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  • 简介:β-1,4-葡聚糖酶(endo-β-1,4-glucanase,EGase)植物组织生长、开花、果实成熟、器官脱落等方面都具有非常重要作用。本研究克隆个新水稻β-1,4-葡聚糖酶家族基因OsGLU16。序列分析表明该基因位于水稻第8号染色体,cDNA全长1827bp,包含个1572bp开放阅读框,编码523个氨基酸残基。蛋白质同源性分析表明,OsGLU16基因编码蛋白第54~第516个氨基酸残基区域具有高度保守GH9催化结构域。本研究成功构建了OsGLU16基因过表达载体pCaMV35S—OsGLU16-EGFP,并获得了转基因水稻植株。植株表型分析表明,野生型相比,过表达株系表现为株高和穗长显著下降。本研究初步探明了OsGLU16基因过表达转基因水稻植株表型特征,这为进步丰富β-1,4-葡聚糖酶基因家族水稻生长发育过程中作用提供理论基础

  • 标签: β-1 4-葡聚糖内切酶 水稻 OsGLU16 克隆 过表达
  • 简介:以MS为基本培养基,通过调整激素种类浓度等培养条件,按正交试验设计原则,建立了百脉根高频再生体系。结果表明MS+2,4-D2.0mg/L+KT2.0mg/L培养基高效诱导愈伤组织形成,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基高效诱导芽分化,MS+NAA0.1mg/L培养基快速诱导根生成,形成再生植株。通过构建植物表达载体VP60-pBI121,研究根癌农杆菌介导出血病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60基因对百脉根遗传转化影响因素,建立了百脉根快速高效遗传转化体系,结果表明,以农杆菌LBA4404为介导菌株、以下胚轴为外植体,预培养3d,OD600为0.6菌夜中浸染20min,共培养3d,以及300mg/L羧苄青霉素脱菌浓度和50mg/L卡那霉素筛选浓度为最佳转化条件。为利用百脉根生产动物口服型疫苗建立了技术基础

  • 标签: 百脉根(Lotus comiculatus Linn) 高频再生体系 兔出血症病毒(RHDV) 转化
  • 简介:利用自行设计双面紫外杀菌照射装置,探究紫外照射对鲜苹果表面微生物杀菌效果。从5个紫外照射剂量(0.48kJ/m2,0.96kJ/m2,2.88kJ/m2,4.80kJ/m2,9.60kJ/m2)中选出了杀菌效果最佳剂量,并研究该剂量处理后鲜苹果在贮藏期间表面沙门氏菌、霉菌和酵母品质变化。试验以传统含氯杀菌剂0.36%次氯酸钠处理作为对照。结果发现,当双面紫外照射剂量为0.96kJ/m2时杀菌效果达到最佳;0.96kJ/m2双面紫外照射处理初始杀菌效果显著优于0.36%次氯酸钠处理(p〈0.05)。虽然两处理对鲜苹果贮藏期间品质影响没有显著差异,但双面紫外处理贮藏过程中对微生物控制效果不佳。因此,需要紫外杀菌结合其他保鲜方式,对鲜苹果贮藏期间微生物有效控制进行更加深入研究。

  • 标签: 鲜切苹果 沙门氏菌 双面紫外 次氯酸钠
  • 简介:果蔬因其新鲜营养、方便而日益受到消费者青睐,具有广阔发展前景。由微生物引起腐败变质食源性疾病影响鲜果蔬质量安全重要因素,控制鲜果蔬微生物污染能够促进鲜果蔬加工业健康稳定发展,适当气调包装(MAP)技术能有效控制致病微生物繁殖,延长其货架期寿命。本综述介绍气调包装技术以及气调包装对鲜果蔬主要病原菌控制研究进展,同时展望MAP技术果蔬贮藏保鲜方面的发展趋势,为今后鲜产业包装贮藏方面研究提供参考。

  • 标签: 气调包装 鲜切果蔬 微生物
  • 简介:为研究株诺丽生真菌M50抗菌和抗肿瘤生物活性并鉴定此菌株,本研究对实验室保藏诺丽生真菌M50,采用ITSrDNA测序鉴定生真菌M50;以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌为指示细菌,采用滤纸片扩散法对其次生代谢产物抗菌性进行测试;以新暗色柱节孢菌、辣椒疫霉、西瓜枯萎病菌和拟盘多毛孢为指示真菌,采用平板对峙法对其抑菌性进行测试;以肝癌细胞株SMMC-7721、Lewis肺癌、前列腺癌细胞株PC-3为指示癌细胞,采用MTT法对其次生代谢产物抗肿瘤活性进行测试。生真菌M50鉴定为Leptoxyphiumfumago;金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌抑菌圈大小分别为(13.16±0.22)mm、(12.06±0.31)mm、(7.89±0.17)mm和(11.05±0.22)mm;新暗色柱节孢菌、辣椒疫霉、西瓜枯萎病菌和拟盘多毛孢抑制分别为50.00%、18.36%、12.35%和46.91%;肝癌细胞株SMMC-7721、Lewis肺癌、前列腺癌细胞株PC-3半抑制浓度分别为45.46μg/mL、53.33μg/mL、80.48μg/mL。说明生真菌M50具广谱抗菌和抗肿瘤生物活性。本研究为解决药源问题带来新希望和契机,为开发诺丽新产品提供理论依据和技术支撑。

