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  • 作者: 郑丽玉 姚人骐 董宁 吴瑶 姚咏明
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华急诊医学杂志》 2022年第10期
  • 机构:温州医科大学附属第一医院急诊科,温州 325015 解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心,北京 100853,解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心,北京 100853 海军军医大学第一附属医院烧伤外科,上海 200433,解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心,北京 100853
  • 简介:摘要目的探讨脂多糖(LPS)刺激下NUFIP-1介导核糖在树突细胞(DCs)凋亡中的作用及意义。方法将培养的树突细胞系DC2.4分为空白对照组及LPS刺激6、12、24、48、72 h组(n=5),LPS各亚组加入1 μg/mL LPS培养相应时间。采用Western blot检测各组细胞NUFIP-1及自相关蛋白p62和LC3B表达水平,激光共聚焦显微镜检测NUFIP-1在细胞中的表达与定位及其分别与Lyso-tracker、LC3B共定位情况。将载有沉默空载体NS及沉默慢病毒载体NUFIP-1 siRNA感染DC2.4 (n=3),以1 μg/mL LPS刺激24 h,应用流式细胞分析术检测细胞凋亡情况,并采用Western blot检测凋亡相关蛋白包括胱天蛋白酶(cleaved-caspase-3)和Bcl-2表达水平。多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),采用LSD-t法进一步进行组间两两比较。以P<0.05为差异有统计学意义。结果Western blot结果提示,LPS刺激不同时间(6、12、24、48、72 h)后DC2.4中NUFIP-1蛋白表达水平呈现先升高后下降趋势,其中LPS 24 h组NUFIP-1表达水平显著高于空白对照组[空白对照组:(0.6786 ± 0.0820);LPS 24 h组:(1.4830 ± 0.1170),P<0.01]。同时,LPS 24 h组p62表达水平显著低于空白对照组[空白对照组:(0.9087 ± 0.1235);LPS 24 h组:(0.3113 ± 0.5571),P<0.01]。LPS 24 h组LC3B-I向LC3B-Ⅱ的转化显著高于空白对照组[空白对照组:(0.5542 ± 0.1248);LPS 24 h组:(2.5310 ± 0.3119),P<0.01]。激光共聚焦显微镜观察显示,NUFIP-1主要定位于细胞核及核周,LPS刺激后其荧光强度于6 h至24 h呈时间依赖性增强,而刺激48、72 h明显减弱。同时,NUFIP-1与Lyso-tracker及LC3B的共定位较空白对照组显著增强。采用慢病毒感染技术感染NUFIP-1 siRNA可显著下调DC2.4 NUFIP-1表达水平,与空白对照组及空载体组比较分析,差异有统计学意义[空白对照组:(0.6627 ± 0.1707);空载体组:(0.6966 ± 0.1107);siRNA组:(0.1428 ± 0.0296),P<0.05]。流式细胞分析术显示,NUFIP-1 siRNA感染组在LPS刺激后较空白对照LPS 24 h组及空载体LPS 24 h组DC2.4凋亡率显著升高[空白对照LPS 24 h组:(47.91%±1.006%);空载体LPS 24 h组:(70.26% ± 1.011%);siRNA LPS 24 h组:(80.23% ± 2.094%),P<0.01]。Western blot分析进一步证实,NUFIP-1 siRNA感染组相较空白对照组及空载体组在LPS刺激下DC2.4凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3表达显著增强[空白对照LPS 24 h组:(0.4748 ± 0.0876);空载体LPS 24 h组:(0.2849 ± 0.0418);siRNA LPS 24 h组:(0.9733 ± 0.0525),P<0.01],抗凋亡蛋白Bcl-2表达则明显下调[空白对照LPS 24 h组:(0.7810 ± 0.0490);空载体LPS 24 h组:(0.8292 ± 0.0729);siRNA LPS 24 h组:(0.3957 ± 0.0838),P<0.05]。结论LPS刺激后DC2.4中NUFIP-1介导核糖明显活化,且对DC2.4凋亡具有显著保护效应。

