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13 个结果
  • 简介:Hybridoma房间在抗体生产率追随者暴露显示增加到张力亢进的条件。然而,内在的机制很好没被理解。在现在的学习,我们假设激活的T房间的原子因素5(NFAT5)/tonicityenhancer绑定蛋白质(TonEBP)工作增加hybridomacells的抗体生产率。NFAT5是osmosensitive哺乳动物的抄写因素。然而,它在没在张力亢进的周围被洗的各种各样的器官的无所不在的表示建议NFAT5可以也在等渗的条件下面调整细胞生长和功能。在这研究,我们由西方的污点分析在hybridoma房间检验了表示ofNFAT5,并且发现它在张力亢进的媒介显著地增加了。为了推进,在hybridoma房间定义NFAT5的功能,RNA干扰技术习惯于down在SGB-8房间(一根hybridoma房间线)调整NFAT5的表示。在等渗的媒介,hybridoma房间的抗体生产率被NFAT5while的down规定减少细胞增殖没被影响。这里介绍的结果表明那NFAT5不仅在hybridoma房间在渗透的压力反应小径起一个重要作用而且为最佳的抗体生产率是必要的。

  • 标签: 杂交瘤细胞 单克隆抗体产率 RNA干扰 NFAT5转录因子 减量调节
  • 简介:RNaseMRPRNA是处理的RNasemitochondrialRNA(MRP)的RNA子单元涉及处理事件的多重细胞的RNA的酶建筑群。RNaseMRPRNA基因(RMRP)上的变化引起后退地继承的发展混乱,软骨头发发育不全(CHH)。遗传型(RMRP变化)的关系,RNaseMRPcomplex的RNA处理缺乏,和CHH和另外的骨胳的发育异常的显型还有待于被探索。

  • 标签: 核糖核酸酶线粒体加工 RNASE MRP RNA 遗传病 软骨-毛发发育不全
  • 简介:在不到10年里自从它的开始,RNA干扰(RNAi)在生物医学的科学上有非凡的影响。RNAi被表明了到影响众多生物并且疾病小径。RNAi技术的开发和采纳是丰富的从基本loss-of-function工具,到药品的目标确认的染色体宽的屏蔽图书馆和治疗学的开发。然而,RNAiis的分子的机制理解远非完全。这简短评论的目的是在阐明加亮关键成就导致RNA的silencing建筑群并且到的生化学机制为这块地构画出主要挑战。

  • 标签: RNA诱导沉默复合物 生物化学机制 致活 RNA干扰 SIRNA
  • 简介:Inordertostudythefunctionalstructureofthetranscriptionterminatorsandthemechanismoftemination,asurveyofthechromatinstructure,includingthelocationofDNaseIhypersensitivesitesandthenucleosomearrangement,ofyeastADH1andFLPterminatorswasmade.TheresultsshowthatthereisnorelationshipbetweenthefunctionoftheterminatorsandtheexistenceofDNaseIhypersensitivesites.However,itisfoundthatthereisalwaysanucleosmoeattheimmediateupstreamofthetranscriptionalterminationsites.Asacontrol,thechromatinstructuresofthepBR322DNAfragmentsontheyeastshuttervectorsarealsoinvestigatedatthesametime.TherandomnucleosomearrangementonthebacterialDNAinyesastagreeswiththepublishedreports.Anewhypothesis,aboutthemechanismoftranscriptionalterminationisputforwardandthereasonofdifferentnucleosomearrengementontheDNAswhichareoriginallyfromdifferentspeciesinyeastisdiscussed.

  • 标签: 酵母 RNA聚合酶Ⅱ 转录终止点 染色质结构
  • 简介:比期望,非编码的RNA(ncRNA)基因才是更众多的。然而,与计算算法或生物实验识别ncRNAs仍然是一项困难的任务。最近的报告建议了ncRNAs可以也出现在表示顺序标签(EST的)数据库。不过,内部遗传因子的EST几乎没收到很少注意并且糟糕由于他们的低丰富被注解。这里,我们为从人的EST发现ncRNA基因开发了计算策略。我们首先收集了位于的EST内部遗传因子的区域并且别让详细注解。内部遗传因子的区域被划分成非重叠的50-nt窗口,从UCSC数据库获得的PhastCons分数被分到这些窗口。我们使有超过0.8的PhastCons分数并且有至少三支持EST充当种子的窗户保存。相应于种子的EST的每簇被装配进长contig。我们使用了二个标准从这些contigs为ncRNA抄本屏蔽:第一是最长预言的开的读物框架是不到300nt,第二是可能的Pol-II倡导者在contigs在上游或下游的2,000nt以内存在。作为结果,118新奇ncRNA基因从人的低丰富EST被识别。七个随机选择的候选人,六在由RT-PCR出现的人的2BS房间被抄录。我们的工作证明EST为检测新奇ncRNA基因是“隐藏的财富”。

