简介：摘要近年来数字PCR技术发展迅速，与传统PCR技术相比数字PCR可以对核酸分子进行绝对定量检测，并且具有高准确、高灵敏的优点。广泛应用于分子生物学领域和临床检测上，在癌症早期诊断、产前诊断、感染性疾病的早期检测、器官移植后监测等方面都有着重要的作用。

简介：摘要目的研究荧光定量PCR检测性病的结果。方法抽取2016年1月至2017年1月在我中心就诊的疑似性病患者58例作为研究对象，所有疑似患者均进行荧光定量PCR检测，并与医生根据患者临床症状、体征、流行病史等因素诊断为临床诊断病例进行分析检测结果比较。结果58例疑似患者荧光定量PCR检测结果与临床诊断结果比较无统计学差异（P＞0.05）。结论荧光定量PCR检测性病具有较高的检出率，能够为临床治疗提供诊断依据，具有应用及推广的价值。

简介：摘要本文通过荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR，分别对191例临床粪便样本进行GⅠ、GⅡ型诺如病毒的快速检测，优化反应条件，筛选出最优反应体系，对两种方法的特异性、灵敏性进行检测分析。发现两种方法均可较好的检测出GⅠ、GⅡ型诺如病毒。其中常规RT-PCR阳性样本数为142，检出率为74.34%，最低检出限为103copies/μl，标准曲线均呈现出良好的线性关系，扩增效率分别为101.336%、103.558%；荧光定量RT-PCR的阳性样本为163，检出率为85.34%，最低检出限为102copies/μl，批内、批间重复试验的标准差范围为0.10～0.59，变异系数范围为0.43%～2.84%，重复性良好。两种方法检出率有显著差异（P＜0.05），且对星状病毒、腺病毒以及肠道病毒等均无交叉反应，GⅠ、GⅡ型诺如病毒之间也无交叉反应。荧光定量RT-PCR在灵敏度方面占优，建议在临床检测中应用。

简介：摘要目的指导工作人员在PCR实验室日常工作中更好的了解掌握PCR的操作。

简介：摘要目的探讨分析实时荧光定量PCR检测诊断结核病的应用价值。方法回顾性分析本院收治的80例结核病患者作为本次研究对象。对患者行实时荧光定量检查以及涂片抗酸染色法检查，对比分析两种不同检验诊断方法的结果。结果通过对患者行涂片抗酸染色法检测，发现最终的阳性检测共计为33例41.25％，对患者行实时荧光定量检验，发现最终的阳性检测共计为69例86.25％，实时荧光定量检验诊断方法检出率，相较涂片抗酸染色法检测明显较高，差异显著（P＜0.05）。结论通过对结核病患者行实时荧光定量检验方法诊断，可以取得较高的诊断率，且具有较高的灵敏性和特异度，可以及早为结核病患者的早期治疗提供临床依据，在一定程度上对患者的治疗预后起到直接影响，可以在临床中推广应用。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制措施。方法选取本院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液,每个患者的血液平均分为A、B、C、D组，A组即刻测定，B组室温放置2天测定，C组4℃放置7天测定，D组溶血即刻测定，比较不同的储存时间、温度以及标本是否溶血对乙肝病毒DNA进行荧光定量测量结果的影响。结果未溶血标本与溶血标本相比以及不同储存时间和温度相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论标本溶血、储存时间以及温度对荧光定量PCR检测乙肝大三阳血清标本DNA的结果无影响。

简介：摘要目的通过观察我院收治的对宫颈病变患者的临床诊断资料，探讨分析采用实时荧光PCR检测高危型HPV的价值。方法对我院收治的158例宫颈病变患者患者，进行实时荧光PCR检测，分析检测结果，并与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)的检测结果对比。结果HPV在宫颈癌患者阳性表达率达90%以上,与HC-Ⅱ相比，差异无统计学意义；PCR检测宫颈病变与HC-Ⅱ的检测结果的阳性率分别为74.7%与70.9%，差异无统计学意义（P>0.05）；但两种方法检测HSIL的HPV阳性率明显高于宫颈炎症、湿疣（P<0.01），除LSIL外，其他病变中的PCR检出率均略高于HC-Ⅱ。结论采用实时荧光PCR检测高危型HPV，可用于确诊患者是否患有宫颈癌，提示高危型HPV感染与宫颈病变、宫颈癌发生有一定的相关性，值得进一步推广与应用分析。

