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315 个结果
  • 简介:在这研究,L1蛋白质定序的人的乳头状瘤病毒(HPV)的107种类型从可得到的数据库,和这些HPVL1蛋白质的原子本地化信号(NLS)被获得被生物信息的分析分析并且预言。从107种类型,39种类型的NLS被PredictNLS软件(由两部组成的NLS的35种类型和单音的深裂的NLS的4种类型)预言。留下的HPV类型的NLS象NLS的一般规则一样根据特征和已经预言的NLS的相同被预言。根据结果,HPVL1蛋白质的107种类型的NLS被分类进15个范畴。在一样的NLS范畴的HPVL1蛋白质的不同类型能分享类似或一样的nucleocytoplasmic运输小径。他们可能被用作一样的目标阻止并且对待HPV感染的不同类型。结果也证明生物信息的技术能被用来分析并且预言蛋白质的NLS。

  • 标签: 疾病预防 核信号 人类乳头瘤病毒 病毒感染
  • 简介:Wntsignalingplaysanimportantroleinembryogenesisandtumorgenesis.AlthoughthemechanismabouthowWntstransducetheirsignalingfromreceptorfrizzled(Fz)tocytosolhasnotbeenunderstood,dishevelled(Dvl)proteinwasconsideredastheintersectionofWntsignaltraffic.Inthisstudy,wecharacterizedthefunctionofthreedomains(DIX,PDZandDEP)ofDvl-1incanonicalWntsignaltransductionandDvl-1membranetranslocation.ItwasfoundbothDIXandDEPdomainweresufficienttoblockWnt-3a-inducedLEF-1transcriptionalactivityandfreecytosolβ-cateninaccumulation;whereasPDZdomainandafunctionalmutantformofDEPdomain(DEP-KM)hadnoeffectoncanonicalWntsignaling.Inaddition,whencotransfectedwithFz-7,DEPdomain,butnotDIX,PDZorDEP-KM,translocatedandco-localizedwithFz-7totheplasmamembrane,whichwassimilartoDvl-1.Furthermore,itwasDEPdomainthatcouldblockFz-7-inducedmembranetranslocationofDvl-1viaapossiblecompetitivemechanism.TheseresultsstronglysuggestthatDEPdomainisresponsibleforthemembranetranslocationofDvl-1proteinuponWntsignalstimulation.

  • 标签: 信号转导 膜易位 WNT 基因 蛋白质
  • 简介:Glucosetransporter4(GLUT4)isresponsibleforinsulin-stimulatedglucosetransportingintotheinsulin-sensitivefatandmusclecells.ThedynamicsofGLUT4storagevesicles(GSVs)remainstobeexploredanditisunclearhowGSVsarearrangedbasedontheirmobility.Weexaminedthisissuein3T3-L1cellsviainvestigatingthethree-dimensionalmobilityofsingleGSVlabeledwithEGFP-fusedGLUT4.Athinlayerofcytosolrightadjacenttotheplasmamembranewasilluminatedandsuccessivelyimagedat5Hzunderatotalinternalreflectionfluorescencemicroscopewithapenetrationdepthof136nm.Employingsingleparticletracking,thethree-dimensionalsubpixeldisplacementofsingleGSVwastrackedataspatialprecisionof22nm.Boththemeansquaredisplacementandthediffusioncoefficientwerecalculatedforeachvesicle.Trackingresultsrevealedthatvesiclesmovedasifrestrictedwithinacagethathasameanradiusof160nm,suggestingthepresenceofsomeintracellulartetheringmatrix.ByconstructingthehistogramofthediffusioncoefficientsofGSVs,weobservedasmoothdistributioninsteadoftheexistenceofdistinctgroups.TheresultindicatesthatGSVsaredynamicallyretainedinacontinuousandwiderangeofmobilityratherthanintoseparateclasses.

