简介：

简介：烟曲霉是侵袭性曲霉菌病的重要病原菌之一,它通过产生无性分生孢子进行感染。孢子的生存能力极强,能在多种微生物培养基上和环境条件下生长。现对烟曲霉无性产孢的基因调控机制的研究进展作一阐述。

简介：烟曲霉是侵袭性真菌病常见的致病菌之一。近年来一些细胞表面蛋白（如GPI锚定蛋白）以及分泌的毒素被认为是烟曲霉的关键致病因子。现从烟曲霉的细胞壁蛋白、多糖，细胞外基质成分，烟曲霉的分泌产物几方面综述已发现的烟曲霉关键致病因子，并对未来的研究方向进行展望。

简介：目的构建烟曲霉kipA基因突变株。方法通过In-Fusion技术将kipA基因的上下游基因与抗性基因顺序链接,以潮霉素抗性基因替换靶基因,达到用同源重组手段敲除烟曲霉kipA基因的目的,以realtime-PCR对基因突变株进行鉴定和验证。结果RT-PCR结果显示,成功构建烟曲霉kipA基因突变株。结论烟曲霉kipA基因突变株的构建,为后续烟曲霉极性生长与血管侵袭性的研究提供了实验基础。

简介：目的探讨烟曲霉硫氧还蛋白还原酶（thioredoxinreductase,TR）对侵袭性曲霉病（invasiveaspergillosis,IA）的免疫保护作用。方法C57BL/6小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组小鼠用重组TR免疫2次。感染烟曲霉前用环磷酰胺和地塞米松对全部小鼠进行免疫抑制处理,通过气道穿刺法向气管内注入烟曲霉孢子悬液,建立IA疾病模型。观察两组小鼠的存活率、局部器官真菌载量、肺组织病理变化、肺泡灌洗液细胞分类计数,评估TR蛋白的免疫保护作用。结果存活率：免疫组小鼠7d存活率为64.7%,对照组为0。肺组织匀浆烟曲霉CFU中位数：存活小鼠为0,死亡小鼠为44（P25,P75为21,70）（P〈0.01）。组织病理学检观察：死亡小鼠肺肿胀出血、肺泡间隔增宽、大量炎症细胞聚集、组织灶状坏死,并有大量烟曲霉菌丝存在,而存活小鼠肺组织损伤程度轻,且组织间无菌丝。肺泡灌洗液涂片染色细胞计数显示：存活小鼠单个核细胞约占84.2%,中性粒细胞仅占15.8%;死亡小鼠单个核细胞占33.6%,中性粒细胞约占66.4%。结论烟曲霉重组蛋白TR能诱导小鼠产生抵抗IA的免疫保护力,是一个有潜力的保护性抗原。

简介：摘要回顾性分析了北京大学第三医院2015—2021年接受烟曲霉特异性IgG检测的18例变应性支气管肺曲霉菌病（ABPA）患者的资料。其中男11例，女7例，年龄18~79岁。全部病例均有哮喘病史或咳喘症状，烟曲霉特异性IgE均阳性；血清总IgE>500 U/ml者16例，其中血清总IgE>1 000 U/ml者13例。在其他诊断指标中，外周血嗜酸性粒细胞>0.5×109/L者16例；肺部CT显示有支气管扩张者15例；血清烟曲霉特异性IgG阳性（>120 AU/ml）者10例。烟曲霉特异性IgG阳性与阴性病例比较，血清总IgE水平、外周血嗜酸性粒细胞计数、支气管扩张占比差异均无统计学意义（均P>0.05）。本研究发现，ABPA患者烟曲霉特异性IgG阳性率>50%，对ABPA的诊断具有辅助价值。

