简介:摘要目的研究体外培养的人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)中钠离子-牛磺胆酸共转运多肽(sodium taurocholate cotransporting polypeptide, NTCP)的表达情况,探索体外培养的BMSCs能否自然感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)及NTCP是否是HBV感染BMSCs的一个功能性受体。方法将HBV阳性血清以不同方法感染BMSCs,检测培养基上清及细胞中HBV DNA、培养基上清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)等感染指标。NTCP-siRNA转染BMSCs后,再次用HBV阳性血清感染BMSCs,检测各感染指标。Western blot法检测各处理组BMSCs中NTCP的表达情况。结果HBV可自然感染体外贴壁培养的人BMSCs,但感染效率很低。当HBV感染悬浮状态下的BMSCs时,感染效率显著升高。BMSCs中存在NTCP的表达,且HBV可显著上调NTCP的表达量,特别是对悬浮状态下的BMSCs。当BMSCs中NTCP的表达被NTCP-siRNA沉默后,HBV对BMSCs的感染效率显著下降。结论体外培养的人BMSCs可被HBV自然感染,且其细胞内表达的NTCP是其感染HBV的一个功能性受体。人BMSCs可作为一种易感、稳定、无需分子修饰的细胞模型,用于研究HBV生命周期的早期阶段以及抗病毒治疗研究。
简介:摘要目的探究增殖肝细胞膜上的钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)表达下调与慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者抗病毒治疗应答的关系。方法纳入2011年1月至2015年3月入住北京市解放军总医院第五医学中心的68例乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阳性的CHB患者,收集患者基本信息和实验室检查结果;以基线(抗病毒治疗前)的炎症活动度(G)为依据将患者分为≤G2组及>G2组,每组选取12例患者的肝脏穿刺组织标本,进行NTCP和Ki67的免疫荧光染色,计算Ki67阳性细胞比例,并对NTCP的染色进行评分。收集2014年3月至2017年3月入住解放军总医院第五医学中心有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染并诊断为肝脏局灶性结节增生(focal nodular hyperplasia,FNH)的5例患者的结节切除组织及其配对的肝脏非FNH组织,免疫组织化学染色检测各组织标本中Ki67、NTCP和乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)的表达,并计算染色阳性细胞比例或对染色强度进行评分。统计学分析采用Mann-Whitney U检验、χ2检验和Spearman相关性分析。结果肝脏FNH组织中Ki67阳性细胞比例[6.75%(6.20%,8.16%)]高于配对的肝脏非FNH组织[0.75%(0.66%,1.20%)],而对应的NTCP及HBsAg的免疫组织化学染色评分分别为3.00(1.00,3.00)和2.00(1.00,2.00),分别低于配对的肝脏非FNH组织[分别为8.00(8.00,9.00)和8.00(6.00,8.00)],差异均有统计学意义(Z=-2.611、-2.424、-2.635,P=0.009、0.015、0.008)。>G2组患者37例,≤G2组患者31例。抗病毒治疗6个月后,>G2组患者血清HBV DNA、HBeAg的下降幅度分别为(0.71±0.14) lg IU/mL和(0.92±0.13) lg IU/mL,分别大于≤G2组的(0.54±0.30) lg IU/mL和(0.49±0.65) lg IU/mL,差异均有统计学意义(Z=-3.048、-2.666,P=0.002、0.008)。>G2组肝组织中Ki67阳性细胞比例[4.34%(1.84%,8.77%)]高于≤G2组[0.34%(0,0.80%)],而NTCP的免疫组织化学染色评分[1.00(0,3.25)]低于≤G2组[6.00(4.00,8.00)],差异均有统计学意义(Z=-3.640、-3.012,P<0.01,P=0.003)。Spearman相关性分析显示,NTCP免疫组织化学染色评分与Ki67阳性细胞比例呈负相关(r=-0.512,P=0.01)。结论炎症活动度更高的CHB患者往往伴有更为活跃的肝细胞增殖和更低的细胞膜NTCP表达,不利于HBV再感染。这可能有利于这部分患者获得更好的抗病毒治疗效果。
简介:目的:采用多种技术手段建立牛磺胆酸钠对照品标定技术方法。方法:采用紫外光谱、红外光谱、核磁共振波谱(包括1H-和13C—NMR)进行结构确认;用薄层色谱法和高效液相色谱法进行纯度检查;用质量平衡法进行定量分析,并采用定量核磁技术对赋值结果进行验证。其中首次采用热重/差热分析(TG/DTA)和气相色谱-质谱(GC/MS)联用系统对牛磺胆酸钠原料中残留溶剂进行快速筛查。结果:牛磺胆酸钠原料经薄层色谱法及高效液相色谱法测定,纯度达到99.16%;质量平衡法赋值结果87.9%,定量核磁共振法的验证结果为87.9%。结论:牛磺胆酸钠对照品原料的定性鉴别结果符合要求,定量赋值结果准确、可靠;能够用于含量测定用对照品分发、使用。
简介:牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)是熊胆中的主要药理活性成分,临床上主要用于治疗与胆汁酸代谢异常相关的疾病。目前,市场上提供熊胆制品的唯一渠道是通过引流取胆法,但是该法目前受到相关条例的限制,因此有必要找到新的获取熊胆制品的方法。综述TUDCA的药理研究进展及人工合成TUDCA的方法尤其是生物合成法的研究进展。
简介:摘要目的建立牛磺熊去氧胆酸原料药含量的分析方法。方法采用ThermoSyncronisC18色谱柱(250mm*4.6mm,5μm),流动相为0.02M磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调pH=4.0)甲醇=3565流速1.0ml/min,紫外检测器,波长210nm,进样量10μl,柱温35℃。结果牛磺熊去氧胆酸在0.0459mg/ml~1.3767mg/ml范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=-0.9999);中间精密度良好,RSD=0.65%(n=12);加样回收率为100.66%,RSD=0.30%(n=9)。结论采用高效液相色谱法(HPLC)测定牛磺熊去氧胆酸原料药含量,该方法简便准确、精密度和重复性良好,结果准确可靠。
简介:摘要 目的 建立牛磺熊去氧胆酸原料药含量的分析方法。方法 采用 Thermo Syncronis C18色谱柱( 250mm*4.6mm, 5μm),流动相为 0.02M磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调 pH=4.0):甲醇 =35:65流速 1.0ml/min,紫外检测器,波长 210nm,进样量 10μl,柱温 35℃。结果 牛磺熊去氧胆酸在 0.0459mg/ml~ 1.3767mg/ml范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系 (r=-0. 9999);中间精密度良好, RSD=0.65%( n=12);加样回收率为 100.66%, RSD=0.30% (n=9)。结论 采用高效液相色谱法 (HPLC)测定牛磺熊去氧胆酸原料药含量,该方法简便准确、精密度和重复性良好,结果准确可靠。
简介:摘 要:本文建立了通过用钠度计测定裂解用液化石油气吸收水中Na+含量的方式间接计算出液化气中残留的Na+含量的方法,同时用PH计测出吸收水的PH值,由此快速判定液化气携带碱的情况[
简介:摘要:随着碳达峰、碳中和成为全球共识,新能源在全球能源体系中的比重快速增加,储能迎来急速增长,电化学储能由于地理环境适应性好、能量密度高、占地少、效率高等有点,正在成为储能的主力。锂离子电池储能能量密度高、循环寿命长,效率可以达到90%,正在成为电化学储能主力,钠离子电池相对于锂离子电池具有资源禀赋优势、成本更低和宽温特性。