  • 标签: 胰岛素 葡萄糖载体4 葡萄糖载体4贮藏囊泡 3T3-L1细胞 全内反射 荧光显微法
  • 简介:目的:获得抑制效果好的泛素C端水解酶LI(UCH—L1)基因小干扰RNA(siRNA)干扰载体。方法:根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列,将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP—miR中构建4个siRNA表达质粒,测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞,利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果;将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒,感染大汛血管平滑肌细胞(VSMC),并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高,Western印迹验证干扰效果。结果:测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP—miR;qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达的抑制程度最高,将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导的U(:H—I。l表达升高。结论:构建并筛选出干扰效果好的UCH—LlsiRNA干扰载体。

  • 标签: 泛素C端水解酶L1 RNA干扰 HEK293细胞 血管平滑肌细胞
  • 简介:<正>Uponactivation,naiveT-helpercellscandifferentiateintotwomajordistinctsubsets,Thelper1(Th1)andThelper2(Th2),asdefinedbytheireffectorfunctionsandcytokinesecretionpatterns.CytokinemilieuandcostimulatorymoleculeshavebeenshowntoplayanessentialroleindeterminingThelperdifferentiation.However,itisstillunclearhowtheeffectsofsignalsofco-stimulatorymoleculesandcytokinesareexertedduringThelperdifferentiation.Weshowevidencesuggestingthatwhilecytokinesignalsinitiatedifferentiationprogram,theselectiveactionofdeatheffectorsdeterminestheendpointbalanceofdifferenti-

  • 标签: TH1细胞 TH2细胞 细胞凋亡 TRAIL CD95L 交互表达
  • 简介:QuestionsconcerningthefunctionalroleofthehollowregionofthebutterflyPyrameisatalanta(L.)scaleareexperimentallyinvestigated.Attentionwasinitiallydirectedtothisproblembyobservationofthecomplexmicrostructureofthebutterflyscaleaswellasotherstudiesindicatinghigherliftonbutterflywingscoveredwithscale.Theaerodynamicforcesweremeasuredfortwooscillatingscalemodels.ResultsindicatedthattheaircavityofanoscillatingmodelofthePyrameisatalanta(L.)scaleincreasedtheliftbyafactorof1.15andreducedthedampingcoefficientsbyafactorof1.38.Themodificationoftheaerodynamiceffectsonthemodelofbutterflyscalewasduetoanincreaseofthevirtualairmass,whichinfluencedthebody.Thehollowregionofthescaleincreasedthevirtualairmassbyafactorof1.2.Thevirtualmassofthebutterflyscalewiththehollowregionwasrepresentedasthesumofairmassoftwoimaginarygeometricalfigures:acircularcylinderaroundthescaleandaright-angledparallelepipedwithinthehollowregion.TheinteractionmechanismofthebutterflyPyrameisatalanta(L.)scalewithaflowwasdescribed.Thisnovelinteractionmechanismexplainedmostgeometricalfeaturesoftheairpermeablebutterflyscale(invertedV-profileoftheridges,nozzleofthetipedge,hollowregion,andopeningsoftheupperlamina)andtheirarrangement.

  • 标签: 仿生学 蝶形 虚质量 生物研究
  • 简介:AktandBcl-xLbothpromoteresistancetoapoptosis.AcomparisonofAkt-andBcl-xL-dependentcellsurvivalwasundertaken.ExpressionofconstitutivelyactiveAktallowscellstosurviveforprolongedperiodsintheabsenceofgrowthfactors.ThissurvivalcorrelateswiththeexpressionlevelofactivatedAktandiscomparableinmagnitudetotheprotectionprovidedbytheanti-apoptoticgeneBcl-xL.Althoughbothgenespreventcelldeath,Akt-protectedcellscanbedistinguishedfromBcl-xL-protectedcellsonthebasisofincreasedglucosetransporterexpression,glycolyticactivity,mitochondrialpotential,andcellsize.Inaddition,Akt-expressingcellsrequirehighlevelsofextracellularnutrientstosupportcellsurvival.In