  • 标签: 诺丽 内生真菌 次生代谢产物 抑菌 抗肿瘤
  • 简介:本文介绍用于PCR植物基因组DNA快速制备方法。该方法只需将少量(4~6mg)植物叶片、适量(200μL)TE缓冲液、和粒钨合金珠放入1个2mL离心管,多功能组织细胞研磨器中振动5min破碎组织后,直接取1μLDNA溶液作为PCR模板。本方法具有简单快速、操作效率高、成本低、扩增效果好等优点,特别适合于大量样品基因型检测。

  • 标签: 水稻 DNA制备 PCR
  • 简介:针对多浆旱生植物霸王富含多酚和多糖类物质特点,常规异硫氰酸胍方法基础改进,摸索出霸王叶和根总RNA提取方法。本方法主要通过提取缓冲液中加入4%β-巯基乙醇以去除多酚物质干扰;用2mol/L醋酸钠(pH4.0)、水饱和酚和氯仿:异戊醇(24:1)抽提以去除多糖和蛋白物质。采用方法提取霸王总RNA纯度高、完整性好,电泳条带清晰,OD260/OD280值1.8~2.0之间,其质量完全可以满足进步分子生物学研究要求。

  • 标签: 霸王 多酚 多糖 改进的异硫氰酸胍法 RNA提取
  • 简介:淀粉含量烤烟烟叶醇化品质高低项重要指标,但目前淀粉含量测定方法较多且缺乏系统比较,造成不同测定方法获得结果横向比较性较差。本研究系统地比较连续流动法、碘显色法、费林试剂滴定法、离子色谱法以及高效液相色谱法5常见淀粉含量测定方法红花大金元和K326烟叶淀粉含量测定中应用。使用5方法测定两个醇化初期烟叶样品中淀粉含量,采用标准偏差、回收率以及t检验法,比较烟草行业标准方法连续流动分析法与其他测定方法结果之间差异性。结果表明,行业标准连续流动法相比,费林试剂滴定法以及酶水解—离子色谱法,测定结果偏高,且准确度偏低;酸水解-高效液相色谱法测定结果偏低,虽具有很高精密度,但准确性不高;而碘显色法测定结果不但表现出较高准确性和精密度,且连续流动法测定结果之间不存在显著性差异(t

  • 标签: 烟叶 淀粉 连续流动法 碘显色法
  • 简介:本研究以普通小麦品种‘中国春’染色体组DNA为封阻,用生物素(biotin-16-dUTP)标记大麦染色体组DNA作为探针,通过基因组原位杂交法解析来自杂交组合CS×(CS+Betzes2H)杂种后代X99-13遗传组成,此材料含有42条染色体,其中1条大麦染色体,2条小麦-大麦易位染色体和39条小麦染色体,鉴定为小麦-大麦代换易位系。以小麦第二部分同源群短臂探针psr131进行RFLP分析,结果表明此代换易位系涉及小麦染色体2B和大麦染色体2H代换易位。为进步选育小麦-大麦2H纯合易位系利用其上α-淀粉酶抑制蛋白基因打下了坚实物质基础

  • 标签: 小麦 大麦 代换易位系 GISH RFLP
  • 简介:CRISPR/Cas9(Clusteredregulatoryinterspacedshortpalindromicrepeat/Cas9)基因编辑技术在生命科学领域掀起了场重大技术革命,它比锌指核酸酶(ZFNs)和转录激活因子效应物核酸酶(TALENs)技术更易于操作,而且更高效。CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用到植物科学研究领域中。本实验选取拟南芥MS2为目的基因,构建植物基因编辑系统表达载体,并通过农杆菌介导方法转化拟南芥,从而利用CRISPR/Cas9系统靶向敲除拟南芥MS2基因。对转基因后代MS2测序结果分析表明,获得12个阳性转化植株中,发现5个阳性植株存在基因序列上新碱基插入,由此形成CRISPR/Cas9介导拟南芥MS2突变体。这工作为后续分析其他物种中MS2同源基因功能研究提供参考依据。

  • 标签: 拟南芥 CRISPR/Cas9 MS2 基因敲除
  • 简介:干旱应答元件结合蛋白(dehydrationresponsiveelementbindingprotein,DREB),植物应对干旱、盐碱和低温胁迫反应中起非常重要调控作用利用已知甘蔗栽培DREB2转录因子序列,设计引物,按照同源克隆方法,获得了2个割手密DREB2基因组DNA序列,分别命名为SsDREB2-a和SsDREB2-f(GenBank登录号分别为:KU963272和KU963277)。序列分析结果表明,SsDREB2-a基因序列全长为1578bp,SsDREB2-f基因序列全长为1729bp,2个基因均包含1个内含子和2个外显子。SsDREB2-a和SsDREB2-f基因cDNA序列全长分别为824bp和971bp,均编码262个氨基酸。序列比对分析显示,2个基因序列相似性为96.6%,编码蛋白相似性为98.9%,存在3个氨基酸变异位点。系统进化分析结果显示,割手密DREB2转录因子高粱、牛鞭草、斑茅、玉米等植物DREB2转录因子同源关系最近。基因获得为下步了解DREB2基因表达割手密抵御非生物胁迫能力之间关系奠定基础

