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  • 简介:目的建立具有潮霉素(hygromycin)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE-Ins-human)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层.方法通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因的质粒pHyg导入3T3细胞中,利用潮霉素的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果经500μg/ml的潮霉素压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性3T3细胞的形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段.结论成功地培育了潮霉素抗性的3T3细胞,为进行目的基因(pTRE-Ins-human)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础.

  • 标签: 潮霉素 抗性 细胞 饲养层 基因
  • 简介:[目的]建立具有潮霉素B(hygromycinB)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2-human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。[方法]通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和southernblot鉴定。[结果]经300ug/ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。[结论]本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。

  • 标签: NIHNIH3T3细胞 潮霉素B磷酸转移酶基因 转染 潮霉素B抗性 ES细胞
  • 简介:采用菌丝生长速率法,测定了4个麦区的5个禾谷丝核菌Rhizoctoniacerealis菌株对井冈霉素的抗药性;在含井冈霉素的PDA平板培养基上对禾谷丝核菌进行继代培养,以诱导抗药性菌系;测定了抗性菌系对其他杀菌剂的交互抗性。并比较了抗性和敏感菌系对渗透压的敏感性及药剂处理后两种菌系培养液内还原糖和可溶性蛋白的含量差异。结果表明,田间禾谷丝核菌菌株对井冈霉素分别产生了7.26、7.75、10.46、14.92和23.31倍的抗性。室内继代培养36代,禾谷丝核菌对井冈霉素抗性达49.24倍,形成了抗井冈霉素菌系。抗井冈霉素菌系对嗯醚唑、福美双、三唑酮、丙环唑、戊唑醇和咯菌腈分别产生了48.58、21.78、17.62、10.95、2.55和1.78倍的交互抗性抗性菌系在较低和较高渗透压下其生长抑制率均大于敏感菌系,用井冈霉素处理抗性和敏感菌系后。其体内的电解质都严重外渗,且抗性菌系在10h内的外渗量明显大于敏感菌系。

  • 标签: 禾谷丝核菌 井冈霉素 抗药性 交互抗性
  • 简介:摘要目的建立pOct4-Neo转基因的小鼠胚胎干细胞(ESC)株,为进一步研究ESC分化提供有力的保障。方法设置G418不同浓度进行小鼠ESC培养,确定ESC致死G418浓度;电穿孔法转染小鼠ESC,通过G418筛选并挑取阳性克隆,检测所得细胞胚胎干细胞特异性标志物Oct4及SSEA-1的表达,通过拟胚体诱导体外分化。结果ESC的致死浓度为350μg/mL,在含400μg/mlG418的培养条件下,所得阳性细胞呈克隆样鸟巢状生长,Oct4、SSEA-1表达阳性,体外可以形成拟胚体和自发分化。结论成功对小鼠ESC进行了pOct4-Neo的转基因,为进一步的小鼠ESC体外分化研究奠定了基础。

  • 标签: 胚胎干细胞 新霉素抗性基因 转基因
  • 简介:<正>对二氧化硫抗性较强的树种有:广叶玉兰、夹竹桃、日本女贞,厚皮香、桧柏、海桐花、垂柳、榆、银杏、梧桐、臭椿、槐树、刺槐、乌桕、油茶等。对氯有抗性的树种有:银杏、合欢、杉木、池杉,重阳木、扁柏、麻栎、板栗、黄杨等。具有吸尘作用的树木有:悬铃木、水青冈、栎、花楸、白桦、杨树、洋槐、松、柏木、冷杉、落叶松、云杉、泡桐、合欢等。

  • 标签: 树种 日本女贞 落叶松 吸尘作用 夹竹桃 水青冈
  • 简介:目的探讨3个抗性品系家蝇对5种杀虫剂的交互抗性,为合理使用杀虫剂提供依据.方法采用微量点滴法.结果抗DDVP品系达14.71倍的抗性,而对氯菊酯、巴沙的交互抗性分别为93.49倍和7.703倍,而对氯氰菊酯基本没有交互抗性,对DDT为0.16倍,呈负交互抗性.抗巴沙品系达5.05倍,对氯菊酯、DDVP的交互抗性为4.07倍和2.78倍,对DDT基本无交互抗性,对氯氰菊酯呈负交互抗性.抗氯菊酯品系达223.09倍的抗性,对氯氰菊酯、DDT的交互抗性为6.63倍及9.20倍,而对DDVP、巴沙基本无明显交互抗性.结论长期使用一种杀虫剂容易产生抗性,亦可能对其它杀虫剂产生交互抗性,用药时应注意种类的选择,合理使用杀虫剂.