  • 标签: 细胞凋亡 非依赖性调控通路 线粒体 AKT BCL-XL
  • 简介:目的:选择发酵系统中各可控因素的最佳水平组合,从而减少各种干扰的影响,以获得稳健的赖氨酸产量。方法:利用田口法的内外表与Box性能规则优化赖氨酸发酵条件。结果:通过实验得知,转速、硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵影响较大;结果稳定的最优发酵条件为初始葡萄糖浓度为80g/L、硫酸铵浓度为42g/L、转速为225r/min、初始pH值为6.7、接种量为8%。经实验验证,最优化发酵条件是低灵敏度的,最优目标值比较稳健。在10L自动发酵罐上培养65h,L-赖氨酸盐酸盐的产量为165.68g/L,比优化前提高了12.4%。结论:基于稳健性设计所得的最优发酵条件参数,可使目的产物产量稳定,便于生产操作。

  • 标签: 稳健性设计 信噪比 L-赖氨酸 发酵优化
  • 简介:目的研究阻断CD40-CD40L共刺激信号通路对移植皮肤免疫排斥反应的影响。方法通过RT-PCR技术克隆了呈可溶性表达的CD40L分子胞外区(sCD40L),利用K14启动子构建了sCD40L皮肤特异性表达载体,并利用该载体制备了转基因小鼠。结果所克隆的CD40L胞外区片段其大小及序列符合预期;以哺乳动物表达载体PCI为骨架,通过DNA重组,获得了含K14启动子和sCD40L编码区的皮肤特异性表达载体K14-sCD40L;通过显微注射和胚胎移植,PCR筛选检测:49只G0代小鼠有1只小鼠扩增出特异性条带,阴性对照无条带。结论成功建立sCD40L转基因阳性小鼠。

  • 标签: 转基因小鼠 SCD40L 共刺激信号通路
  • 简介:流行性感冒A病毒(H1N1)2009,一个新猪起源流行性感冒A病毒,世界范围地被散布了并且引起了大公共害怕。高产量的transcriptomics和proteomics方法现在正在被使用识别H1N1和H1N1主人相互作用。这篇文章在H1N1诊断,处理,和H1N1病毒主人相互作用考察最近的transcriptomics和proteomics研究,到为进一步理解感染机制并且控制H1N1传播提供一些帮助。

  • 标签: 蛋白质组学 基因表达谱 A型流感病毒 转录组学 相互作用 控制传输
  • 简介:"第三次全国农作物种质资源普查与收集行动"重庆项目组于2015-2017年历时3年,从重庆19个区县收集豌豆地方种质资源56份。豌豆种质资源在重庆地区分布呈现出范围广、海拔跨度大的特点。本研究对上述豌豆资源的14个性状进行了遗传多样性分析,结果表明该批资源多样性丰富,其中多样性指数最高的质量性状和数量性状分别是荚型和百粒重;变异系数最大的是分枝数。聚类分析将该批豌豆资源划分为5大类群,第Ⅰ类群为大籽粒和食荚型材料;第Ⅱ类群为高产、中粒型材料;第Ⅲ类群为直立型、早熟型材料;第Ⅳ类群为叶用型兼食荚型材料;第Ⅴ类群为籽粒食用型材料。这些豌豆资源经重庆不同地区和民族农民长年选择后,在抗逆性、食荚性、食叶性、籽粒特性等方面发展出了独特性状,利用好这些资源将为今后的豌豆产业发展注入新的多样性。