简介：摘要目的探究肺泡灌洗液半乳甘露聚糖（Gm）、血液烟曲霉IgG联合检测对肺曲霉病的诊断价值。方法选取2017年2月至2019年9月浙江省海盐县人民医院收治的肺曲霉病患者74例，按照病理类型分为慢性肺曲霉病组35例及侵袭性肺曲霉病组39例。采集两组研究对象肺泡灌洗液，对肺泡灌洗液Gm水平进行检测，使用曲霉IgG酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测血液烟曲霉IgG水平，对单独检测肺泡灌洗液Gm、血液烟曲霉IgG及二者联合检测的阳性预测率、阴性预测率、诊断灵敏度、特异度和准确性进行统计对比。结果侵袭性肺曲霉病组肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平均低于慢性肺曲霉病组[0.65 ± 0.09比0.98 ± 0.12、（118.95 ± 12.31）kAU/L比（147.63 ± 15.32）kAU/L]，差异有统计学意义（P<0.05）。联合检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平对肺曲霉病进行诊断，阳性预测率、阴性预测率分别显著高于单独检测肺泡灌洗液Gm I值和血液烟曲霉IgG水平诊断[92.50%（37/40）比61.90%（26/42）和61.54%（24/39）、88.24%（30/34）比53.13%（17/32）和51.43%（18/35）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平与肺曲霉病严重程度具有一定相关性。联合检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平对肺曲霉病进行诊断，诊断灵敏度、准确率均高于单独检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平[92.86%（39/42）比65.00%（26/40）和67.57%（25/37）、83.78%（62/74）比75.68%（56/74）和75.68%（56/74）]，诊断特异度低于单独检测肺泡灌洗液Gm I值、血液烟曲霉IgG水平[71.88%（23/32）比88.24%（30/34）和83.78%（31/37）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论肺泡灌洗液Gm及血液烟曲霉IgG与肺曲霉病症状具有一定相关性，肺泡灌洗液Gm、血液烟曲霉IgG联合检测对肺曲霉病的临床诊断和治疗具有重要意义。

简介：摘要目的探讨烟曲霉暴露对卵清白蛋白(OVA)致敏大鼠滤泡性辅助(Tfh)细胞分化的作用。方法本研究为实验研究。健康雄性Wistar大鼠48只，采用随机数字表法分为2组，OVA致敏加磷酸盐缓冲液(PBS)吸入组(OVA/PBS)、OVA致敏加烟曲霉孢子(AF)吸入组(OVA/AF)，每组24只。获取24、40、56 d处死大鼠血清、肺组织、肺气管旁淋巴结组织、肺泡灌洗液、大鼠脾脏等，分析脾和肺气管旁淋巴结中Tfh细胞含量、肺泡灌洗液中细胞因子浓度测定和IgE的检测、观察肺组织HE染色和PAS染色，以及用Western blot检测Blimp-1和Bcl-6蛋白表达情况。结果随时间延长，OVA/AF组血嗜酸粒细胞计数及血清IgE水平均呈逐渐升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义(F值分别为4.91、5.53，P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈逐渐下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义(F值分别为1.98、2.16，P值均>0.05)。2组大鼠肺组织HE染色和PAS染色观察发现，基底膜不规则增厚，可见黏膜下水肿、管腔内渗出物、以及炎症细胞的浸润。随时间延长，OVA/AF组PAS染色阳性杯状细胞比例呈升高趋势，各时间点比较差异有统计学意义(F＝8.062，P<0.05)；OVA/PBS组各时间点比较差异无统计学意义(F＝3.132，P>0.05)。随时间延长，OVA/AF组脾脏、肺及气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例均呈升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义(F值分别为6.71、4.98，P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义(F值分别为2.02、2.97，P值均>0.05)。OVA/AF组肺和气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例与血清IgE有相关性(r＝0.960 1)。OVA/AF组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)；OVA/PBS组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论烟曲霉暴露可能对OVA致敏大鼠Tfh细胞有分化促进作用。