  • 标签: 家蝇 杀虫剂 交互抗性 DDVP 氯菊酯 巴沙
  • 简介:为探讨猪殃殃Galiumaparine抗药性生物型(R)对苯磺隆的抗性机制,测定了苯磺隆对猪殃殃抗性、敏感(S)生物型体内靶标酶[乙酰乳酸合成酶(ALS)]、代谢酶[谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)]及抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)]影响的差异。离体试验结果表明,苯磺隆对R、S生物型猪殃殃ALS的抑制中量(IC50)分别为0.682、0.718μg/L(有效剂量),R、S生物型猪殃殃ALS对苯磺隆的敏感性不存在差异。活体试验结果表明,苯磺隆茎叶喷雾处理后,R、S生物型ALS活力均表现为先上升,但S生物型上升幅度小,且随后快速下降,第3d即回落至对照之下,并维持在低于对照的水平,而R生物型ALS活力在第2d可达对照的4.10倍,第5d基本回落至对照水平,之后基本维持在对照水平;R生物型GSTs活力在第1d即开始上升,最高可达对照的2.40倍,而S生物型则表现为先下降,然后小幅回升,最高为对照的1.61倍,两者在10d左右均回落至对照水平;R生物型SOD活力与对照基本相同,而S生物型虽略有下降,但R、S间不存在显著差异;两者POD活力虽均有大幅提高,但亦不存在显著差异。结果表明,低水平抗药性生物型猪殃殃对苯磺隆产生抗性的原因可能是ALS过量表达及GSTs对苯磺隆的代谢作用加强,而不是由于ALS的敏感性下降,同时POD、SOD在减轻药害中也具有一定作用。

  • 标签: 猪殃殃 苯磺隆 杂草 抗药性 机制
  • 简介:随着科学技术的发展,防治家蝇的方法日新月异,在大力提倡综合防治以环境治理为主的方针中,应用化学防治方法仍为当前的主要手段之一。家蝇对杀虫剂发生抗药性是化学防治中的一个重要问题。尽管对抗性的研究已有近半个世纪的历史,在研究阻止抗性发生以及如何延缓抗性发展方面,许多方法及策略均被

  • 标签: 抗性水平 杀虫剂 家蝇 抗性发展 基因频率 抗药性
  • 简介:既然阶级斗争总是根本利害不同的人的对抗和冲突,那么在特定条件下人民内部出现的暂时的、局部的对抗,比如不同村组的农民相互争斗,个别企事业单位中工作人员之间打架相骂,少数地区公路上农民拦车哄抢化肥……能否说成是人民内部的阶级斗争呢?也不能。因为,对抗性矛盾与矛盾斗争的对抗形式两者是不同的。前者是矛盾的性质问题,后者是矛盾的斗争形式问题。

  • 标签: 对抗性矛盾 阶级斗争 人民内部 企事业单位 工作人员 对抗形式
  • 简介:目的评估白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性风险,预测抗性发展速率,为科学合理用药提供依据。方法采用群体汰选法获得抗性品系,采用数量遗传学的域性状分析法估算抗性现实遗传力(h2)并预测不同选择压力下抗性发展的速率。结果经过17代的室内选育,白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性达到36.7倍;白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性h2为0.1257,抗性风险较大;根据抗性发展规律,得出3个不同阶段的h2分别为0.1169(F0~F5)、0.1540((F5~F11)、0.0114(F11~F17),根据不同阶段的h2值预测不同选择压力下(死亡率50%、60%、70%、80%、90%),抗性上升10倍所需的代数分别为7.3~105.2、6.4~92.6、6.4~92.6、5~72、3.3~47.6、2.4~35.2代。结论白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性风险大,应科学合理用药。

