简介：

简介：摘要目的探究肺泡灌洗液半乳甘露聚糖（Gm）、血液烟曲霉IgG联合检测对肺曲霉病的诊断价值。方法选取2017年2月至2019年9月浙江省海盐县人民医院收治的肺曲霉病患者74例，按照病理类型分为慢性肺曲霉病组35例及侵袭性肺曲霉病组39例。采集两组研究对象肺泡灌洗液，对肺泡灌洗液Gm水平进行检测，使用曲霉IgG酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测血液烟曲霉IgG水平，对单独检测肺泡灌洗液Gm、血液烟曲霉IgG及二者联合检测的阳性预测率、阴性预测率、诊断灵敏度、特异度和准确性进行统计对比。结果侵袭性肺曲霉病组肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平均低于慢性肺曲霉病组[0.65 ± 0.09比0.98 ± 0.12、（118.95 ± 12.31）kAU/L比（147.63 ± 15.32）kAU/L]，差异有统计学意义（P<0.05）。联合检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平对肺曲霉病进行诊断，阳性预测率、阴性预测率分别显著高于单独检测肺泡灌洗液Gm I值和血液烟曲霉IgG水平诊断[92.50%（37/40）比61.90%（26/42）和61.54%（24/39）、88.24%（30/34）比53.13%（17/32）和51.43%（18/35）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平与肺曲霉病严重程度具有一定相关性。联合检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平对肺曲霉病进行诊断，诊断灵敏度、准确率均高于单独检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平[92.86%（39/42）比65.00%（26/40）和67.57%（25/37）、83.78%（62/74）比75.68%（56/74）和75.68%（56/74）]，诊断特异度低于单独检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平[71.88%（23/32）比88.24%（30/34）和83.78%（31/37）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论肺泡灌洗液Gm及血液烟曲霉IgG与肺曲霉病症状具有一定相关性，肺泡灌洗液Gm、血液烟曲霉IgG联合检测对肺曲霉病的临床诊断和治疗具有重要意义。

简介：摘要目的探讨烟曲霉暴露对卵清白蛋白(OVA)致敏大鼠滤泡性辅助(Tfh)细胞分化的作用。方法本研究为实验研究。健康雄性Wistar大鼠48只，采用随机数字表法分为2组，OVA致敏加磷酸盐缓冲液(PBS)吸入组(OVA/PBS)、OVA致敏加烟曲霉孢子(AF)吸入组(OVA/AF)，每组24只。获取24、40、56 d处死大鼠血清、肺组织、肺气管旁淋巴结组织、肺泡灌洗液、大鼠脾脏等，分析脾和肺气管旁淋巴结中Tfh细胞含量、肺泡灌洗液中细胞因子浓度测定和IgE的检测、观察肺组织HE染色和PAS染色，以及用Western blot检测Blimp-1和Bcl-6蛋白表达情况。结果随时间延长，OVA/AF组血嗜酸粒细胞计数及血清IgE水平均呈逐渐升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义(F值分别为4.91、5.53，P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈逐渐下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义(F值分别为1.98、2.16，P值均>0.05)。2组大鼠肺组织HE染色和PAS染色观察发现，基底膜不规则增厚，可见黏膜下水肿、管腔内渗出物、以及炎症细胞的浸润。随时间延长，OVA/AF组PAS染色阳性杯状细胞比例呈升高趋势，各时间点比较差异有统计学意义(F＝8.062，P<0.05)；OVA/PBS组各时间点比较差异无统计学意义(F＝3.132，P>0.05)。随时间延长，OVA/AF组脾脏、肺及气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例均呈升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义(F值分别为6.71、4.98，P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义(F值分别为2.02、2.97，P值均>0.05)。OVA/AF组肺和气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例与血清IgE有相关性(r＝0.960 1)。OVA/AF组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)；OVA/PBS组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论烟曲霉暴露可能对OVA致敏大鼠Tfh细胞有分化促进作用。

