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  • 简介:目的:检测抗凝血Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外基因的拷贝数及ATⅢ蛋白的表达量,分析拷贝数与蛋白表达量的相关性。方法:用Primer5.0软件设计外基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH的引物,以倍比稀释的标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,通过标准曲线计算外基因拷贝数;通过显色底物法检测ATⅢ蛋白的含量。结果:依据ATⅢ和GAPDH基因标准曲线方程计算得到的山羊个体间外基因的拷贝数相差很大,最少的为5,最多为25,且不同转基因山羊间ATⅢ表达水平的差别达10倍以上。结论:外基因表达水平在受到拷贝数的影响外,也受到整合位点等其他因素的重要影响。

  • 标签: 抗凝血酶Ⅲ 基因拷贝数 蛋白表达量 转基因 山羊
  • 简介:在真核生物细胞中,许多具有生物活性的多肽和蛋白是在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白切割后激活形成的.弗林蛋白(Furin)就是这个内切蛋白家族重要成员之一,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长医子、血清蛋白、基质金属蛋白、受体、病毒囊膜蛋白和细菌外毒素等.近年来Furin得到了迅速而广泛的研究,本文简介了它的表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染的关系,以及它的抑制剂.

  • 标签: 弗林蛋白酶 前体蛋白 内切蛋白酶
  • 简介:yapsin蛋白是一类糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的天冬氨酸蛋白,能特异性地切割底物中的单或双碱性氨基酸残基位点,起着加工前肽的作用。近年来研究发现,工程菌表达某些外蛋白时发生的降解现象与yapsin蛋白有紧密的关系。概述了yapsin蛋白家族的命名、结构、定位、酶原激活、基因表达及底物特异性和功能。

  • 标签: yapsin蛋白酶 yapsin家族 Yps基因 天冬氨酸蛋白酶
  • 简介:微生物几丁质不仅在生物降解几丁质方面起着重要作用,而且可通过水解病原真菌的细胞壁而有效地抑制其生长.到目前为止,人们已经分离和克隆出了大量的微生物几丁质及其基因.尽管这些几丁质各不相同,但它们却具有类同的蛋白质结构域:信号肽、催化结构域和几丁质结合结构域等.本文着重介绍几丁质的结构和分子特征、表达和调控机理,并且分析了该的应用前景.

  • 标签: 几丁质酶 结构域 降解
  • 简介:本文评述了工程抗体的研究现状和抗体在防化医学研究中的应用。抗体库技术的出现使抗体的研究呈现了新的生机。不仅使不具备细胞工程实验条件的实验室能够制备抗体,而且实验周期大大缩短,比杂交瘤技术提供多20倍的结合性抗体作为潜在的抗体,使抗体更易获得。抗体库技术能够容易地评价编码抗体的基因,因而可以在分子水平上认识和改造抗体。噬菌体抗体库可以不经免疫即可制备抗体的特点,使通过人性噬菌体抗体库生产的抗体能够直接用于临床治疗。随着工程抗体研究的不断深入,新颖实用的抗体将会被应用于包括军事医学在内的多种领域中。

  • 标签: 工程抗体酶 噬菌体抗体库 催化活性
  • 简介:端粒在细胞中的主要生物学功能是通过其逆转录活性复制和延长端粒DNA来稳定染色体端粒DNA的长度.近年有关端粒与肿瘤关系的研究进展表明,在肿瘤细胞中端粒还参与了对肿瘤细胞的凋亡和基因组稳定的调控过程.与端粒的多重生物学活性相对应,肿瘤细胞中也存在复杂的端粒调控网络.通过蛋白质-蛋白质相互作用在翻译后水平对端粒活性及功能进行调控,则是目前研究端粒调控机制的热点之一.