简介：摘要目的探讨烟曲霉对小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）自噬流的影响。方法灭活烟曲霉体外诱导小鼠BMDM不同时间（0、0.5、4、12 h），提取细胞蛋白，Western印迹法检测自噬关键蛋白LC3-Ⅰ型/Ⅱ型的转换及磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）Ser2481的蛋白水平。用烟曲霉和溶酶体阻断剂[包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64d+胃蛋白酶抑制剂pepstatin、巴佛洛霉素-A1（BAF-A1）、氯化铵、氯喹]单独或联合体外诱导小鼠BMDM不同时间（4、12 h）后，Western印迹法检测烟曲霉对新生的LC3-Ⅱ、细胞基础自噬流的影响，并通过共聚焦荧光显微镜观察烟曲霉与LC3、Rubicon（RUN domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich-domain-containing protein）的共定位关系。不同处理时间数据结果采用非匹配t检验分析，烟曲霉孢子和自噬溶酶体阻断剂两因素处理数据结果采用2 × 2析因分析方法。结果Western印迹显示，与对照组（0 h组）比较，烟曲霉体外诱导小鼠BMDM 0.5、4、12 h后细胞内LC3-Ⅱ表达逐渐增加，差异均有统计学意义（t值分别为6.58、3.28、3.02，均P < 0.05），但各组p-mTOR蛋白水平差异无统计学意义（t值分别为0.441、0.477、0.382，P值分别为0.682、0.660、0.722）。与单独氯喹处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合氯喹处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异均有统计学意义（t = 2.13、2.78，均P < 0.05）。与单独氯化铵处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合氯化铵处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异均有统计学意义（t = 2.92、2.92，均P < 0.05）。与单独BAF-A1处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合BAF-A1处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异有统计学意义（t = 2.13、2.13，均P < 0.05）。与单独E-64d + pepstatin处理BMDM 4 h和12 h相比，烟曲霉联合E-64d + pepstatin处理后LC3-Ⅱ进一步增高，差异有统计学意义（t = 2.13、2.92，均P < 0.05）。用钙荧光白荧光标记的烟曲霉孢子刺激BMDM 8 h后，共聚焦荧光显微镜显示LC3、Rubicon主要包绕于烟曲霉周围，与烟曲霉均有共定位关系。结论烟曲霉体外诱导可增加小鼠BMDM基础自噬流。

简介：摘要系统性红斑狼疮（SLE）合并烟曲霉菌脑脓肿较为罕见，需要和细菌性脑脓肿及神经精神狼疮进行鉴别。文中报道2例手术确诊SLE合并烟曲霉菌脑脓肿的病例。例1为34岁女性，诊断SLE 6个月后出现抽搐及意识障碍，首次住院时因为影像学阴性被诊断为神经精神狼疮，出院后复查头颅磁共振成像发现脓肿样信号。例2为20岁男性，诊断SLE 3年后出现高热、抽搐及意识障碍，头颅影像学表现为脓肿样信号。2例患者脑脊液病原学均阴性，通过脓肿切除或引流病理确诊为烟曲霉菌脑脓肿，经予伏立康唑治疗后症状缓解、病灶消退。

简介：目的揭示宿主磷脂酶D（phospholipaseD,PLD）应对烟曲霉感染过程中的重要作用和可能机制。方法应用滴鼻方式使野生小鼠和磷脂酶D双基因敲除小鼠（pld1^-/-pld2^-/-）感染烟曲霉孢子后,取小鼠肺组织、抽取支气管肺泡灌洗液,应用组织匀桨与菌落计数的方法检测小鼠肺组织中烟曲霉负荷,采用eBioscience公司的多因子检测试剂盒检测肺泡灌洗液中炎症因子分泌情况;分离两种小鼠的骨髓细胞并诱导分化为成熟巨噬细胞（BMDM）,制霉菌素法检测其吞噬和杀死烟曲霉孢子的能力。结果感染烟曲霉孢子6h后,pld1^-/-pld2^-/-小鼠肺部真菌负荷显著高于野生小鼠,其肺泡灌洗液和肺泡巨噬细胞中均存在大量孢子,肺泡灌洗液中炎症因子浓度显著升高;体外实验证明pld1^-/-pld2^-/-小鼠的BMDM细胞吞噬和杀死烟曲霉孢子的能力显著减弱。结论小鼠pld1基因和pld2基因同时敲除导致其巨噬细胞的吞噬和杀死烟曲霉孢子的能力显著减弱,进而可能降低小鼠抗烟曲霉感染的能力。同时机体可能通过分泌大量的炎症因子以招募其他免疫细胞杀灭烟曲霉孢子。