  • 标签: 重庆 豌豆资源 调查收集 遗传多样性 聚类分析
  • 简介:聚左旋赖氨酸(poly(L-lysine))可以作为基于载体应用于基于转染。但由于DNA转染效率较低,现在对于聚左旋赖氨酸的研究更多的集中在对于其修饰上。本实验是在前人的基础上对已合成的PLLz和mPEG-PLLz进行脱保护,得到了重复单元为80、100、120的PLL,mPEG-PLL,对得到的材料进行了细胞毒性,荧光素梅转染定性以及定量的实验。分析得出结论相同重复单元的mPEG-PLL的转染效率要高于PLL。

  • 标签: 聚左旋赖氨酸 修饰 转染效率
  • 简介:心肌细胞膜上的L型Ca^2+通道具有重要的生理意义,尤其在信号转导中发挥重要作用。近年来,由于膜片钳与分子生物学技术的发展,人们对离子通道的认识更加深入。有关L型Ca^2+通道的信号转导途径日渐清晰,本文分别在蛋白激酶A、蛋白激酶C、磷脂酰肌醇3激酶、G蛋白βγ亚基等途径对心肌L型Ca^2+通道调节信号转导的研究进展作一综述。

  • 标签: 心肌细胞 L型钙离子通道 结构 信号转导 蛋白激酶 磷脂酰肌醇3激酶
  • 简介:流行性感冒A病毒(H1N1),人的地方性的紧张的一个基因分类,鸟并且猪流感,穿过种类障碍到人并且显然获得了人的能力到人的传播。因为NS1蛋白质禁止抗病毒的干扰素/生产,H5N1子类型的一些紧张是高度剧毒的。另一蛋白质NS2调停到通过出口的细胞质的从原子核的病毒的ribonucleoprotein的出口信号。在这份报纸,我们学习了H1N1子类型的这些蛋白质的结构功能关系并且决定了他们的致病力的原因。我们的结果证明非保守的变化稍微稳定了或使动摇NS1或NS1-dsRNA建筑群的结构的域,稍微因此增加了或减少NS1蛋白质并且因而的函数提高了或减少H1N1病毒的致病力。不同紧张的NS2蛋白质在不同领域带了非保守的变化,导致功能的细微损失。这些变化稍微减少了病毒的致病力。因此,结果证实这些病毒的蛋白质的结构功能关系。

  • 标签: H5N1亚型 蛋白质结构 NS2 A型流感病毒 高致病性 生理盐水
  • 简介:以油茶湘林4号为材料,通过RT-PCR和RACE的方法克隆出油茶磷酸转运子Pht1基因家族一个成员的全长cD-NA序列,命名为CoPht1;1(GenBank登录号:JX403969),通过实时定量PCR的方法检测了不同磷浓度下该基因在根系中的表达水平。结果表明:CoPht1;1CDS长度为1626bp,编码542个氨基酸,与其他物种的Pht1氨基酸序列具有较高的相似性,其中与夹竹桃科长春花的Pht1相似性最高,达到88%;蛋白质二级结构和拓扑结构预测表明,CoPht1;1具有跨膜蛋白的主要特征,与其他物种的Pht1具有一致性;实时定量RT-PCR结果表明,油茶Pht1基因的表达受低磷诱导,并在受磷胁迫处理(P浓度为0.1mmol/L)15d时表达量最高。

  • 标签: 油茶 Pht1 1 磷转运子 基因表达模式
  • 简介:Brassinosteroids(BR)被transmembrane受体和戏察觉在植物生长和开发的重要角色,以及响应环境刺激的房间。transmembrane受体BRI1能直接绑在brassinolide(BL),并且BAK1与BRI1交往提高发信号的调停BRI1的BR。我们的以前的研究显示了那膜类固醇绑定蛋白质(MSBP1)1能在vitro绑在BL并且否定地涉及BR发信号。进一步阐明内在的机制,我们这里证明MSBP1明确地以一种BL独立的方式在vivo与BAK1的细胞外的领域交往。由MSBP1的增加的表示的压制的房间扩大和BR回答能被overexpressingBAK1或它的细胞内部的kinase领域恢复,建议MSBP1可以压制通过与BAK1交往发信号的BR。Subcellular本地化研究表明MSBP1和BAK1对血浆膜和endocytic泡局部性,MSBP1加速BAK1endocytosis,它导致由向内涵体转移BAK1的平衡发信号的压制的BR。确实,提高了MSBP1表示还原剂在在vivo的BRI1和BAK1之间的相互作用,表明那MSBP1在发信号的BR的早步充当一个否定因素小径。