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简介：摘要目的研究荧光PCR检测MP-DNA在儿童肺炎诊断中临床应用价值。方法选择132例儿童呼吸道感染患者，以0～4岁为试验组，其他年龄段患者为对照组，分别行荧光PCR检测咽拭子或深部浓痰中MP-DNA，被动凝集法检测患者血清中MP-Ab。结果试验组荧光PCR阳性率为20.3%、被动凝集法阳性率为8.5%；对照组荧光PCR阳性率为20.1%、被动凝集法阳性率为30.1%；经卡方检验，荧光PCR检测两组别χ2=0.19，P>0.05无统计学差异，被动凝集法检测两组别χ2=10.7，P<0.05有统计学差异。结论荧光PCR具有特异性强，灵敏度高的特点，尤其在婴幼儿的肺炎支原体检测中，考虑患者免疫系统发育未全因素，荧光PCR更具优势。

简介：摘要目的探讨实时荧光定量PCR对蕲蛇样品真伪鉴别的准确性。方法采用实时荧光定量PCR法从蕲蛇正品、混伪品中提取DNA,进行引物扩增，并通过Cq值和扩增曲线对样品真伪进行判断。结果3批蕲蛇正品的Cq值均低于30，曲线有明显的指数增长期；2批混伪品无Cq值，曲线为一直线。结论本方法鉴别蕲蛇操作简单，准确率高，重现性好，可行有效。

简介：摘要目的评价美国ABIPrism®7000荧光定量PCR仪的性能及应用价值。方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准，对120份标本(HBV-DNA)进行定量检测，评价该仪器的准确性、精密度、线性范围、参考范围等指标。结果准确度相对偏倚为0.3%-7.2%；批内不精密度变异系数（CV）为6.36%，批间不精密度变异系数（CV）为7.15%；线性范围1.0E+3IU／ml-1.0E+7IU／ml；参考范围＜1.0E+3IU／ml。结论ABIPrism®7000荧光定量PCR仪各项性能指标良好，验证通过。ABIPrism®7000荧光定量PCR仪在病毒基因检测具有高效快捷定量的特点，具有很高的临床价值。

简介：摘要目的自制临床基因扩增实验室HBVDNA检测的室内质控品并对其应用进行评价。方法将试剂盒自带的弱阳性对照品、自制未灭活质控血清、自制灭活质控血清作为室内质控品的选择对象，每天与样本一起检测，连续30天，通过不精密度、L-J质控图，t检验，单因素方差分析来评价三者哪一个更适合基层医院PCR实验室作为室内质控品。结果弱阳性对照品检测结果日间不精密度为7.72%,未灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为2.92%,灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为3.70%；灭活与未灭活自制质控血清配对t检验,t=-0.860，P=0.397，P＞0.05，两组检测结果无显著性差异；对灭活前后两组数据进行单因素方差分析，F=0.901，P=0.346，P＞0.05，两组检测结果均值无显著性差异；SPSS17.0统计学软件绘制弱阳性对照品、未灭活自制血清质控品L-J质控图11月份30天的变化情况。结论自制质控血清无需灭活及其他特殊处理，完全能够满足PCR实验室室内质量控制的需要。

简介：摘要目的对杭州安杰思医学科技有限公司的AFD9600实时荧光定量PCR仪的主要性能指标进行验证，为其检测结果的可靠性提供依据。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》（CNAS-CL36）和美国临床实验室标准化协会（CLSI）制定的验证标准，验证该仪器精密度、正确度、线性以及灵敏度指标。结果AFD9600定量检测HBV-DNA低值和高值的批内精密度CV分别为1.6%和1.3%，其总精密度CV分别为2.1%和1.6%。正确度3个标准物质检测结果的偏倚为-1.05%～3.49%，均在可接受范围内。线性线性相关系数为0.9992，直线回归方程为Y=0.9937X-0.0697。灵敏度对HBV-DNA浓度5×102IU/mL的检出率均为100%，CV分别为5.97%。结论AFD9600的主要性能指标符合实验要求，可满足临床实验室需求。