简介：目的研究地塞米松对过氧化氢（H2O2）体外杀伤烟曲霉（Aspergillusfumigatus,A.fumigatus）的影响。方法用不同浓度的地塞米松（0mg/mL,0.02mg/mL,0.2mg/mL）处理烟曲霉孢子,按照处理时间不同分为A（0.5h）,B（2h）,C（7h）,D（16h）4组。用测定H2O2杀伤真菌的标准方法——斑点法分别测定各组烟曲霉孢子对H2O2的氧化杀伤敏感性。结果在H2O2浓度为1.5mmol/L下,未用地塞米松处理的孢子（阴性对照）氧化杀伤敏感性为5×101（生长良好）。A（0.5h）组：地塞米松0.02mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性为5×10^3;地塞米松0.2mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性为5×10^4。B（2h）组：地塞米松0.02mg/mL和0.2mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性均为5×10^3。C（7h）和D（16h）组：不同浓度地塞米松处理后氧化杀伤敏感性与阴性对照没有差别（均为5×10^1）。结论地塞米松使H2O2在体外杀伤烟曲霉的能力增强,这种作用仅发生在地塞米松接触烟曲霉孢子的早期（〈2h）。

简介：摘要目的探讨血清烟曲霉免疫球蛋白G（IgG）抗体联合支气管肺泡灌洗液（BALF）半乳甘露聚糖（GM）检测对肺曲霉菌病的诊断价值。方法选取2016年9月至2018年9月河北燕达医院收治的99例疑似肺曲霉菌感染者为研究对象，根据诊断标准分为对照组（38例）、侵袭组（24例）和慢性组（37例），记录各组研究对象血清烟曲霉IgG抗体和GM抗原诊断结果。结果肺曲霉菌感染者中陈旧性肺结核患者占比最高（26.23%、16/61），其次为慢性阻塞性肺疾病（18.03%、11/61）、肺恶性肿瘤（9.84%、6/61）、支气管哮喘（9.84%、6/61）；慢性组患者陈旧性肺结核比例（40.54%、15/37）显著高于侵袭组（4.17%、1/24），差异有统计学意义（χ2 = 9.954、P = 0.002）。患者临床症状主要是咳嗽、咯痰、呼吸困难、发热和咯血，CT检查主要表现为空洞、曲霉球、多发或弥漫病变等；慢性组患者咳嗽（100.00%、37/37）、咯痰（97.30%、36/37）、咯血（54.05%、20/37）、空洞（83.78%、31/37）及曲霉球（59.46%、22/37）比例均显著高于侵袭组[75.00%（18/24）、75.00%（18/24）、20.83%（5/24）、45.83%（11/24）和16.67%（4/24）]，差异均有统计学意义（χ2 = 7.634、5.099、6.642、9.776、10.900，P = 0.006、0.024、0.010、0.002、0.001）。慢性组患者多发或弥漫病变（13.51%、5/37）、晕轮征患者比例（0.00%、0/37）均显著低于侵袭组[75.00%（18/24）和41.67%（10/24）]，差异均有统计学意义（χ2 = 23.431、15.525，P均< 0.001）。侵袭组和慢性组患者BALF GM抗原[（0.88 ± 0.13、0.98 ± 0.24）kiU/L]、血清烟曲霉IgG抗体水平[（121.96 ± 42.03、153.42 ± 49.67）kAU/L]均显著高于对照组，差异均有统计学意义（t = 6.422、9.389、17.395、14.436，P均< 0.001）。侵袭组患者血清烟曲霉IgG抗体水平[（121.96 ± 42.03）kAU/L]低于慢性组[（153.42 ± 49.67）kAU/L]，差异有统计学意义（t = 2.563、P = 0.013），但两组BALF GM抗原水平[（0.88 ± 0.13）vs. （0.98 ± 0.24）kiU/L]差异无统计学意义（t = 1.868、P = 0.067）。血清烟曲霉IgG抗体以120 kAU/L为临界值时敏感度为62.30%，特异度为81.58%，以140 kAU/L为临界值时敏感度为52.46%，特异度为94.74%，BALF GM抗原以0.5为临界值时敏感度为73.77%，特异度为81.58%，且BALF GM抗原以0.5为临界值时敏感度（73.77%、45/61）显著高于血清烟曲霉IgG抗体以140 kAU/L为临界值时敏感度（52.46%、32/61），差异有统计学意义（χ2 = 5.950，P = 0.015）。单独使用BALF GM抗原、血清烟曲霉IgG抗体诊断曲线下面积分别为0.812和0.771，联合使用时诊断曲线下面积为0.898。结论血清烟曲霉IgG抗体联合BALF GM检测能够显著提高肺曲霉菌感染者的诊断率。

