简介:目的建立测定丹酚及其滴丸中6种主要丹酚酸含量的方法。方法采用HPLC法,UnitaryC18色谱柱,乙腈-0.05%磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长286nm,流速为1.1ml·min^-1,柱温为35℃。结果该色谱条件下,6种酚酸类成分可完全分离。丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和丹酚酸A的线性范围分别为2.07~20.66μg·mL^-1(r=0.9998)、2.53~25.30μg·mL^-1(r=0.9999)、8.12~40.60μg·mL^-1(r=0.9999)、11.24~56.20μg·mL^-1(r=0.9999)、99.60~996.00μg·mL^-1(r=0.9999)、1.00~10.02μg·mL^-1(r=0.9998),6种成分的平均回收率为99.24%~101.55%,RSD均小于2%。结论该测定方法准确度高,重复性好,专属性强,可同时测定丹酚及其滴丸中6种丹酚酸的含量。
简介:摘要目的通过提取工艺研究实验,对滇丹参中丹酚酸B的提取与纯化方法进行研究,选出最合适的工艺方法。方法本次工艺提取与纯化情况研究选用的工艺指标主要是滇丹参之中的丹酚酸B的基本含量,通过正交试验的方法将滇丹参药材中的可提取的丹酚酸B进行提取,并进一步纯化。结果完成提取工艺研究试验后,确定最为合适的提取条件如下在8倍水量的条件之下,煎煮2次,每次持续一个小时,精选絮凝沉降剂,ZTC1+1是最佳选择,药液的基本浓度需要被控制在1g/5mL,絮凝剂的使用量要控制在AB=24,搅拌速度需要达到每分钟100r,在这种条件下,获取的丹酚酸B成分的含量是最高的。结论在提取与纯化滇丹参中的丹酚酸B成分的时候,可以应用絮凝澄清的提取方法来制作水提液,这种方法需要使用的提纯液用量相对比较节省,不会造成污染。
简介:目的:考察游离脂肪酸(FFA)诱导足细胞凋亡的作用,以及中药组分丹酚酸与黄芪多糖防治FFA诱导的足细胞凋亡的效果。方法:采用永生化小鼠足细胞株,通过温度选择的培养方法诱导足细胞分化,分为空白组、FFA组(FFA30μmol/L)、FFA+丹酚酸组(10mg/L)、FFA+黄芪多糖组(0.2g/L),干预24h后收集细胞,以AnnexinV-FITC和PI双染方法,应用流式细胞仪观察各组足细胞的凋亡率。结果:加FFA组足细胞细胞凋亡率明显高于空白组,加入丹酚酸与黄芪多糖后能够减少细胞凋亡的百分比,组间比较均有统计学差异(P均〈0.01)。丹酚酸与黄芪多糖比较,无统计学差异(P〉0.05)。结论:FFA有促进足细胞凋亡的作用,而丹酚酸与黄芪多糖对足细胞的凋亡有抑制作用。
简介:摘要目的探讨慢性温和应激(chronic mild stress,CMS)抑郁症模型大鼠血液及脑中端粒长度的变化及丹酚酸B对其的影响。方法采用随机数字表法将45只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为5组:对照组、CMS组、氟西汀组、丹酚酸B组、联合用药组,每组9只,CMS共6周;在抑郁症模型造模成功后(入组后第22~42天),分别按照分组给大鼠腹腔注射0.9%生理盐水、氟西汀(每天20 mg/kg)、丹酚酸B(每天40 mg/kg)。每组在入组前和入组后每周末检测体质量,分别于入组前(第1和第2天),造模后(第21、22天)、干预后(第42、43天)通过检测强迫游泳测试和蔗糖偏爱测试评估抑郁症样行为。通过RT-PCR分析各组大鼠外周血、海马、皮质和小脑的相对端粒长度。采用两因素重复方差分析5组体质量、蔗糖偏爱值和强迫游泳不动时间的差异,Kruskal-Wallis H检验比较5组相对端粒长度的差异。采用Spearman相关分析不同部位端粒长度与体质量、蔗糖偏爱值和强迫游泳不动时间的相关性。结果干预3周后,与CMS组相比,丹酚酸B组、氟西汀组、联合用药组大鼠体质量增加(P=0.049、0.008、0.036),蔗糖偏爱值增加(P=0.089、0.094、0.041)以及强迫游泳不动时间缩短(均P<0.01)。与对照组相比,CMS组外周血相对端粒长度缩短,差异有统计学意义 [8.53(3.95)与0.12(0.23),P<0.01,Bonferroni校正P=0.002],双侧海马、皮质和小脑的相对端粒长度差异无统计学意义。与CMS组相比,丹酚酸B组(P=0.005,Bonferroni校正P=0.051)、氟西汀组(P<0.01,Bonferroni校正P=0.005)和联合用药组(P=0.001,Bonferroni校正P=0.007)外周血相对端粒长度显著增加,但在不同脑区差异无统计学意义。Spearman相关分析不同部位的端粒长度与干预后体质量、蔗糖偏爱值、强迫游泳不动时间均无相关性。结论CMS抑郁症模型大鼠外周血端粒长度缩短并不能反映脑内端粒长度的变化,丹酚酸B可使大鼠血液中端粒长度缩短,与氟西汀效果相当。
