简介：摘要目的构建BMSCs/COL-HA复合体，考察BMSCs在两种材料上的黏附与增殖，为探索更适合牙周缺损再生的组织工程支架材料提供依据。方法利用冷冻干燥仿生矿化的方法制备COL-HA。结果本实验在王晓敏，林晓艳等学者研究的基础上采用冷冻干燥的方法制备胶原-羟磷灰石多孔复合材料，并对部分材料进行交联处理，比较两种材料的生物学性能，进一步利用犬骨髓间充质干细胞BMSCs作为种子细胞，构建BMSCs/COL-HA复合体，考察BMSCs在两种材料上的黏附与增殖，为探索更适合牙周缺损再生的组织工程支架材料提供依据。

简介：摘要目的通过深低温冻存自行构建的人工植骨材料多孔羟基磷灰石(hydroxyapatiteceramic,HA)/骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs)修复兔颅骨缺损，探讨深低温冻存(Cryopreservation)方法对保存HA复合植骨材料的可行性，以方便临床使用。方法应用无菌培养法获得BMSCs与羟基磷灰石HA复合培养，获得复合植骨材料培养构成人工植骨材料。应用-80℃保存3个月的HA/BMSCs修复兔颅骨12mm缺损模型，同时以未行低温冻存的HA/BMSCs及单纯的HA分别为对照组1和2。在术后第12周进行大体观察、X线观察和HE染色等组织学观察。结果BMSCs与多孔HA构建出人工植骨材料，BMSCs在HA表面生存良好。三组模型在术后12周实验组和对照1组的骨缺损处愈合大部，有成熟骨小梁通过，有的可见髓腔通畅，塑形较好；对照2组骨痂生成少，骨缺损部分愈合，塑形欠佳，新骨生成有统计学差异（P值<0.05）。结论低温冻存的复合植骨材料的骨缺损修复能力与新制作的复合材料几乎一致，没有因为冻存而受到影响。

简介：摘要目的研究体外培养的人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)中钠离子-牛磺胆酸共转运多肽(sodium taurocholate cotransporting polypeptide, NTCP)的表达情况，探索体外培养的BMSCs能否自然感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)及NTCP是否是HBV感染BMSCs的一个功能性受体。方法将HBV阳性血清以不同方法感染BMSCs，检测培养基上清及细胞中HBV DNA、培养基上清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)等感染指标。NTCP-siRNA转染BMSCs后，再次用HBV阳性血清感染BMSCs，检测各感染指标。Western blot法检测各处理组BMSCs中NTCP的表达情况。结果HBV可自然感染体外贴壁培养的人BMSCs，但感染效率很低。当HBV感染悬浮状态下的BMSCs时，感染效率显著升高。BMSCs中存在NTCP的表达，且HBV可显著上调NTCP的表达量，特别是对悬浮状态下的BMSCs。当BMSCs中NTCP的表达被NTCP-siRNA沉默后，HBV对BMSCs的感染效率显著下降。结论体外培养的人BMSCs可被HBV自然感染，且其细胞内表达的NTCP是其感染HBV的一个功能性受体。人BMSCs可作为一种易感、稳定、无需分子修饰的细胞模型，用于研究HBV生命周期的早期阶段以及抗病毒治疗研究。

简介：摘要目的采用全骨髓贴壁法从兔骨髓中分离培养BMSCs，并进行成骨的诱导分化及鉴定。方法采用全骨髓贴壁法分离兔BMSCs，观察其形态特征；选择维生素C、β-甘油磷酸钠、地塞米松等生长因子诱导BMSCs的成骨分化，碱性磷酸酶染色测定活性；流式细胞仪检测其表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45的表达情况。结果与结论体外培养兔BMSCs成梭型，细胞扁平，胞体狭长，增殖能力强。流式细胞仪分析结果显示，第3代培养的细胞CD29和CD44阳性，CD34和CD45阴性。成骨诱导培养10d，碱性磷酸酶染色阳性。提示全骨髓贴壁法分离兔BMSCs是一种简单有效的分离方法，可作为稳定种子细胞进行体内组织工程研究。