  • 标签: 端粒酶 调控机制 蛋白质相互作用
  • 简介:端粒是真核细胞染色体末端的特有结构,是由端粒结合蛋白和一段重复序列的端粒DNA组成的一个高度精密的复合体,在维持染色体末端稳定性,避免染色体被核酸降解等方面起着重要的作用。端粒的长度、结构及组织形式受多种端粒结合因子的调控。由于端粒的重要性,在哺乳动物细胞里,端粒的长度或端粒结构变化与癌症发生及细胞衰老有密切的关系。由于末端复制问题的存在,随着细胞分裂次数的增加,端粒不断缩短,细胞不可避免的走向衰老或凋亡。由于在细胞分裂过程中端粒长度的不断缩短与细胞分裂代数增加具有相关性,即端粒长度反应了细胞的分裂次数,因此有人将端粒形象的比喻为生物时钟。在90%的癌细胞中,端粒被重新激活,以此来维持端粒的长度,使细胞走向永生化。简要综述了端粒、端粒及端粒结合蛋白的最新研究进展。

  • 标签: 端粒 端粒酶 端粒结合蛋白
  • 简介:人参皂苷为人参主要的药理活性组成部分,通过水解二醇系人参皂苷的糖苷配基是制备稀有人参皂的常用方法。法转化因其底物高度专一、条件温和、副产物少等潜在优势而被作为结构修饰和生理研究的主要技术手段。本文主要对糖苷转化人参皂苷研究进展进行了综述,为其工业化生产高活性皂苷提供理论依据。

  • 标签: 人参皂苷人参皂苷糖苷酶微生物转化
  • 简介:蔗糖磷酸合成(sucrosephosphatesynthase,SPS)是高等植物体内控制蔗糖合成的关键之一,它主要通过异构调节和磷酸化修饰在水平调节蔗糖合成。本文简要介绍SPS家族的成员、SPS蛋白上的3个磷酸化位点,以及SPS的生物学功能、SPS与磷酸蔗糖磷酸的关系等。

  • 标签: 蔗糖磷酸合成酶 磷酸化位点 14—3—3蛋白 磷酸蔗糖磷酸酶
  • 简介:近年来,端粒作为真核细胞染色体末端的保护染色体免受核酸降解的特殊的DNA重复结构,成为现代生物学的研究热点。端粒与基因表达调控、细胞生长、肿瘤发生、衰老有着密切的关系。端粒维持过程中有2类重要的蛋白,即端粒相关蛋白和端粒。端粒,特别是其催化亚基hTERT,在端粒延长过程中起着不可替代的作用,与细胞永生化和癌变密切相关。近年来,靶向端粒的肿瘤治疗在逆转录抑制剂尤其是反义核酸和免疫治疗方面都取得了突破性的进展。肿瘤干细胞在肿瘤的发生发展过程中起重要作用,将很有希望成为未来靶向端粒的肿瘤治疗的一个重要靶标。

  • 标签: 端粒 端粒酶 肿瘤治疗 免疫治疗 寡核苷酸 肿瘤干细胞
  • 简介:天冬氨酸蛋白是主要的蛋白水解之一,广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白的结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白的结构,典型的植物天冬氨酸蛋白的加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能。

  • 标签: 天冬氨酸蛋白酶 结构与分类 加工机制 胁迫反应 有性生殖与衰老
  • 简介:目的:为进一步研究CLP(coactosin-likeprotein)与5’-脂氧合、肌动蛋白的相互作用机制及功能,开展CLP克隆表达、分离纯化研究,以得到高纯度的CLP,并对其生物化学特性进行分析测定。方法:从人的胎肝cDNA文库中经PCR扩增得到CLP基因,克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中并获得高效表达,经过GlutathioneSepharose4B亲和层析和Su-perdex75分子筛纯化,得到高纯度的CLP;在此基础上进行SDS-PAGE、动态光散射和分析型超速离心等实验,并进一步分析实验结果。结果:CLP在溶液中主要以单体形式呈现;CLP的摩擦率为1.909,证实该蛋白质具有线性化趋势存在的可能性,且线性化程度较高。结论:实验结果揭示了CLP作为线性化蛋白质的可能性,为进一步搭建CLP和丝状肌动蛋白的作用模型奠定了一定的数据基础。