简介：目的建立烟曲霉与人支气管上皮细胞的共培养模型,观察不同感染时间人支气管上皮细胞生理特性的变化规律,探讨烟曲霉对人支气管上皮细胞的作用机制。方法用烟曲霉在体外感染人支气管上皮细胞,观察人支气管上皮细胞细胞形态改变,用流式细胞仪测支气管上皮细胞的凋亡率及用real-timePCR测人支气管上皮细胞凋亡基因的表达。结果随烟曲霉作用于人支气管上皮细胞时间的延长,人支气管上皮细胞的生物学形态发生改变,其回缩、变圆量逐渐增加,凋亡率亦逐渐增加,凋亡基因BaK表达明显上调。结论烟曲霉与人支气管上皮细胞共培养可以影响人支气管上皮细胞的形态,诱导细胞凋亡、影响凋亡基因的表达。共培养模型可进一步用于烟曲霉的致病机制研究。

简介：随着免疫抑制剂广泛应用和免疫抑制患者的不断增多,由烟曲霉引起的侵袭性感染病例逐渐增加,越来越引起医学界的关注。本文特此对烟曲霉感染的宿主防御机制以及免疫学研究进展作一综述。

简介：目的构建烟曲霉额外拷贝菌株，了解额外拷贝烟曲霉sho1、pbs2基因能否增强菌株对高渗透压、过氧化氢（H：O2）、碱性pH、刚果红应激的抵抗能力，探讨HOG通路（highosmolarityglycerolpathway）参与的应激反应。方法用原生质体法构建分别含有烟曲霉sho1、pbs2基因的额外拷贝菌株，采用Real-timePCR方法检测额外拷贝株中sho1、pbs2的表达情况。观察并比较缺陷株、额外拷贝株对NaCl（1mol／L）、H2O2（5mmol／L）、刚果红（400mg／L）及碱性pH（10．0）应激的反应。结果获得了含有烟曲霉sho1、pbs2基因的额外拷贝菌株MCsho1、MCpbs2，和含空白质粒的对照株Empty。额外拷贝株sho1、pbs2的表达水平增高，对NaCl（1mol／L）、H2O2（5mmol／L）、刚果红（400mg／L）、碱性pH（10．0）应激的抵抗强于Empty。MCpbs2对这些应激的抵抗较MCsho1更显著。烟曲霉缺陷株△sho1、△pbs2对NaCl（1mol／L）、H2O2（5mmol／L）、碱性pH（10．0）的敏感性高于野生株AF293。△sho1对刚果红（400mg／L）的敏感性高于野生株，△pbs2对刚果红的敏感性与野生株比，无显著差别。结论额外拷贝烟曲霉sho1或pbs2基因能增强菌株对高渗透压、氧化压力、刚果红、碱性pH应激的抵抗能力。