简介：摘要目的探讨应用转染重组大鼠血小板衍生生长因子-BB (rrPDGF-BB)基因的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）对于牵张成骨的治疗效果。方法2019年10月至2020年6月,选取48只幼年SD大鼠培养出48瓶BMSCs,其中24瓶使用慢病毒转染rrPDGF-BB基因；同时随机选取雄性成年SD大鼠72只,制作大鼠右侧股骨牵张成骨模型,将大鼠平均分为3组,分别在各组牵张间隙注射PBS(空白对照组)、未干预的BMSCs（阴性对照组）和转染rrPDGF-BB基因的大鼠BMSCs（实验组）,随后用影像学和组织学染色方法等评价该实验结果。将数据进行统计学分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果培养的大鼠BMSCs长势良好,第3代BMSCs低表达CD34（0.1%）和CD45（2.8%）、高表达CD29（95.1%）,和文献描述的BMSCs表型一致；转染基因后,发现绿色荧光的表达随着转染时间的延长而逐渐增强,证实转染成功；制作大鼠股骨牵张成骨模型后,经过14 d牵张,所有大鼠达到预期牵张距离；在2、4、8周不同时间点观察,股骨标本大体观察,实验组牵张间隙可见连续性骨痂,硬度、颜色接近正常骨组织,牵张间隙活动度较差,低于空白对照组；X线片提示,实验组牵张间隙新生骨痂更多,骨髓腔较对照组提前再通；Micro-CT检查提示,实验组愈合较好,离断端已连接,矢状面可见骨髓腔再通；标本Micro-CT参数表明,实验组骨小梁厚度（0.297±0.005）mm、骨小梁数量（1.663±0.032）mm、骨体积分数（59.832±2.187）%和骨密度（0.586±0.014）g/cm3最大,实验组骨小梁分离度（0.399±0.051）mm最小,各组之间差异有统计学意义（P<0.05）；苏木精-伊红（HE）染色和VEGF免疫组化染色证实,实验组较空白对照组更早、更多形成血管及软骨细胞。8周时实验组镜下可见新生骨痂连接成片,骨髓腔有再通趋势,腔内可见大量红细胞。结论研究结果表明注射rrPDGF-BB基因转染的BMSCs可能促进大鼠牵张区新骨的形成,缩短新生骨痂的矿化时间,促进牵张成骨区域新生骨的成熟。

简介：目的研究三种材料，材料一：β-磷酸三钙支架（β—TCP）；材料二：明胶／1氐结晶度羟基磷灰石涂层-磷酸三钙支架（gel／lc—HA．β-TCP）；材料三：明胶／高结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙（gel／he-HA-β-TCP）。三种材料的细胞毒性及兔骨髓基质细胞（BMSCs）与材料共培养增殖的情况。方法取兔股骨骨髓腔细胞，进行贴壁培养BMSCs。在成骨诱导液中诱导BMSCs。将诱导后的BMSCs与三种支架材料在培养板内共培养1、3、5、7、9d。采用形态学观察、MTT法及ALP检测试剂盒等方法检测材料的BMSCs细胞毒性及BMSCs细胞在材料表面的增殖和分化能力。结果光镜及电镜下观察各组无显著差异。细胞毒性在0-1级。与细胞共培养，β-TCP组在第7．9天与阴性对照组差异有统计学意义。ALP检测，β-TCP组在第7、9天与阴性对照组差异有统计学意义（P〈0．05），gel／lc—HA-β-TCP在第9天与阴性对照组差异有统计学意义（p〈0．05）。结论新型明胶／高结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙支架和明胶／低结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙支架与BMSCs生物相容性好，适合作为支架材料负载BMSCs构建组织工程骨。

简介：摘要背景骨髓间充质干细胞为骨缺损的治疗提供一种新的研究方法，是近年来研究的热点。目的回顾近年来骨髓间充质干细胞经不同途径及物质诱导成骨分化及效果的研究进展。方法检索中国知网数据库和PubMed数据库2010年至2018年文献，共检索到1076篇文章，按纳入和排除标准文献进行筛选，共纳入18篇文章进行分析。结果与结论骨髓间质干细胞具有较高的成骨活性。在体内经不同的方式及诱导剂的诱导，可分化成成骨细胞而修复骨缺损区。目前尚无理想的诱导方法，需要进一步的研究及探讨。

简介：摘要目的探讨扶芳藤提取液对肿瘤微环境中BMSCs增殖变化的影响。方法采用Transwell共培养小室，建立小鼠BMSCs与Hepa1-6肝癌细胞共培养体系，加以最佳浓度扶芳藤提取液进行干预，运用CCK-8法及流式细胞术检测共培养体系中BMSCs细胞的增殖情况，分析扶芳藤提取液对肿瘤微环境中BMSCs保护作用。结果与对照组比较，模型组BMSCs细胞细胞生长增快，且G1期比例降低，S期比例增加；与模型组比较，干预组BMSCs细胞生长缓慢，且G1期比例增加，S期比例降低，以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论扶芳藤提取液可抑制肿瘤微环境中BMSCs细胞的异常增殖，具有一定保护作用。