  • 标签: 白纹伊蚊 溴氰菊酯 现实遗传力 抗性风险评估
  • 简介:摘要:抗生素滥用导致抗生素抗性基因大量出现,是人类健康和环境安全的潜在威胁,是亟待处理的一类新兴环境污染物。抗生素抗性细菌和抗性基因存在于整个污水处理流程中,尤其是生物处理单元会产生数量庞大的生物污泥,是抗性基因的重要存储库,也是向环境中传播抗生素耐药性的热点。本章通过讨论预处理-厌氧消化对污泥中抗生素抗性细菌(ARB)及抗性基因(ARGs)的影响,为剩余活性处理的安全处理和处置提供一个新思路,也为降低污水处理厂抗生素抗性传播提供一定的理论指导。

  • 标签: 抗生素抗性细菌 抗生素抗性基因 厌氧消化 预处理 污泥
  • 简介:摘要:水厂处理工艺在维护饮用水安全和生态环境健康中发挥着至关重要的作用。然而,随着抗性细菌和抗性基因问题的日益突出,传统的水处理工艺面临着挑战。本文旨在探讨水厂处理工艺对典型抗性细菌和抗性基因的去除效能及其影响因素,并提出相应的技术和管理建议,以应对这一挑战,保障饮用水安全和环境健康。

  • 标签: 水厂处理工艺 抗性细菌 抗性基因 去除效能
  • 简介:摘要植物抗性生理是指逆境对生命活动的影响,以及植物对逆境的抵御抗性能力。本文将对植物的抗冷性、抗冻性、抗热性、抗旱性、抗涝性、抗盐性、抗病性等方面具体阐述植物的抗性生理,以利于更深入的研究。

  • 标签: 植物抗冷性抗冻性抗热性抗旱性抗病性
  • 简介:摘要:抗生素被认为是一类新兴的环境污染物,其过度使用已导致环境中抗生素抗性细菌(ARB)和抗生素抗性基因(ARGs)的大量出现和广泛传播。城市污水处理厂出水是释放到环境中ARGs的主要来源。ARGs的存在不但会破坏水体生态环境,同时还会通过多种途径进入人体,威胁人体健康、食品和饮用水安全。本文综述了多种深度处理工艺对ARB和ARGs的去除研究进展,比较分析了去除效果差异及存在问题。在此基础上对今后深度处理工艺去除ARB和ARGs的重点关注方向提出了建议,以期为深度处理工艺控制ARB和ARGs提供参考。

  • 标签: 污水 深度处理工艺 抗生素抗性细菌 抗生素抗性基因
  • 简介:辣椒疮痂病是辣椒生产中最为严重的细菌性病害之一,对辣椒的产量和品质影响较大。从病原菌的特征、分类、生理小种鉴定、抗疮痂病基因及其分子标记等几个方面总结了目前国内外的研究现状。

  • 标签: 辣椒疮痂病 生理小种 抗病基因 分子标记 育种
  • 简介:目的:了解合肥市家蝇抗性现状及种群间差异;方法:微量点滴法进行毒力测定;结果:通过对15种杀虫剂的测定,家蝇对5种杀虫剂较为敏感,其中家蝇对氨基甲酸酯类和有机磷类杀虫剂抗性水平普遍较高,拟除虫菊酯类中3种常用的杀虫剂比其它菊酯抗性突出.家蝇各种群对辛硫磷和甲醚菊酯的抗性差异不显著,对其它杀虫剂的抗性各种群间差异显著;结论:尽管家蝇对5种杀虫剂较为敏感,但家蝇的抗性水平不低,应该交互性使用这些杀虫剂来延缓家蝇的抗性发展.

  • 标签: 合肥市 家蝇 抗性 杀虫剂 测定
  • 简介:虽然许多原生生物而不只是微孢子虫与昆虫间有致病性联系,但本综述仅限于微孢子虫是基于2个原因.首先,微孢子虫显然是寄生于昆虫的最重要的原生动物类群.其次,从Brook(1988)的综述以来,关于非微孢子虫的原生生物的信息增加得较少.