  • 标签: NUFIP-1 核糖体自噬 脂多糖 脓毒症 免疫功能紊乱 细胞凋亡 树突细胞 免疫抑制
  • 简介:摘要痛风是由单钠尿酸盐在体内沉积引起的一种世界范围内常见的代谢性疾病,主要表现为高尿酸血症、急慢性关节炎、反复痛风石沉积,严重者可导致肾脏损害,近年来发病率逐渐升高。自是真核细胞中高度保守的保护机制,近年来成为研究的热点。而痛风与自的关系尚不明确,但越来越多的实验证实痛风与自关系密切。现通过自与信号通路、自与痛风中性粒细胞的关系、通过调控自治疗痛风,3个方面做一综述。

  • 标签: 痛风 自噬 中性粒细胞
  • 简介:摘要目的探讨放射诱导多倍结肠癌细胞的凋亡和自。方法采用14 Gy剂量的X射线处理SW1116细胞,分别在放射处理后的第3天、第5天、第7天、第10天及第25天观察细胞的形态变化,分别记为A组、B组、C组、D组和E组;在第5天、第25天用流式细胞术检测细胞倍性、细胞凋亡的变化;采用Western blot检测细胞周期、凋亡和自相关蛋白的表达。结果经14 Gy处理后,SW1116细胞出现多倍化并伴随细胞体积增大,细胞发生凋亡和自。B组多倍体细胞亚群(DNA含量>4 N)比例[(57.50±2.33)%]和凋亡细胞亚群比例[(14.63±1.90)% ]均高于未放射组细胞[(1.90±0.17)%、(7.57±1.42)%],差异有统计学意义(P<0.05)。B组细胞周期相关蛋白周期素B1、细胞分裂周期基因2(cdc 2)表达上调,凋亡抵抗相关蛋白存活蛋白表达上调,自相关蛋白自微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,自特异性底物选择性自接头蛋白(p62)蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结肠癌多倍体细胞可能通过上调细胞周期相关蛋白、抗凋亡相关蛋白和激活自,来维持多倍体细胞存活并发生去倍化增殖,参与多倍体细胞的放射抵抗性和治疗后肿瘤的复发。

  • 标签: 多倍体 自噬 凋亡 SW1116
  • 简介:摘要目的研究产气荚膜梭的检验方法。方法分析其生态、生物学性状、致病性与免疫性、微生物学检验等。结论要提高产气荚膜梭的检出率,要在多个环节上加以重视,严格按照操作规程,才能提高检出率,有效地治疗厌氧菌引起的化脓性炎症,使患者早日康复。

  • 标签: 产气荚膜梭茵 检验
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  • 简介:摘要目的对芪颗粒的急性毒性进行研究。方法对受试药物的半数致死量及最大耐受量进行测定。结果连续观察7d,无一只死亡,饮食饮水皮毛活动精神状态无异常,给药当天大小便有褐色稍粘现象,体重呈正常增长趋势,未出现任何毒性反应。结论经急性毒性研究芪颗粒的临床用药安全可靠。

  • 标签: 芪茵颗粒 急性毒性 药理实验
  • 简介:摘要自是细胞由溶酶体降解细胞内蛋白和细胞器的过程。破坏正常细胞自的过程可以促进诱导肿瘤的发生,近期的研究结果表明自可以保持细胞的健康状态,进而抑制肿瘤的发生。自作为细胞的基本生理过程,其功能状态直接影响着肿瘤的发生与治疗,鉴于现有的肿瘤治疗方法大多是激活自的过程,所以进一步研究自及其调节机制对提供新的肿瘤预防和治疗手段显得异常重要。

  • 标签: 细胞自噬 肿瘤发生 细胞代谢 应激反应
  • 简介:血细胞综合征(Hemophagocyticsyn-drome,简称HS)是一组从细胞学角度提出的综合病征。有1979年Risdall等首次报告一组病毒相关HS(VAHS)以后,又陆续报告了细菌相关HS(BAHS),肿瘤相关HS,家族性红细胞淋巴组织增生症,免疫、原虫及真菌相关HS等。其主要临床特征以高热、肝脾肿大、淋巴结肿大及血细胞减少,肝功能和凝

  • 标签: 噬血细胞综合征 肿瘤相关 噬红细胞 巨噬细胞 浆细胞岛 VAHS
  • 简介:摘要登革病毒(dengue virus,DENV)在胞内复制、宿主间传播和机体内致病机制等方面均受到细胞自的影响,本文依据国内外最新研究进展以DENV与细胞自的关系为重点展开综述。自是一种真核生物普遍具备的、用于应对外界压力和维持细胞内稳态的程序性蛋白降解途径,其在保护细胞免受病毒等外源病原体侵染的机制中发挥重要作用。但是自在DENV的复制过程中发挥了相反的作用。自不仅为病毒复制提供了复制场所,而且为其提供能量来源,细胞自还参与了部分DENV致病过程。总之,自有助于DENV的复制。