简介：目的：研究牵张力对骨髓基质细胞（BMSCs）与血管内皮细胞（VECs）共培养体系成骨分化的作用及相关机制。方法：分离培养大鼠原代BMSCs与VECs。应用Flexcell5000加力系统,分别对BMSCs与VECs共培养组、BMSCs单独培养组和VECs单独培养组施加6%等轴循环牵张力。加力6、12、24和48h后,利用实时定量PCR检测Runx2和血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA的表达量,ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF的含量,碱性磷酸酶（ALP）半定量检测ALP活性。通过加入VEGF受体抑制剂Tivozanib,观察VEGF的旁分泌作用。采用SAS8.0软件包对数据进行统计学分析。结果：1加力6h时,共培养体系Runx2mRNA的表达量上调4.3倍（P〈0.05）;加力48h时,ALP活性升高1.5倍（P〈0.05）。2加力12h时,共培养体系VEGFmRNA的表达量上调2倍（P〈0.05）,上清液中VEGF的含量增加10倍（P〈0.05）,BMSCs分泌大量VEGF,而VECs分泌极少量VEGF。3加入Tivozanib后,共培养组Runx2的表达量下调90%（P〈0.05）,ALP活性下调48%（P〈0.05）;而BMSCs单独培养组Runx2的表达量和ALP活性分别下降30%和18%。结论：牵张力促进BMSCs与VECs共培养体系中BMSCs的成骨分化,这种作用可能通过牵张应力诱导BMSCs分泌的VEGF以旁分泌方式由VECs作用于BMSCs来实现。

简介：摘要目的探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合聚乳酸共聚物(PLGA)多孔可吸收支架修复猪退变纤维环的效果。方法选择贵州小型猪4头，每头猪选择腰2、3，腰3、4，腰4、5及腰5骶1椎间盘共16个椎间盘，平分为实验组及对照组，各8个椎间盘。实验组将BMSCs复合PLGA多孔可吸收支架植入猪纤维环退变破裂模型处，缝合后纵韧带避免植入体滑脱，对照组直接修复后纵韧带，在术后24周与48周记录修复效果。结果所有猪建模后都成活，两组术后24周的MRI椎间盘高度对比差异无统计学意义(P>0.05)，两组术后48周的MRI椎间盘高度都高于术后24周(P<0.05)，实验组高于对照组(P<0.05)。术后24周两组都不能分辨髓核组织，纤维向内塌陷，纤维环板层出现显著断裂；术后48周实验组椎间盘髓核组织为透明胶冻状，椎间隙清晰，纤维环及髓核的界限清楚。结论自体BMSCs复合PLGA多孔可吸收支架修复猪退变纤维环能促进提高椎间盘高度，安全性高，可改善椎间盘病理学状况。

简介：目的探索体外不同时间的成软骨诱导,对骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外成软骨分化的组织学特性的影响。方法以猪第2代BMSCs为种子细胞,以聚羟基乙酸/聚乳酸（PGA/PLA）为支架,体外构建直径12mm,厚3mm的圆盘状复合物,联合应用TGF-β1（10ng/mL）、IGF-I（50ng/mL）及地塞米松（40ng/mL）,体外分别诱导1周和4周,并以未经诱导的BMSCs和软骨细胞为对照,分析和比较不同诱导时间对BMSCs体外成软骨分化的影响。结果体外诱导4周的BMSCs-PGA/PLA复合物的组织学结构明显较只诱导1周的致密,软骨特异性基质（如蛋白多糖、Ⅱ型胶原等）表达水平明显高于诱导1周的。结论体外诱导时间对BMSCs软骨定向分化具有重要影响,延长诱导时间可明显促进复合物成熟并增加其软骨基质分泌。