简介：摘要目的探讨烟曲霉对小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）自噬流的影响。方法灭活烟曲霉体外诱导小鼠BMDM不同时间（0、0.5、4、12 h），提取细胞蛋白，Western印迹法检测自噬关键蛋白LC3-Ⅰ型/Ⅱ型的转换及磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）Ser2481的蛋白水平。用烟曲霉和溶酶体阻断剂[包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64d+胃蛋白酶抑制剂pepstatin、巴佛洛霉素-A1（BAF-A1）、氯化铵、氯喹]单独或联合体外诱导小鼠BMDM不同时间（4、12 h）后，Western印迹法检测烟曲霉对新生的LC3-Ⅱ、细胞基础自噬流的影响，并通过共聚焦荧光显微镜观察烟曲霉与LC3、Rubicon（RUN domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich-domain-containing protein）的共定位关系。不同处理时间数据结果采用非匹配t检验分析，烟曲霉孢子和自噬溶酶体阻断剂两因素处理数据结果采用2 × 2析因分析方法。结果Western印迹显示，与对照组（0 h组）比较，烟曲霉体外诱导小鼠BMDM 0.5、4、12 h后细胞内LC3-Ⅱ表达逐渐增加，差异均有统计学意义（t值分别为6.58、3.28、3.02，均P < 0.05），但各组p-mTOR蛋白水平差异无统计学意义（t值分别为0.441、0.477、0.382，P值分别为0.682、0.660、0.722）。与单独氯喹处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合氯喹处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异均有统计学意义（t = 2.13、2.78，均P < 0.05）。与单独氯化铵处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合氯化铵处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异均有统计学意义（t = 2.92、2.92，均P < 0.05）。与单独BAF-A1处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合BAF-A1处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异有统计学意义（t = 2.13、2.13，均P < 0.05）。与单独E-64d + pepstatin处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合E-64d + pepstatin处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异有统计学意义（t = 2.13、2.92，均P < 0.05）。用钙荧光白荧光标记的烟曲霉孢子刺激BMDM 8 h后，共聚焦荧光显微镜显示LC3、Rubicon主要包绕于烟曲霉周围，与烟曲霉均有共定位关系。结论烟曲霉体外诱导可增加小鼠BMDM基础自噬流。

简介：摘要系统性红斑狼疮（SLE）合并烟曲霉菌脑脓肿较为罕见，需要和细菌性脑脓肿及神经精神狼疮进行鉴别。文中报道2例手术确诊SLE合并烟曲霉菌脑脓肿的病例。例1为34岁女性，诊断SLE 6个月后出现抽搐及意识障碍，首次住院时因为影像学阴性被诊断为神经精神狼疮，出院后复查头颅磁共振成像发现脓肿样信号。例2为20岁男性，诊断SLE 3年后出现高热、抽搐及意识障碍，头颅影像学表现为脓肿样信号。2例患者脑脊液病原学均阴性，通过脓肿切除或引流病理确诊为烟曲霉菌脑脓肿，经予伏立康唑治疗后症状缓解、病灶消退。

简介：摘要目的探讨血清烟曲霉免疫球蛋白G（IgG）抗体联合支气管肺泡灌洗液（BALF）半乳甘露聚糖（GM）检测对肺曲霉菌病的诊断价值。方法选取2016年9月至2018年9月河北燕达医院收治的99例疑似肺曲霉菌感染者为研究对象，根据诊断标准分为对照组（38例）、侵袭组（24例）和慢性组（37例），记录各组研究对象血清烟曲霉IgG抗体和GM抗原诊断结果。结果肺曲霉菌感染者中陈旧性肺结核患者占比最高（26.23%、16/61），其次为慢性阻塞性肺疾病（18.03%、11/61）、肺恶性肿瘤（9.84%、6/61）、支气管哮喘（9.84%、6/61）；慢性组患者陈旧性肺结核比例（40.54%、15/37）显著高于侵袭组（4.17%、1/24），差异有统计学意义（χ2 = 9.954、P = 0.002）。患者临床症状主要是咳嗽、咯痰、呼吸困难、发热和咯血，CT检查主要表现为空洞、曲霉球、多发或弥漫病变等；慢性组患者咳嗽（100.00%、37/37）、咯痰（97.30%、36/37）、咯血（54.05%、20/37）、空洞（83.78%、31/37）及曲霉球（59.46%、22/37）比例均显著高于侵袭组[75.00%（18/24）、75.00%（18/24）、20.83%（5/24）、45.83%（11/24）和16.67%（4/24）]，差异均有统计学意义（χ2 = 7.634、5.099、6.642、9.776、10.900，P = 0.006、0.024、0.010、0.002、0.001）。慢性组患者多发或弥漫病变（13.51%、5/37）、晕轮征患者比例（0.00%、0/37）均显著低于侵袭组[75.00%（18/24）和41.67%（10/24）]，差异均有统计学意义（χ2 = 23.431、15.525，P均< 0.001）。侵袭组和慢性组患者BALF GM抗原[（0.88 ± 0.13、0.98 ± 0.24）kiU/L]、血清烟曲霉IgG抗体水平[（121.96 ± 42.03、153.42 ± 49.67）kAU/L]均显著高于对照组，差异均有统计学意义（t = 6.422、9.389、17.395、14.436，P均< 0.001）。侵袭组患者血清烟曲霉IgG抗体水平[（121.96 ± 42.03）kAU/L]低于慢性组[（153.42 ± 49.67）kAU/L]，差异有统计学意义（t = 2.563、P = 0.013），但两组BALF GM抗原水平[（0.88 ± 0.13）vs. （0.98 ± 0.24）kiU/L]差异无统计学意义（t = 1.868、P = 0.067）。血清烟曲霉IgG抗体以120 kAU/L为临界值时敏感度为62.30%，特异度为81.58%，以140 kAU/L为临界值时敏感度为52.46%，特异度为94.74%，BALF GM抗原以0.5为临界值时敏感度为73.77%，特异度为81.58%，且BALF GM抗原以0.5为临界值时敏感度（73.77%、45/61）显著高于血清烟曲霉IgG抗体以140 kAU/L为临界值时敏感度（52.46%、32/61），差异有统计学意义（χ2 = 5.950，P = 0.015）。单独使用BALF GM抗原、血清烟曲霉IgG抗体诊断曲线下面积分别为0.812和0.771，联合使用时诊断曲线下面积为0.898。结论血清烟曲霉IgG抗体联合BALF GM检测能够显著提高肺曲霉菌感染者的诊断率。