  • 标签: 自噬 登革病毒 脂滴 病毒复制
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  • 简介:是溶酶体降解途径之一,细胞利用自维持着胞内大分子和细胞器的循环利用。自的功能主要是在营养缺乏状态下维持着细胞代谢的平衡以及在环境压力下清除损伤的细胞器以利于细胞的存活。如今,自又显示出其抑制肿瘤的作用。自的缺失经常伴随着肿瘤的发生,比如在乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌中出现自调节基因beclin1的缺失,而beclin1基因敲除的小鼠更表现出癌变倾向。自是怎样抑制肿瘤发生的是当前生命科学界最感兴趣的课题之一,到目前为止,人们已发现细胞自发机制(涉及染色完整性和稳定性的保护)和非细胞自发机制(涉及坏死和炎症的抑制)参与其中。在治疗过程中,自的作用也非常复杂,一方面,由于肿瘤细胞能够依赖自功能来缓解由药物和射线诱导的压力而利于自身存活,所以,在化疗和放疗的同时应用自的抑制剂被视为当今癌症治疗的一个新手段,另一方面,诱导自可以维持细胞内蛋白质和细胞器的更新、抑制DNA的损伤和染色的突变并且能限制由坏死引起的炎症而实现细胞的适应性,因而,诱导自可能在癌症的预防中扮演着重要的角色。

  • 标签: 自噬 癌症治疗 细胞死亡 细胞存活
  • 简介:摘要子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是妇女的常见病与多发病,也是妇科领域的研究热点。自是细胞内能量代谢和自我更新机制,在生物发育和维持机体稳态过程中发挥重要作用5。而外泌被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯。最近研究发现EMs患者在位内膜及异位内膜自水平均异于正常内膜组织;EMs患者可能分泌特异性外泌6。自与外泌或许会成为EMs诊断和治疗新的突破口。

  • 标签: 子宫内膜异位症 自噬 外泌体
  • 简介:摘要目的探讨莲保肝颗粒的制备工艺及质量控制方法。方法采用水提醇沉方法制成稠膏加入糖粉制成颗粒,用薄层层析法进行定性鉴别。结果制备工艺简单,质量稳定,用薄层层析法进行定性鉴别,方法简便可靠。结论制备工艺合理,薄层层析方法简便、可靠、重现性好,可作为莲保肝颗粒的质量控制方法。

  • 标签: 茵莲保肝颗粒 制备工艺 质量控制 薄层色谱
  • 简介:摘要目的优选芪疏肝颗粒水提取工艺。方法以绿原酸含量、黄芪甲苷含量和浸膏得率为评价指标,以加水倍数,提取时间,提取次数为考察因素,采用单因素实验和正交设计法确定芪疏肝颗粒的最优水提取工艺。结果最优提取工艺为用10倍量的水提取2次,每次1.0h。结论最优提取工艺可行,适合工业化大生产。

  • 标签: 芪茵疏肝颗粒 提取工艺 单因素试验 正交试验
  • 简介:摘要目的比较分析栀黄颗粒剂和栀黄注射剂治疗新生儿黄疸的成本-效果。方法选取我院自2010年10月-2011年12月新生儿黄疸患者100例,随机分成观察组和对照组,两组分别采用栀黄颗粒剂和栀黄注射剂治疗新生儿黄疸,比较两组成本及效果。结果观察组治疗效果比对照组治疗效果好,观察组治疗成本比对照组治疗成本低,观察组安全性比对照组高。结论采用栀黄颗粒剂治疗新生儿黄疸的安全性更好、成本费用更低、治疗效果更好。

  • 标签: 茵栀黄颗粒剂 茵栀黄注射剂 新生儿 黄疸 成本-效果分析
  • 简介:是近年来很热门的研究领域,是真核细胞受饥饿、低氧和药物处理等代谢压力下,通过自身降解,获得能量的一种生理过程,研究表明其与恶性血液病的发生发展密切相关.目前关于自与恶性血液病之间关系的研究尚存在模糊及矛盾的问题.适宜的治疗方法,应当选择性的抑制肿瘤细胞生长,而同时对正常细胞无损伤.因此在探讨自在恶性血液病治疗过程中的作用,如何选择靶向的自相关治疗策略亦尤为重要.本文对自的发生发展、自与恶性血液病的关系以及自在恶性血液病中的可能作用机制进行了归纳和总结.