简介：摘要目的建立TaqManTM实时荧光pcr检测副溶血性弧菌的快速检测方法，为食物中毒快速准确的定性检测及食品中副溶血性弧菌染菌率的调查提供手段。方法通过分析，最终选择tlh基因作为目的基因，在Genebank进行中查找多条TLH基因序列，并利用DNAssist软件进行同源性分析，选取相对保守区段，用BeaconDesigner软件自行设计引物和TaqManTM探针，并利用核酸提取试剂盒煮沸法制备基因组DNA，通过对TaqManTM实时荧光PCR缓冲液浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、引物浓度和探针浓度等反应条件的优化，初步建立副溶血性弧菌的TaqManTM实时荧光PCR快速检测方法。结果选取的tlh基因同源性达到98.9%以上（13/1234），同源性好。通过对各实验条件的优化，得到副溶血性弧菌TaqManTM实时荧光PCR的最佳反应条件，初步建立TaqManTM实时荧光PCR检测副溶血性弧菌的快速检验方法。结论TaqManTM实时荧光PCR检测灵敏度高、特异性好，而且检测周期短，能提高副溶血性弧菌的检出率和检测准确性。

简介：摘要目的探讨新型多重PCR方法对常见呼吸道病毒的诊断应用。方法选取2015年3月至2016年2月于我院就诊的呼吸道病毒感染患者62例，从标本中提取病毒核酸RNA/DNA，通过反转录合成cDNA，对目的基因进行多重PCR扩增，并对扩增产物采取电泳检测。结果对62例呼吸道感染病人的标本进行多重PCR扩增检测后，发现阳性29例，总阳性率46.8%(29/62)，其中以流感病毒为主，占病毒阳性检出48.3%(14/29)，两种或两种以上病毒混合感染5例。结论运用多重PCR技术检测呼吸道病毒感染病例的呼吸道标本，检出多种呼吸道病毒和合并感染情况，初步验证了该多重PCR技术能用于快速检测该类病例的呼吸道标本，能够为急性病毒性呼吸道感染的常规监测、应急处理及临床诊断提供快速检测手段和更多的病原学依据。

简介：摘要目的研究对比荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术与细菌培养法在阴道细菌Ｂ群链球菌（GBS）中的检验效果。方法2014年8月到2015年8月在我院接受阴道细菌检验的孕妇患者3200例,采用PCR检查法与细菌培养法同时进行阴道细菌Ｂ群链球菌（GBS）检查，观察比较两种方法检出率的情况。结果3200例患者中，PCR检测100例阳性，阳性率3.12%，且经省临检中心验收合格；而细菌培养法检测出20例阳性，阳性率0.63%；PCR的阳性检出率明显高于细菌培养法，且差异有统计学意义（P<0.05）。结论应用PCR检验法检验阴道细菌Ｂ群链球菌（GBS），其检出率较高，且准确率达标，值得临床推广应用。

简介：摘要目的研究抵抗素基因-420C/G位点多态性PCR扩增体系优化的实验条件。方法对实验研究中的主要影响因素设置各系列浓度和梯度，进行PCR反应后观察电泳结果，选取最适条件。结果最适温度为55°C，最适Mg2+浓度为1.5mmol/L，最适dNTP浓度为2.5mmol/L。最适扩增循环为35个循环。结论探索抵抗素基因多态性检测的最适实验条件，优化抵抗素基因多态性PCR扩增体系，使其扩增获得最高产物率。

简介：摘要目的验证一套快速提取新生隐球菌DNA的方法及通用的PCR反应体系的应用。方法使用1%SDS和0.2mol/L醋酸锂为裂解液的方法提取21株分离自环境或临床的新生隐球菌DNA，选取7个隐球菌常用基因和6个未知功能的基因设计特异性引物并进行PCR，获得的产物经电泳验证后进一步测序分析。结果该DNA提取方法简便快速，同时提取21株新生隐球菌的DNA仅需30min，用于后续通用PCR反应体系中均能一次性扩增出目的条带，且反应稳定，特异性强，双向测序符合率在99.9%以上。结论本文建立了一种快速高效的新生隐球菌基因提取方法，该PCR反应体系可通用于新生隐球菌各基因的扩增。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用价值。方法随机选取来我院进行治疗的80名患者，采用荧光定量PCR技术在临床微生物检测技术进行检测，观察临床微生物的情况。结果荧光定量PCR技术在临床微生物检测技术的精确度高，特异性好、效果好。结论荧光定量PCR技术在临床微生物检测中敏感度好，精准度高。