  • 标签: 人源CLP 表达 纯化 生化特性
  • 简介:利用植物表达系统生产外蛋白是一个有吸引力的廉价生产系统,它有可能替代外蛋白的发酵生产系统。本文对分子农业的意义、植物表达外蛋白的影响因素和植物生产外蛋白质的研究进展等方面作了论述

  • 标签: 分子农业 基因表达 异源蛋白
  • 简介:本文对培养20天后葛仙米不同氯化钙浓度下的三种活性进行对比发现,超氧化物歧化(SOD)活性随着钙离子浓度的升高而降低,多酚氧化(PPO)活性随着钙离子浓度的升高而降低。苯丙氨酸转氨酶(PAL)在较低钙浓度下表现出较高的活性,而在较高的钙浓度下活性较低。

  • 标签: 葛仙米 钙浓度 超氧化物歧化酶 多酚氧化酶 苯丙氨酸转氨酶
  • 简介:丝状真菌,俗称霉菌,在食品工业中被用于生产多种生物和有机酸。近年来,人们发现丝状真菌具有分泌量大、表达的蛋白有天然活性等特点,非常适合作为同源和异重组蛋白的表达宿主,因此被广泛研究和探讨。简要综述了以黑曲霉为代表的几种常被用作蛋白表达宿主的丝状真菌的特点、应用中的主要问题和基本解决方案,以及近年关于丝状真菌表达系统的最佳培养条件和发酵条件的研究进展。

  • 标签: 丝状真菌 黑曲霉 异源表达
  • 简介:乳酸克鲁维酵母已成功地应用于多种异蛋白的表达生产之中。与其他酵母相比,乳酸克鲁维酵母具有许多优点,如超强的分泌能力,良好的大规模发酵特性、食品安全的级别及整合表达能力等,其作为宿主系统表达药用蛋白也已显示出巨大的潜力。从不同的菌属、遗传工程和分子生物学技术(如启动子、表达载体)等方面简要综述了乳酸克鲁维酵母作为蛋白表达宿主系统的优势。

  • 标签: 乳酸克鲁维酵母 异源重组蛋白 生物技术
  • 简介:泛素蛋白体水解途径是蛋白质的选择性降解中一种非常重要的机制,它通过选择性地降解蛋白质控制着体内许多重要的生物学过程。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素蛋白体途径与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生命周期。同时,病毒的某些蛋白也会影响泛素蛋白体途径,以逃避宿主的防御机制。

  • 标签: 泛素 蛋白酶体 干扰素 NF-κB
  • 简介:胆盐水解的特性及生理功能已成为研究热点。我们探讨了国内外关于双歧杆菌中胆盐水解的生化特性、降胆固醇机理及其生理作用几个方面的研究进展,以期对研究双歧杆菌胆盐水解,以及双歧杆菌及其制品的开发利用有一定的指导意义。

  • 标签: 双歧杆菌 胆盐 胆盐水解酶
  • 简介:蜱是一种小型节肢动物,会通过吸入或动物的血传染多种疾病。日本专家最近在蜱体内发现一种可以抑制病原体增殖的这可能有助于开发治疗由蜱引发的感染症的药物。

  • 标签: 日本专家 病原体 增殖 体内 小型节肢动物
  • 简介:目的:分别从土壤和空气中分离纤维素分解菌株,以提高纤维素利用率。方法:将分离得到的菌株进行纯培养,并用刚果红染色,找出能出现透明圈的菌株,测定透明圈直径与菌落直径比,筛选产纤维素的菌株。结果:通过对比,从分离到的6株菌株中选出产纤维素活力高的2株,并对其进行鉴定,初步确定一株为曲霉属真菌,一株为放线菌。结论:本研究为提高纤维素利用率提供了微生物资源,为相关后续研究提供了物质和实验基础。

  • 标签: 纤维素 纤维素酶 菌株筛选 鉴定