简介:目的建立HPLC法同时测定大黄牡丹汤中大黄酸、丹皮酚和芍药苷的含量。方法采用KromasilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-体积分数为0.1%的磷酸水溶液梯度洗脱,流速:1.0mL·min^-1,检测波长:230nm,进样量:10μL。结果大黄酸的线性为1.61~16.1mg·L^-1(r=0.9997),平均回收率为98.0%,RSD为0.7%;丹皮酚的线性为1.64~16.4mg·L^-1(r=0.9997),平均回收率为99.8%,RSD为1.3%;芍药苷的线性为1.54~15.4mg·L^-1(r=0.9996),平均回收率为100.3%,RSD为1.9%。结论该方法能更加全面地控制该方的质量,优化后的提取工艺可为今后剂型的改进奠定基础。
简介:摘要目的探究丹酚酸B在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)中的作用及可能机制。方法采用随机数字表法将18只健康成年雄性C57BL/6小鼠分为3组(每组6只):假手术组(Sham组)、LPS组、LPS+丹酚酸B组(LPS+SAB组)。予LPS组和LPS+SAB组小鼠气管内注射10 mg/kg LPS,Sham组气管内注射等体积PBS;经过上述处理,LPS+SAB组即刻经尾静脉注射50 mg/kg丹酚酸B,Sham组和LPS组经尾静脉注射等体积PBS。12 h后通过H-E染色观察肺组织病理改变,使用BCA法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中总蛋白浓度,ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β浓度,Western blot法检测肺组织丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)和NF-κB信号通路中p38、c-Jun氨基端激酶(c-Jun-N-terminal kinase, JNK)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)、p65蛋白及其磷酸化蛋白水平,使用丙二醛(malondialdehyde, MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)试剂盒分别检测肺组织中MDA和SOD含量。结果与Sham组比较:LPS组和LPS+SAB组小鼠肺损伤评分,BALF中总蛋白浓度及TNF-α、IL-6、IL-1β浓度,肺组织中p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-p65/p65,肺组织中MDA含量均升高(P<0.05);LPS组和LPS+SAB组肺组织中SOD含量降低(P<0.05)。LPS+SAB组小鼠肺损伤评分,BALF中总蛋白浓度及TNF-α、IL-6、IL-1β浓度,肺组织p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-p65/p65,肺组织中MDA含量均低于LPS组(P<0.05);LPS+SAB组SOD含量高于LPS组(P<0.05)。结论丹酚酸B可通过抑制肺组织炎症蛋白激活和氧化应激,从而减轻LPS诱导的小鼠ALI严重程度。
简介:摘要目的探讨丹酚酸B对人非小细胞肺癌放射敏感性的影响及其可能机制。方法MTT检测丹酚酸B对非小细胞肺癌A549、H1299细胞系的毒性作用。克隆形成实验检测丹酚酸B对放射敏感性的影响。Transwell实验检测丹酚酸B对肿瘤细胞迁移能力影响。蛋白印迹法检测丹酚酸B调控射线诱导的去泛素化酶OTUD7B及迁移标志蛋白MMP-2、MMP-9、E-cadherin、AKT及p-AKT的表达。结果丹酚酸B能抑制A549、H1299细胞增殖。克隆形成实验显示丹酚酸B可增加A549、H1299细胞放射敏感性,放射增敏比分别为1.45、1.38。Transwell实验结果显示丹酚酸B可抑制细胞迁移能力(P<0.05)。蛋白印迹法结果示射线诱导A549、H1299细胞OTUD7B表达并有时间依赖性,而丹酚酸B能通过阻抑OTUD7B表达进而抑制MMP-2、MMP-9、p-AKT表达、促进E-cadherin表达。结论丹酚酸B具有增强A549、H1299细胞放射敏感性的作用,其可能机制是丹酚酸B通过下调射线诱导的OTUD7B表达,抑制上皮-间质转化的进程而实现的。
简介:目的探讨活化血小板释放产物(PLTaRP)对内皮细胞的损伤作用及丹酚酸B的保护效应。方法分离健康人外周血血小板,以二磷酸腺苷激活后提取PLTaRP,并与EA.hy926人脐静脉内皮细胞株共培养,分为对照组、模型组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,检测各组细胞活力及乳酸脱氢酶(I.DH)释放水平。DAPI染色观察细胞核形态,比较各组细胞凋亡率。结果与对照组比较,模型组12h内LDH含量持续升高,并呈时间依赖趋势(P〈0.01),模型组、阳性对照组、低剂量组和中剂量组细胞存活率明显减低(P〈0.05,P〈0.01),高剂量组细胞存活率差异无统计学意义(P〉0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组LDH含量明显降低(P〈0.01)。结论PLTaRP可刺激EA.hy926细胞株LDH释放增加,并呈时间依赖趋势,刺激12h可使细胞活力明显下降。丹酚酸B可减少PLTaRP造成的LDH释放。高剂量丹酚酸B可明显抑制细胞凋亡。