新生隐球菌DNA快速提取及通用PCR方法的应用研究-中国期刊网

摘要摘要目的验证一套快速提取新生隐球菌DNA的方法及通用的PCR反应体系的应用。方法使用1%SDS和0.2mol/L醋酸锂为裂解液的方法提取21株分离自环境或临床的新生隐球菌DNA，选取7个隐球菌常用基因和6个未知功能的基因设计特异性引物并进行PCR，获得的产物经电泳验证后进一步测序分析。结果该DNA提取方法简便快速，同时提取21株新生隐球菌的DNA仅需30min，用于后续通用PCR反应体系中均能一次性扩增出目的条带，且反应稳定，特异性强，双向测序符合率在99.9%以上。结论本文建立了一种快速高效的新生隐球菌基因提取方法，该PCR反应体系可通用于新生隐球菌各基因的扩增。

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