  • 标签: 油菜素内酯 信号转换 跨膜受体 内吞作用 结合蛋白 类固醇
  • 简介:心脏压力负荷导致心肌肥厚的过程是心衰发生的关键环节。已有研究表明,控制心脏收缩的细胞钙致钙释放过程在心肌肥厚及心衰状态下发生缺损,但分子机制尚未阐明。我们以主动脉结扎手术建立压力负荷的大鼠心肌肥厚模型:实验组分为假手术组、代偿性肥厚组(CHT)和失代偿性肥厚组(DHT),以松钳一共聚焦成像技术研究单个L-型钙通道(LCC)与ryanodine受体(RyR)间的钙信号耦联。我们发现DHT中LCC—RyR分子耦联潜伏期延长49%,耦联成功率降低47%,失败概率提高72%,证明DHT进入了一种“分子间衰退”状态。出人意料的是,心功能正常的CHT也发生分子间衰退,并与锚定肌质网与细胞膜的junctophilin蛋白表达下降有关,表明分子间耦联衰退在细胞功能变化显现之前已经潜性地发生。与此一致,细胞兴奋期钙释放同步性降低,但钙释放总量和细胞钙瞬变在CHT并无变化。这些结果提示,在一个我们称为“稳定余量”(stabilitymargin)的范围内,分子间耦联衰退不会影响细胞兴奋收缩耦联能力,只有分子间耦联衰退超出稳定余量,心衰才会发生。潜性的分子间耦联衰退的发现对早期防治心衰有重要意义。

  • 标签: RYANODINE受体 兴奋收缩耦联 L-型钙通道 心肌肥厚 分子间 钙信号
  • 简介:目的:构建汉滩病毒包膜糖蛋白基因的真核表达载体,并加入可增强免疫应答效应的细胞因子CD40L基因,检测其可否在真核细胞中表达。方法与结果:参照GenBank中汉滩病毒M基因和小鼠CD40L的全基因序列设计引物,通过聚合酶链反应(PCR)获得M和CD40L基因片段,将其与pCI—neo载体相连,测序证实该载体构建成功后,将此真核表达载体以脂质体转染法转染至哺乳动物细胞CHO—K1中,利用间接免疫荧光法(IFA)检测发现M基因和CD40L基因可以同时表达于CHO-K1细胞中。结论:构建了带有CD40L基因的汉滩病毒包膜糖蛋白重组质粒并获得表达,为深入研究汉滩病毒感染后包膜糖蛋白引起的特异性免疫应答规律奠定了实验基础。

  • 标签: 汉滩病毒 包膜糖蛋白 CD40L
  • 简介:蚜虫Therioaphismaculata的抽象生物学在苜蓿(MedicagosativaL.)上被学习,包括四抵抗(Mesa-Sirsa,CUF101,贝克和Lahontan)并且二易受影响(弧和Caliverde)苜蓿栽培变种,并且大多数之一收割了巴西栽培变种,Crioula。在控制条件下面,抗生现象(即,减少的长寿,肥沃和蚜虫的增加的死亡)主要在抵抗苜蓿栽培变种上被观察,除了在Lahontan上。Crioula似乎对蚜虫容忍。现在的数据支持栽培变种的地理限制用法,并且我们作为抗生现象的来源建议贝克和Mesa-Sirsa,并且提供热带T的生物信息。苜蓿上的maculata遗传因子型。

  • 标签: 紫花苜蓿 昆虫生物学 同翅目 栽培技术