简介：目的通过将不同比例的富血小板血浆（Platelet-richplasma,PRP）与盐酸川芎嗪联合用于人骨髓间充质干细胞（Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs）,观察不同比例对其体外增殖及其向成骨细胞分化的影响。方法选取我院住院并签订知情同意书的患者为研究对象,抽取已签订知情同意书的患者静脉血50mL,分别二次离心法制备PRP,进行血小板计数分析。根据骨髓间充质干细胞培养是否加入药物为分组依据,分成A、B、C、D四组,A组为对照组,培养液中不加入药物,其余三组分别将体积分数为15%、30%、50%的PRP与80%盐酸川芎嗪按照1∶1.5混合加入骨髓间充质干细胞的培养液中,检测细胞的增殖状况,细胞达到80%融合,消化收集细胞;计数确定各组细胞培养情况,确定加入PRP和盐酸川芎嗪组对细胞培养的影响。对加入PRP和盐酸川芎嗪组培养的细胞进行成骨诱导,确定其成骨分化特性。结果各组PRP＋盐酸川芎嗪促进MSCs增殖优于对照组。达到80%融合时间更短。随着PRP浓度增加细胞增殖效率显著增加。结论PRP与盐酸川芎嗪对BMSCs的体外增殖有促进作用,与PRP体积分数和作用时间呈正相关关系。

简介：目的：寻找雌激素缺乏所导致的骨质疏松环境下调控小鼠骨髓基质干细胞（mousebonemarrowstromalstemcells,mBMSCs）成骨的关键miRNA,并探讨此miRNA在雌激素缺乏所导致的骨质疏松微环境下是否参与调控mBMSCs成骨及其在此种微环境下对成骨的调控作用。方法：建立卵巢切除动物模型,通过生物信息学技术以及miRNA基因芯片技术对卵巢切除组和假手术组的C57BL/6J小鼠来源的mBMSCs进行对比筛选,确定调控mBMSCs成骨的关键miRNA;利用实时定量RT-PCR技术验证此miRNA在两组mBMSCs成骨分化过程中的表达差异;通过细胞转染技术上调和下调此miRNA,实时定量RTPCR、Westernblot、茜素红和碱性磷酸酶染色等技术观察转染后mBMSCs的成骨能力。结果：生物信息学技术以及miRNA基因芯片技术筛选确定调控mBMSCs成骨的关键miRNA为miR-21;实时定量RT-PCR显示miR-21在卵巢切除组mBMSCs成骨分化中的水平较假手术组低;转染miR-21至卵巢切除组mBMSCs,能部分恢复其成骨分化能力。结论：miR-21是雌激素缺乏所导致的骨质疏松环境中调控mBMSCs成骨分化的关键miRNA;miR-21在雌激素缺乏所导致的骨质疏松环境中能促进mBMSCs的成骨分化。

简介：目的：将自体骨髓基质细胞（Bonemarrowstromalcells，BMSCs）接种到β-TCP／CPPF／PLLA支架上，进行体外复合培养，构建组织工程人工骨，植入兔桡骨大段骨缺损模型中，评估BMSCs／β-TCP／CPPF／PLLA复合体促进成骨的作用。方法：用新西兰大白兔40只，随机分为BMSCs／β-TCP／CPPF，PLL复合物组（A组）、β-TCP／CPPF／PLLA支架组（B组）、空白对照组（C组）共三组，建立兔桡骨双侧大段骨缺损模型，相应植入自体细胞材料复合物和单纯支架材料，空白对照组不作任何处理。术后4、8、12、16周处死动物，摄X线片观察骨缺损修复情况。结果：X线检查结果：A组术后2周可见缺损处有散在的、少量的模糊状骨痂生成，术后4周可见明显的骨生成影像，成云雾状，均匀分布在骨缺损区，术后8周整个缺损区均可见到骨痂生成，成骨现象较4周更加明显，部分髓腔已通，术后12～16周，缺损区已完全为新生的骨组织充填，骨髓腔已完全再通，修复区比正常的桡骨较细。B组、C组术后2～16周，虽有不同程度的成骨现象，但没有完全修复骨缺损区，B组较C组修复明显。X线评分结果：A组在各时期均明显高于B组，差异具有显著性（P〈0．01）。结论：自体BMSCs与β-TCP／CPPF／PLLA复合物移植能修复大节段的骨干缺损。