  • 标签: 自噬 恶性血液病 作用机制
  • 简介:本文综述了细胞自概念的研究现状、自与凋亡、自与肿瘤的关系,展望了自在抗癌药物介导的细胞死亡中发挥的重要作用以及自现象的临床意义。

  • 标签: 自噬 凋亡 肿瘤
  • 简介:摘要目的对成人血细胞综合征患者的骨髓血细胞形态进行分析,并探讨骨髓血细胞形态对成人血细胞综合征预后的临床意义.方法选取30例成人血细胞综合征患者作为研究对象,选取自2011年1月~2015年8月.对这30例成人患者的临床资料进行回顾性的总结分析,并对其实验室检查结果进行分析,观察其骨髓血细胞的形态.根据骨髓血细胞的形态,将这30例患者分为幼稚组和成熟组,对比幼稚组患者和成熟组患者的一般情况、血小板计数、白蛋白水平、死亡率.结果成人血细胞综合征患者的骨髓血细胞的形态呈不规则状,边缘呈撕裂样,包浆颜色较浅,每个细胞中有1~2个细胞核,细胞核形状不一,细胞核染色质呈疏松网状,细胞内吞噬数量不一.成熟组有12例患者,幼稚组有18例患者,与幼稚组相比,成熟组患者的年龄明显更大(P<0.05),其血小板计数、白蛋白水平均明显更低(P<0.05),死亡率明显更高(P<0.05).结论成人血细胞综合征的骨髓血细胞形态具有一定的特异性,骨髓血细胞的形态与成人血细胞综合征的预后效果有关,成熟形态的骨髓血细胞患者的死亡率较之幼稚形态更高.关键词成人血细胞综合征;骨髓血细胞;形态;预后中图分类号R551文献标识码A文章编号1008-6315(2015)12-1097-02

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  • 简介:摘要目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)介导蛋白包涵-自-溶酶体途径(AALP)在百草枯(PQ)诱导多巴胺能神经元自障碍中的作用。方法以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)作为多巴胺能神经元的体外模型,将细胞分为对照组和PQ染毒组(不同浓度PQ处理)。用不同浓度PQ (0、25、50、100、200和400 μmol/L)处理细胞24 h,100 μmol/L PQ处理细胞不同时间(0、12、24、36、48、60和72 h),CCK-8法检测细胞增殖活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞HDAC6、α-突触核蛋白(α-syn)、动力蛋白中链(Dynein IC1/2)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、自相关蛋白(Beclin1)、泛素结合蛋白(p62)和溶酶体相关膜蛋白-1(Lamp-1)的表达水平;免疫荧光双标法观察细胞HDAC6、α-syn、Dynein IC1/2、LC3、Lamp-1及γ-微管蛋白(γ-tubulin)在细胞中的表达及定位。结果PQ呈剂量和时间依赖性抑制SH-SY5Y细胞增殖活性(R=-0.950、-0.960,P<0.05);与对照组比较,PQ染毒组HDAC6、α-syn、p62蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),而自标志蛋白(LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ)、Dynein IC1/2、Beclin1、Lamp-1表达水平降低(P<0.05);与对照组比较,PQ染毒组HDAC6与α-syn荧光信号增强,蛋白表达水平增高,而Dynein IC1/2、LC3、Lamp-1荧光信号减少,蛋白表达水平降低(P<0.05);PQ染毒诱导上述蛋白表达位置也发生变化,细胞质中的HDAC6由弥散状逐渐向细胞核聚集;α-syn、Dynein IC1/2、γ-tubulin、LC3、Lamp-1也逐渐由细胞质向细胞核聚集,并与HDAC6在细胞核共定位于核周区域。结论PQ可能通过诱导HDAC6介导蛋白包涵-自-溶酶体途径障碍引起α-syn异常聚集。

  • 标签: 百草枯 自噬 组蛋白去乙酰化酶6 蛋白包涵体自噬-溶酶体途径