简介：目的通过在体外复制烟曲霉的生物膜模型，研究绿原酸（chlorogenicacid，CRA）、异绿原酸（isochlorogenicacid，IRC）对生物膜的影响。方法选取临床分离的烟曲霉构建体外生物膜模型，微量液体稀释法测定最低抑菌浓度（MIC），将菌株分为空白对照组、CRA实验组（1024mg／L、512mg／L、256mg／L），IRC实验组（1000mg／L、500mg／L、250mg／L），用扫描电子显微镜（scanningelectronmicroscopy，SEM）、激光共聚焦扫描显微镜（1aserconfocalscanningmicroscope，CLSM）定性观察生物膜；结晶紫染色法半定量生物膜量。结果37℃培养24h烟曲霉形成早期生物膜，48h形成成熟期生物膜。SEM及CLSM观察到实验组烟曲霉生物膜均较其相应空白对照组空洞、稀疏，但菌丝未见明显减少，死活菌数也无明显差别。CRA、IRC实验组早期结晶紫半定量结果为1．05±0．19、1．14±0．26、0．99±0．14、1．39±0．06、1．41±0．06、1．60±0．04，均少于空白对照组1．91±0．17，差异具有统计学意义（P〈O．05）；CRA、IRC实验组晚期结晶紫半定量结果为2．25±0．05、2．27±0．05、2．31±0．03、2．26±0．02、2．27±0．02、2．29±0．04，少于空白对照组2．36±0．01，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论CRA、IRC对体外烟曲霉生物膜形成有抑制作用。

简介：蚕的曲霉病是丝状菌病的一种,酒和醋的酿造所用原料是利用曲霉的寄生而制造的。对曲有意义的研究,文政10年(1827)笺注倭发现了曲霉种类有五十四种,在这时就开始研究曲,曲霉在饮饮上起作用的记载为酒母。蚕体上的曲霉病有很长的历史。这期间

简介：目的通过研究烟曲霉对细胞壁合成干扰物质及棘白菌素类药物的敏感性、烟曲霉在受热应激后HOG通路成分的表达变化探讨pbs2基因在热应激和胞壁应激的双重应激中的作用。方法烟曲霉野生株AF293和pbs2突变株在含钙荧光白（Calcofluorwhite,CFW）,刚果红（Congored,CR）和十二烷基硫酸钠（Sodiumdodecylsulfate,SDS）的葡萄糖酵母浸液琼脂（YeastAgarGlucose,YAG）上生长,观察其对上述3种细胞壁合成干扰物质的敏感性。微量液基稀释法检测烟曲霉对米卡芬净和卡泊芬净的敏感性。实时荧光定量PCR法分析AF293受到热刺激前后菌体pbs2和hog1的RNA含量变化。结果50℃培养时pbs2突变株对胞壁合成干扰物质的敏感性较野生株AF293增强,600μg/mLCFW,400μg/mLCR及100μg/mLSDS完全抑制pbs2突变株生长,不能完全抑制AF293的生长;在37℃培养时,AF293和pbs2突变株敏感性没有差异。50℃培养时,卡泊芬净和米卡芬净对AF293和pbs2突变株的最低有效浓度（Minimumeffectiveconcentration,MEC）均为0.25μg/mL,但pbs2突变株在药物浓度为0.5μg/mL作用时生长完全受抑制,而野生株仍生长;在35℃和42℃培养时,AF293和pbs2突变株对两种药物的敏感性没有差异,MEC均为0.5μg/mL。50℃热应激后,AF293的pbs2和hog1的RNA表达量分别下降至37℃时的3%和13%;pbs2突变株的hog1降至应激前的35%。结论烟曲霉受热应激和胞壁应激的双重应激时,pbs2基因参与细胞适应反应,发挥保护作用。

简介：目的利用根癌农杆菌介导的基因转化定点插入突变几丁质合成酶chsC基因,实现基因失活而构建几丁质合成酶chsC基因缺失烟曲霉突变体。方法构建根癌农杆菌二元载体pDHt/SK,利用根癌农杆菌介导的转化插入突变烟曲霉几丁质合成酶chsC基因,用潮霉素抗性基因筛选转化子,并进行实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）鉴定。结果潮霉素抗性基因通过同源重组成功插入烟曲霉基因组中;经RT-PCR鉴定,烟曲霉几丁质合成酶基因chsC表达失活。结论利用根癌农杆菌介导的基因转化可以定点插入突变并失活目的基因,此方法有可能成为烟曲霉基因转化和功能基因组研究的有力工具。