  • 标签: 割手密 DREB2 基因克隆 比较分析
  • 简介:植物叶片中含有的多糖、蛋白质和多酚等物质,很大程度会影响总DNA提取质量。本研究以剑叶虾脊兰(Calanthedavidii)和银带虾脊兰(Calantheargenteo-striata)幼嫩叶片为材料,采用改良CTAB法提取总DNA,设置样品重量(0.05g,0.10g,0.20g)、清洗时间(10min,20min,30min)、水浴温度(25℃,60℃,45℃)、水浴时间(2h,1h,0.5h)4因素3水平正交试验,探究不同因素、不同处理对DNA得和纯度影响,以获取最佳提取条件。研究发现剑叶虾脊兰和银带虾脊兰DNA最佳提取条件均为:样品重量0.2g、清洗时间30min、水浴温度60℃、水浴时间2h。该处理剑叶虾脊兰DNA产最高为490.5ng/μL,A260/A280均值为1.953;该处理银带虾脊兰DNA产最高为139.83ng/μL,A260/A280均值为1.967。各因素对剑叶虾脊兰DNA产影响次序为:样品重量>清洗时间>水浴温度>水浴时间;各因素对银带虾脊兰DNA产影响为:样品重量>水浴温度>清洗时间>水浴时间。本研究为虾脊兰属分子生物学研究提供科学依据。

  • 标签: 虾脊兰属植物 正交试验 DNA提取方法优化 分子生物学
  • 简介:影响因子(hnpactfactor),指某期刊前两发表论文统计当年被引用总次数除以该期刊在前两年内发表论文总数。这是个国际上通行传统期刊评价指标,尽管影响因子个相对统计值,但其意义在于克服期刊由于历史长短、载文量多少带来偏差。般说来,影响因子越大,期刊整体学术影响力也越大。

  • 标签: 科技期刊 影响因子 分子植物育种 学术影响力 评价指标 统计值
  • 简介:硒不但是人类和动物必需微量元素,其植物生长发育过程中也起着重要作用。已有研究表明,适当硒处理可以提高植物产量和品质,增强植物抗逆性,但是过高硒会损害植物结构,抑制生长,降低叶绿素含量。但对于硒对植物叶绿体光合作用影响尚未进行过系统总结。本研究通过分析和总结如何通过对叶绿体光合作用实施调控,进而改变作物品质植物抗逆性,为合理、安全施用硒肥提供理论依据,使之可以更好地发挥有益于农业生产和人类健康生物学效应。

  • 标签: 植物 叶绿体 光合作用 抗逆性
  • 简介:根据转录组数据库,通过同源克隆获得结缕草ZjSPL4基因,开放阅读框为1002bp,编码333个氨基酸,该基因具有SBP基因家族保守域。ZjSPL4编码蛋白分子量为36.38163kD,理论等点(pI)为8.79,总平均亲水性为-0.707,属于亲水性蛋白。二级结构预测结果显示ZjSPL4蛋白主要由无规则卷曲(Cc)、α螺旋(Hh)构成。ZjSPL4蛋白与其他植物SBP蛋白总体相似度为53.71%,通过系统进化树分析发现ZjSPL4谷子和二穗短柄草中SPL基因亲缘关系较近。ZjSPL4蛋白亚细胞定位结果显示,其编码蛋白定位于细胞核中。同时日本结缕草ZjSPL4基因受到GA、ABA、蔗糖、低温诱导,说明该基因可能参与结缕草花芽分化以及抗逆反应等过程。因此,克隆分析结缕草ZjSPL4基因可为结缕草花芽分化抗性机制研究以及分子育种提供定参考。

  • 标签: 日本结缕草 ZjSPL4基因 克隆 亚细胞定位 表达分析
  • 简介:本研究以广西野生金线莲为材料,对植株形态和授粉特性进行了观测,研究蒴果成熟度、培养基无机盐浓度、植物生长调节剂有机添加物对无菌播种萌发影响。结果表明:广西金线莲植株外形优美,人工授粉结实达到84.8%;蒴果成熟度对灭菌消毒和种子萌发有显著影响,授粉后生长75~90d蒴果为最佳外植体材料;相较于MS和1/4MS,1/2MS培养基上种子萌发最快;培养基中细胞分裂素6-BA、ZT和KT对种子萌发作用明显,生长素NAA为0.3mg/L时对种子萌发有明显促进作用;添加香蕉汁对种子萌发之后生长具有显著促进效果。

  • 标签: 广西金线莲 种源特性 无菌播种 萌发