简介：目的通过在体外复制烟曲霉的生物膜模型，研究绿原酸（chlorogenicacid，CRA）、异绿原酸（isochlorogenicacid，IRC）对生物膜的影响。方法选取临床分离的烟曲霉构建体外生物膜模型，微量液体稀释法测定最低抑菌浓度（MIC），将菌株分为空白对照组、CRA实验组（1024mg／L、512mg／L、256mg／L），IRC实验组（1000mg／L、500mg／L、250mg／L），用扫描电子显微镜（scanningelectronmicroscopy，SEM）、激光共聚焦扫描显微镜（1aserconfocalscanningmicroscope，CLSM）定性观察生物膜；结晶紫染色法半定量生物膜量。结果37℃培养24h烟曲霉形成早期生物膜，48h形成成熟期生物膜。SEM及CLSM观察到实验组烟曲霉生物膜均较其相应空白对照组空洞、稀疏，但菌丝未见明显减少，死活菌数也无明显差别。CRA、IRC实验组早期结晶紫半定量结果为1．05±0．19、1．14±0．26、0．99±0．14、1．39±0．06、1．41±0．06、1．60±0．04，均少于空白对照组1．91±0．17，差异具有统计学意义（P〈O．05）；CRA、IRC实验组晚期结晶紫半定量结果为2．25±0．05、2．27±0．05、2．31±0．03、2．26±0．02、2．27±0．02、2．29±0．04，少于空白对照组2．36±0．01，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论CRA、IRC对体外烟曲霉生物膜形成有抑制作用。

简介：目的利用根癌农杆菌介导的基因转化定点插入突变几丁质合成酶chsC基因,实现基因失活而构建几丁质合成酶chsC基因缺失烟曲霉突变体。方法构建根癌农杆菌二元载体pDHt/SK,利用根癌农杆菌介导的转化插入突变烟曲霉几丁质合成酶chsC基因,用潮霉素抗性基因筛选转化子,并进行实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）鉴定。结果潮霉素抗性基因通过同源重组成功插入烟曲霉基因组中;经RT-PCR鉴定,烟曲霉几丁质合成酶基因chsC表达失活。结论利用根癌农杆菌介导的基因转化可以定点插入突变并失活目的基因,此方法有可能成为烟曲霉基因转化和功能基因组研究的有力工具。

