病的关系研究甚少，本文主要讨论它的功能作用与IgA肾病的关系。

简介：中医男科是近20多年以来发展和建立起的一个新兴学科。由于它适应了社会发展的需要，解决了男人及家庭生活中的实际问题，得到了人民大众的认可，填补了医学上这门学科的空白。迅速发展中医男科已成为趋势，具有广阔的发展前景。

简介：孔子曰：“食色，性也。”可见，性行为是人的一种“本能”，是人的一种“自然属性”。然而拥有双重属性的人的另一属性“社会属性”，在让人与人之间产生各种各样的关系的，或多或少的都会影响或破坏这种本能。例如：作为单位的领导，工作特别忙碌与劳累，下班后只想好好休息，而淡忘了自己的性要求；作为丈夫，因生活琐事与妻子不和，久而产生隔阂，也会影响自己的性要求。

简介：后天指脾胃，“多气多血之乡”，《素问·痿论》日：“阳明者，五脏六腑之海也，主润宗筋，宗筋主束骨而利机关也。胃为水谷之海。《玉机真论》云：“五脏者皆禀气于胃，胃者五脏之本……”。“有胃气者生”，又云：“胃不和则夜卧不安。”可见胃之在人体及生命全过程何等重要。《素问·金匮真言论》云：“夫精者，身之本也。”精分先天之精与后天之精，先天之精禀受于父母，后天之精来源于水谷，两者相互依存，相互促进，俱藏于肾，

简介：不育问题惊人地困扰着15％想要组建新家庭的人群。尽管如此，不育的分子遗传因素大多还不清楚。不过，越来越多不育遗传因素正逐渐被发现。本综述主要讨论目前了解的男性不育的染色体因素，尤其是染色体非整倍体、染色体组型的结构和数量异常和Y染色体微缺失。染色体非整倍体是人类流产和发育残疾的主要原因。非整倍体主要起源于母体，但是人们正在关注单精子注射的安全性，因为不育男性的精子非整倍体水平明显比起配偶高。染色体组型结构和数量异常的男性产生非整倍体精子的风险也越来越高。本文还综述了精子非整倍体如何被翻译至胚胎非整倍体，以及植入前基因诊断在这些病例中的应用。如果可能，文章还会做一下临床方面的建议，并讨论一些新兴的阵列技术在植入前基因诊断中使用以及在男性不育的潜在应用。

简介：