  • 标签: 微孢子虫 抗性 环境 原生生物 动物类群 致病性
  • 简介:摘要目的以拥有不同抗菌药物耐药性的幽门螺杆菌(H.pylori)临床菌株为研究对象,基于全基因组测序探索H.pylori对克拉霉素和左氧氟沙星(LVX)耐药相关新基因。方法纳入2016年9月1日至2019年8月31日在香港大学深圳医院消化及肝脏科因上消化道相关症状就诊且13C尿素呼气试验阳性的1 749例患者,在行胃黏膜活体组织检查后进行胃黏膜组织H.pylori分离培养,成功保存H.pylori菌株90株。依据体外药敏试验结果,分别筛选克拉霉素单耐药(克拉霉素组)10株,LVX单耐药(LVX组)10株,克拉霉素和LVX双重耐药(双重耐药组)10株,克拉霉素、LVX、阿莫西林、呋喃唑酮、四环素、甲硝唑全敏感(全敏感组)10株,总计40株H.pylori菌株。通过全基因组测序,与综合抗性基因数据库(CARD)进行比对,分析单核苷酸变异(SNV)和插入缺失突变情况,筛选H.pylori对克拉霉素和LVX耐药相关基因并分析耐药相关新基因在4组间的表达差异。统计学方法采用独立样本t检验、单因素方差分析、最小显著差数法和卡方检验。结果克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组SNV位点数[(74 952.00±8 755.21)、(77 128.10±3 191.35)、(78 639.90±601.23)、(77 474.60±2 421.05)个]和插入缺失突变数[(2 582.20±265.45)、(2 653.60±108.37)、(2 667.10±43.82)、(2 641.10±80.25)个]比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。与CARD进行比对,共检出223个耐药相关基因,其中克拉霉素组克拉霉素单耐药相关基因19个,LVX组LVX单耐药相关基因24个,双重耐药组中有克拉霉素单耐药相关基因16个,LVX单耐药相关基因14个,双重耐药相关基因12个;全敏感组中有克拉霉素单耐药相关基因11个,LVX单耐药相关基因17个,双重耐药相关基因13个。克拉霉素单耐药相关基因中,红霉素酯酶基因(ere)B在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组的检出率(0/10、0/10、3/10、0/10)比较差异有统计学意义(χ2=5.79,P=0.049);红霉素核糖体甲基化酶基因(erm)家族在克拉霉素组和双重耐药组中的检出率高于LVX组和全敏感组[45.0%(9/20)比10.0%(2/20)],差异有统计学意义(χ2=6.14,P=0.013),游离甲硫氨酸-(R)-亚砜还原酶基因(msrC)在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出率(10/10、7/10、6/10、4/10)比较差异有统计学意义(χ2=8.97,P=0.030)。LVX单耐药相关基因中,喹诺酮抗性五肽重复蛋白基因(qnr)家族在LVX组和双重耐药组的检出率高于克拉霉素组和全敏感组[60.0%(12/20)比25.0%(5/20)],差异有统计学意义(χ2=5.01,P=0.025);qnrB4在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出率(1/10、3/10、7/10、1/10)比较差异有统计学意义(χ2=10.17,P=0.010)。4组中克拉霉素单耐药相关外排转运的基因个数少于LVX单耐药和双重耐药相关基因个数(11个比29个,11个比23个),差异有统计学意义(χ2=11.87、5.80,P=0.001、0.016)。LVX相关外排转运基因在克拉霉素、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出个数(28、40、24、27个)比较差异有统计学意义(χ2=10.26,P=0.016)。结论erm家族和msrC可能是介导H.pylori对克拉霉素耐药的重要基因,qnr家族与介导H.pylori对LVX耐药相关。外排转运基因可能在药物外排过程中有协同作用,其更倾向介导H.pylori对LVX耐药。

  • 标签: 螺杆菌,幽门 克拉霉素 左氧氟沙星 msrC qnr家族 外排转运系统
  • 简介:室内通过紫外线照射和药剂驯化相结合的方法连续诱变7代,获得了黄瓜白粉病菌Sphaerothecafuliginea对己唑醇的抗性菌株,该抗性菌株对己唑醇的抗性水平达到105倍,其产孢量和致病力比敏感菌株略高,但差异不显著,且对戊唑醇、腈菌唑、多抗霉素和嘧菌酯无交互抗性,对醚菌酯表现交互抗性,结果表明田间用己唑醇防治黄瓜白粉病可能存在抗性风险。

  • 标签: 黄瓜白粉病菌 诱导 抗药性 己唑醇 生物学性状