简介：摘要目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对肺泡巨噬细胞(AMs)Dectin-1受体表达及对烟曲霉感染应答能力的影响。方法实验研究。大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383加入CSE后再使用烟曲霉静止期孢子(RC)刺激以建立烟曲霉体外感染细胞模型，流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、蛋白质印迹检测Dectin-1表达；siRNA沉默和慢病毒载体过表达Dectin-1后通过吞噬实验检测AMs对RC吞噬能力，定量实时聚合酶链反应、酶联免疫吸附试验检测相关细胞因子表达。结果激光共聚焦显微镜(15.29±2.88比24.56±4.01，t＝11.75，P<0.05)及流式细胞仪(17.73±4.95比25.94±7.12，t＝17.27，P<0.05)均显示CSE降低AMs表面Dectin-1受体的表达。RC体外刺激后Dectin-1 mRNA的表达出现时间依赖性增加，对照组在所有时间点都较CSE组显著增加(P值均<0.05)；蛋白表达结果类似：对照组明显高于CSE组(18 h：0.755±0.035比0.360±0.047；24 h：0.968±0.035比0.552±0.049，P值均<0.05)。CSE降低AMs对RC吞噬能力(吞噬率：53.33%±9.95%比75.17%±8.66%；吞噬指数：2.17±0.58比7.67±1.53，P值均<0.05)。siRNA下调Dectin-1表达联合CSE可以进一步降低NR8383细胞对RC的吞噬力(P<0.05)，但单纯下调Dectin-1表达对RC的吞噬能力差异无统计学意义(P>0.05)。Dectin-1介导细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-4的产生：TNF-α、IL-1β在对照组增加尤为明显，感染6 h后达峰值，每个时间点比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与之相反，IL-4在CSE组升高更为显著，每个时间点比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。IL-10表达也增加，但2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。使用siRNA抑制/慢病毒过表达Dectin-1对4种细胞因子mRNA和蛋白产生同向作用。结论CSE可引起AMs Dectin-1受体低表达和功能障碍，导致烟曲霉感染后吞噬能力降低和细胞因子异常表达。CSE引起的AMs抗曲霉防御能力下降部分是通过Dectin-1介导的。

简介：摘要目的总结南京某医院烟曲霉感染患者的临床特征，初步评估烟曲霉临床分离株的唑类耐药情况，以及唑类耐药烟曲霉出现的高危因素。方法收集2017年3月至2021年2月南京市鼓楼医院检验科自住院患者中分离到的烟曲霉菌株，分析感染患者的临床资料，并对分离的烟曲霉进行唑类药物敏感性试验和cyp51A基因及其启动子区的突变检测。结果共收集烟曲霉201株，主要来自痰标本，感染患者中，男131例，女70例，年龄（64.2 ± 15.8）岁，主要分布在呼吸内科（79例）、重症医学科（34例）、风湿免疫科（19例）等；患者常见基础疾病有间质性肺炎（32例）、恶性肿瘤（18例）、肺炎（13例）、外伤（12例）以及系统性红斑狼疮（8例）等。药物敏感性试验显示，6株（2.99%）烟曲霉对伊曲康唑和泊沙康唑耐药，3例感染唑类耐药烟曲霉的患者在送检前使用过抗真菌药。对6株唑类耐药烟曲霉的cyp51A基因及其启动子区进行测序，发现其中5株携带TR34/L98H/S297T/F495I位点突变，另1株携带TR34/L98H突变。结论与既往报道的2010—2015年中国烟曲霉临床株唑类耐药数据相比，2017—2021年南京市鼓楼医院烟曲霉对唑类的耐药水平并未升高，耐药机制多为cyp51A基因及其启动子区TR34/L98H/S297T/F495I突变。

简介：曲霉病（aspergillosis）的发病率近年来呈现逐步上升趋势,多见于血液科和ICU,是免疫功能严重失衡患者重要的致残因素和死亡因素。曲霉病的诊断和治疗一直是临床医务工作者的一个难点。本文全面阐述了曲霉病诊疗的基本现况及近年来的研究进展,为临床提供重要的参考依据。

简介：摘要目的研究金银花活性成分异绿原酸及联合伏立康唑＋头孢他啶对早期铜绿假单胞菌-烟曲霉菌混合生物被膜的体外协同抑菌作用。方法体外构建早期24 h静止铜绿假单胞菌-烟曲霉混合生物被膜模型并建立不同浓度(250、500、1 000 μg/ml)的异绿原酸组及联合抗生素组(1 μg/ml伏立康唑＋16 μg/ml头孢他啶)分别作用24 h，扫描电镜(SEM)观察生物被膜形态学改变；结晶紫染色法定量生物被膜；XTT减低法测混合生物被膜内烟曲霉及铜绿假单胞菌的总代谢活性。结果电镜观察证实异绿原酸可破坏早期混合生物被膜结构使胞外基质减少；且异绿原酸联合抗生素组较单纯抗生素联合组对混合菌体的抑制作用更加明显，使载体上生物被膜的量明显降低。结晶紫染色法提示：250、500、1 000 μg/ml异绿原酸组总被膜定量与250、500、1 000 μg/ml异绿原酸联合伏立康唑＋头孢他啶组、伏立康唑＋头孢他啶组、空白对照组及组间两两比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。XTT比色法提示：对于早期混合生物被膜，异绿原酸联合抗生素组与空白组、异绿原酸组相比，联合用药组的代谢活性明显减低(抑制率达50%)。结论异绿原酸在体外不能杀死铜绿假单胞菌-烟曲霉混合生物被膜内菌体，但对早期铜绿假单胞菌-烟曲霉混合生物被膜具有破坏作用，使得异绿原酸联合伏立康唑＋头孢他啶对早期混合生物被膜的破坏作用明显强于伏立康唑联合头孢他啶组，且均呈浓度依赖性。