简介：Three-dimensional-printed(3D-P)titaniumimplantsdisplaymanyadvantages,suchasdesignflexibility,higherefficiency,thecapabilitytoeasilyconstructcomplexorcustomizedstructures,etc.,andisbelievedtopotentiallyreplacetraditionalimplants.However,thebiologicalperformanceofthe3D-Ptitaniumsurfacehasnotbeeninvestigatedsystematically.Herein,weanalyzedthesurfacecharacteristicsof3D-PTi6AI4Vimplantsandevaluatedthebiologicalresponsesofbonemarrowderivedmesenchymalstromalcells(BMSCs)tothe3D-Psurfaceinvitro.Moreover,afterimplantationintotheratfemoralcondylefor3and6weeks,theosseointegrationperformaneewasevaluated.Theresultsshowedthe3D-PTi6Al4Vimplantpresenteddistinctfluctuantmacroscaleroughsurfaceandrelativelybetterhydrophilicitywhichenhancedtheadhesion,proliferation,osteogenicdifferentiationandangiogeneticfactorexpressionofBMSCs.Moreover,theinvivoosseointegrationperformancewasalsobetterthanthatofthecontrolgroupattheearlystage.Thepresentstudysuggestedthe3D-Ptitaniumalloyisapromisingcandidatetobeusedasimplantmaterial.

简介：目的：针对不同胚源的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）表现出的衰老差异，探讨组蛋白去甲基化酶Jmjd3对衰老的调控作用。方法：取大鼠下颌骨（M）和胫骨（T）后提取BMSCs原代培养并进行传代，通过β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）衰老染色检测细胞衰老特征，茜素红染色检测细胞成骨特征。通过实时定量RT-PCR、Westernblot检测Jmjd3及衰老因子在两种BMSCs中的表达。构建shJmjd3病毒敲减Jmjd3，转染T-BMSCs检测衰老指标。在大鼠颌骨区域建立骨缺损模型，移植shJmjd3修饰的T-BMSCs，通过Micro-CT、Masson染色检测Jmjd3被抑制的T-BMSCs对骨缺损区的修复作用。结果：经SA-β-gal衰老染色，T-BMSCs中衰老细胞数量明显多于M-BMSCs。Jmjd3及衰老因子在M-BMSCs低表达，在T-BMSCs高表达。转染shJmjd3病毒导致T-BMSCs中Jmjd3及衰老因子低表达。移植敲减Jmjd3的T-BMSCs，Micro-CT显示其骨平均密度，骨体积分数明显升高，Masson染色显示其骨小梁结构增多。结论：不同胚源大鼠BMSCs的衰老特征具有差异性，将T-BMSCs中Jmjd3抑制以后，可以增强细胞的抗衰老能力，有利于体内的骨修复的治疗。

简介：摘要目的观察成骨分化后的去分化骨髓间质干细胞（differentiation osteogenic bone marrow mesenchymal stem cells，De-BMSCs）移植对前十字韧带（anterior cruciate ligament，ACL）重建术后腱骨界面骨形成的促进作用，并探索De-BMSCs成骨分化效应增强的分子机制。方法从家兔胫骨和股骨中提取BMSCs，经成骨诱导分化后用普通培养基进行去分化培养制备De-BMSCs，鉴定De-BMSCs的干细胞特性。建立家兔ACL重建模型，分为3组：腱骨界面注射海藻酸钠凝胶（对照组）；腱骨界面注射复合BMSCs海藻酸钠凝胶（BMSCs组）；腱骨界面注射复合De-BMSCs海藻酸钠凝胶（De-BMSCs组）。术后4周和12周取膝关节标本，进行组织学、影像学、生物力学检测，评估腱骨界面骨形成情况。De-BMSCs体外成骨诱导分化，给予活化T细胞核转录因子1（nuclear factor of activated T cells 1，NFATc1）RNA干扰处理，检测成骨分化标志基因及Nanog/NFATc1/Osterix信号通路的表达，明确De-BMSCs成骨分化效应增强的分子机制。结果De-BMSCs可向成骨、成脂、成软骨分化，具有干细胞特性（均P<0.05）。术后4周De-BMSCs组BV/TV值为0.36±0.01，较对照组0.24±0.03和BMSCs组0.30±0.02明显增加（P<0.05），最大负荷（40.34±1.19）N和刚度（20.67±2.14）N/mm较对照组[（14.88±2.74）N，（8.67±2.19）N/mm]和BMSCs组[（26.31±1.76）N，（13.81±2.14）N/mm]明显升高（均P<0.05）；术后12周De-BMSCs组BV/TV值0.47±0.02较对照组0.30 ± 0.02和BMSCs组0.35 ± 0.03明显增加（均P<0.05），最大负荷（64.46±6.69）N和刚度（25.18±3.11）N/mm较对照组[（41.01±6.12）N，（11.59±2.54）N/mm]和BMSCs组[（48.21±4.12）N，（15.89±2.94）N/mm]明显升高（均P<0.05）；De-BMSCs成骨分化过程中，Nanog的表达增加（P<0.05），NFATc1的表达上升且其与Osterix的相互作用增强（P<0.05），成骨分化标志基因COL1A、OCN、OPN的表达增加（均P<0.05）。结论De-BMSCs移植可促进ACL重建后的腱骨界面骨形成，其作用机制可能是Nanog/NFATc1/Osterix信号通路介导了De-BMSCs成骨分化效应增强。