简介：

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简介：“一定要当好公家的人!”父亲没有任何豪言壮语，可这句话就像沉重的钟鼓，让我久久无法释怀，又像指路的明灯，告诉我今后该怎么走。

简介：摘要：建立了大米中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A同时处理的免疫亲和柱净化-高效液相色谱方法。样品经过甲醇-水（体积比为70:30）提取，通过免疫亲和柱富集和净化，采用依利特 Hypersil ODS2色谱柱（4.6×150mm,5μm），以乙腈：2%冰乙酸溶液为流动相，等度洗脱，采用高效液相色谱结合荧光检测器检测。黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检出限分别为0.024和0.063μg/kg，标准曲线的线性范围分别为0.10～40.0和1.00～100.0ng/mL，大米样品中，平均加标回收率为79.5.%～88.0%，方法精密度为2.5%～5.3%。

简介：摘要目的探讨黄曲霉毒素的检测方法。方法对黄曲霉毒素的检测方法较多，现对荧光反应，产毒株的筛选法，薄层层析法，高效液相色谱法，酶联免疫吸附法进行分析。结果黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，在天然被污染的食品中，一般以黄曲霉毒素B1最多，而黄曲霉毒素B1、B2、G1只占很小部分，B1、G1毒性强，有致癌性。结论早期研究时根据毒素在薄层板上产生荧光颜色不同，分为黄曲霉毒素B族和G族。由于黄曲霉毒素的剧毒性，强致癌性及存在的广泛性。

简介：近日,关于＂烟草院士＂的争议甚嚣尘上,关于香烟的危害性再度为大众所关注。日常生活中,人们常会选择一些低焦油、淡口味、高价烟等,试图降低吸烟带来的损害。然而一些研究表明,人们对香烟的认识存在诸多误区。

简介：摘要目的探讨肺曲霉病的临床表现和影像学特征，以提高对本病的认识。方法采用回顾性分析的方法对我院2006年1月至2012年8月37例诊断为肺曲霉病患者的临床资料进行分析研究。结果28例（75.68％）的肺曲霉病伴有基础疾病。临床主要表现为咯血、咳嗽、咳痰、气促、胸痛、发热。胸部CT主要表现为高密度结节影、厚壁/不规则空洞、斑片阴影、钙化。病变部位主要集中在右肺上叶及左上肺。20例为确诊病例，胸腔镜或开胸肺切除术后病理确诊16例，电子支气管镜肺活检确诊7例。同时由电子支气管镜肺活检及肺切除术后病理报告3例。28例（75.67%）经手术及抗真菌治疗好转或痊愈。结论肺曲霉病多继发于全身基础疾病，临床表现特异性低，影像学表现多样，极易误诊，临床诊断应结合病史、临床表现、影像学及病理学检查，纤维支气管镜检查在该疾病的诊断中具有重要作用。

简介：摘要目的分析痰培养联合曲霉血清学GM试验对侵袭性曲霉感染患者诊断效能的影响。方法在我院住院患者中选取57例，为此次研究对象，纳入标准是可疑性曲霉感染病例。采集试验标本，进行痰培养、曲霉血清学GM试验，分析每种方式和联合试验的特异性和敏感性。结果全部病例中最终确诊感染的患者有14例，非感染患者有43例。两种检测结果显示阳性诊出率是92.30%；GM试验阳性诊出率是73.33%；真菌培养阳性诊出率是23.07%。可以看出联合检测有着更高的诊出率，不同方式诊出率比较存在差异（P<0.05）。结论诊断侵袭性曲霉感染患者的工作中，应该用痰培养联合曲霉血清学GM试验的方式，可提高诊出率，值得临床推广。