简介：摘要目的探讨运用髓芯减压联合自体骨髓干细胞（BMSCs）移植治疗早中期股骨头缺血性坏死的疗效分析。方法纳入运用髓芯减压联合自体骨髓干细胞（BMSCs）移植治疗早中期非创伤性股骨头坏死患者10例15髋设为治疗组，采用单纯髓芯减压10例15髋设为对照组。结果随访6-30个月，患者疼痛明显缓解，采用Harris髋关节功能评分，分别对疼痛和关节功能改善程度进行评分，通过术前平均分，术后分，比较差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论运用髓芯减压联合自体骨髓干细胞（BMSCs）移植治疗早中期股骨头缺血性坏死，具有操作简便、准确，损伤小，疗效确切等优点。

简介：   摘要：目的：探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体miRNA介导TNF-α通过NF-κB信号通路对BMSCs成骨分化的影响。方法：将MC3T3-E1细胞株分对照组（正常培养的MC3T3-E1细胞株）、BMSCs-EXOS组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-EXOS共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS mimics组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS mimics共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor共同培养）及BMSCs-miR-326-EXOS-NC inhibitor组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor共同培养）。采用qRT-PCR方法检测各组细胞miR-326表达；茜素红染色定量分析矿化；碱性磷酸酶染色检测分化；免疫印迹检测各组细胞ALP、OPG、BMP2、TNF-α及NF-κB蛋白水平。结果：与对照组相比，BMSCs-EXOS组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平升高，TNF-α及NF-κB蛋白水平降低（P＜0.05），BMSCs-EXOS组及BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组组间比较无意义（P＞0.05），与BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组相比，BMSCs-miR-326-EXOS-mimics组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平升高，TNF-α及NF-κB蛋白水平降低（P＜0.05），BMSCs-miR-326-EXOS-NC inhibitor组无意义（P＞0.05），BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平降低，TNF-α及NF-κB蛋白水平升高（P＜0.05）。结论：骨髓间充质干细胞源性外泌体miR-326可通过抑制TNF-α及NF-κB蛋白而促进BMSCs成骨分化。

简介：摘要目的探讨含有血小板源性生长因子BB(PDGF-BB）的载银介孔二氧化硅纳米颗粒（Ag-MSN）这种新型纳米抗菌材料（P-Ag-MSN）的银离子（Ag+）缓释特点及其对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）的细胞毒性和体外抗菌性能。方法2016年1月至2018年6月，模板法与共沉淀法结合，精确制备出Ag-MSN,将PDGF-BB加载进入Ag-MSN，利用火焰原子吸收光谱法进行检测Ag+缓释特点；从SD大鼠提取并培养BM- SCs，对CD29、CD45进行流式细胞检测，鉴定BMSCs的纯度，取长势良好的第3代BMSCs，检测P-Ag-MSN的细胞毒性；制备不同浓度的P-Ag-MSN混悬液，检测对骨髓炎常见细菌的体外抗菌效果。数据采用SPSS 17.0软件进行统计学分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果P-Ag-MSN中的Ag+逐步释放，6~ 12 h后达到峰值；随后释放的幅度逐步下降，并逐渐稳定在一定的浓度。不同浓度的P-Ag-MSN对大鼠BMSCs在1、3、5、7 d时的相对增殖率均值均在80％以上，细胞毒性评级均为0级或I级，对大鼠BMSCs无明显细胞毒性，差异无统计学意义（P>0.05）。P-Ag-MSN对于大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠球菌均有杀菌效果，其最小杀菌浓度（MBC）分别为25.0、50.0、50.0 μg/ml，对金黄色葡萄球菌无明显杀菌效果，其MBC为100.0 μg/ml。结论新型纳米抗菌材料P-Ag-MSN的细胞毒性小，具有良好的缓释效果，在体外对骨髓炎常见细菌有明显抗菌作用。