  • 标签: NCRNA EST 计算机识别 标志序列 RT-PCR
  • 简介:Inordertostudythefunctionalstructureofthetranscriptionterminatorsandthemechanismoftermination,asurveyofthechromatinstructure,includingthelocationofDNaseIhypersensitivesitesandthenucleosomearrangement,ofyeastADH1andFLPterminatorswasmade.TheresultsshowthatthereisnorelationshipbetweenthefunctionoftheterminatorsandtheexistenceofDNaseIhypersensitivesites.However,itisfoundthatthereisalwaysanucleosomeattheimmediateupstreamofthetranscrip-tionalterminationsites.Asacontrol,thechromatinstructuresofthepBR322DNAfragmentsontheyeastshuttervectorsarealsoinvestigatedatthesametime.TherandomnucleosomearrangementonthebacterialDNAinyeastagreeswiththepublishedreports.Anewhypothesis,aboutthemechanismoftranscriptionalterminationisputforwardandthereasonofdifferentnucleosomearrangementontheDNAswhichareori-ginallyfromdifferentspeciesinyeastisdiscussed.

  • 标签: Ohromatin terminater nuclecsome pesition yeast.
  • 简介:我们以前报导了人的ACAT1基因通过从染色体抄录的二不连续的RNA处理的interchromosomal生产妄想的mRNA1和7。妄想的mRNA把AUG1397-1399和GGC1274-1276用作翻译开始codons分别地,与在人的房间是确实地在场的后者生产正常50-kDaACAT1和新奇酶地活跃的56-kDaisoform,包括人的导出单核白血球的巨噬细胞。在这个工作,我们报导位于GGC1274-1276codon的附近的RNA第二等的结构为56-kDaisoform的生产被要求。三预言的茎环(nt1255-1268,1286-1342和1355-1384)的效果被transfecting表示plasmids个别地测试进包含的房间野类型,删除或变异的茎环序列连接了到一个部分ACAT18月开的读物框架(ORF)或到另外的基因的ORF。表示模式被西方的污点分析监视。我们发现从染色体7的在上游的stem-loop1255-1268和从染色体1的下游的stem-loop1286-1342为56-kDaisoform的生产被需要,而从染色体1的最后stem-loop1355-1384是非必需的。用有一个稳定的发卡的monocistronic和bicistronic向量的实验的结果证明从GGC1274-1276codon的那翻译开始被一个内部核糖体入口地点(怒火)调停。进一步的实验表明从GGC1274-1276codon的那翻译开始要求在上游的组成AU的RNA第二等的结构和下游地GC富有的结构。这个机械学的工作为人的ACAT1抄本的妄想的性质的生物意义提供进一步的支持。

  • 标签: 核糖核酸 染色体区域 核糖核酸二级结构 内部核糖体进入点
  • 简介:Thebindingofnuclearproteinspreparedfrommouseerythroidtissueindifferentdevelopmentalstagestothe5'-flankingregulatoryelementsofhumanβ-globingene,twonegativecontrolregions(NCR1,-610to-490bp;NCR2,-338,to-233bp),wasidentified.TwostagespecificproteinfactorscorrespondingtoembryonicandfetalstageswerefoundtobecapableofbindingtoNCR2.Thesedataprovidedevidencethatthecisactingelementsofthe5'-flankingregionmightbeinvolvedinthedevelopmentalcontrolofβ-globingeneandNCR2mightberesponsibleinartforthesilenceofβ-glolbingeneintheembryonicandfetalstages.

  • 标签: 人β-珠蛋白基因 反向控制区 基因表达 5'侧调控元件 发育期 鼠核蛋白
  • 简介:MicroRNAs(miRNA)指导在基因表示的一个重要角色在植物为到环境条件的发展进程和回答要求了的顺序特定的posttranscriptional基因silencing玩。然而,很少对transcriptional和miRNA表示的posttranscriptional规定被知道。Histoneacetylation在染色质改变起一个重要作用并且为基因激活被要求。由在Arabidopsis的异种分析miRNAs和相应主要miRNAs的子集的累积,我们显示出那histoneacetyltransferaseGCN5(一般控制非镇压的protein5)在miRNA上有一般压抑的效果生产,当它为一个子集的表示被要求时(例如压力可诱导)MIRNA基因。在miRNA生产的GCN5的一般否定功能多半通过象DICERLIKE1(DCL1)那样的miRNA机械基因的间接压抑被完成,有锯齿(SE),偏下性的LEAVES1(HYL1)和ARGONAUTE1(AGO1)。染色质immunoprecipitation试金表明GCN5指向到MIRNA基因的一个子集并且为在这些loci的histoneH3离氨酸14的acetylation被要求。而且,由trichostatin的histonedeacetylation的抑制一个处理或在histonedeacetylase,基因异种损害了某些miRNAs的累积。这些数据一起建议ArabidopsisGCN5在transcriptional和posttranscriptional层次防碍miRNA小径,histoneacetylation/deacetylation是涉及miRNA的规定的epigenetic机制生产。

  • 标签: 组蛋白乙酰转移酶 MIRNA 拟南芥 通路 干扰
  • 简介:Xenopusorganizerspecificgenenogginpossessesnearlyallthecharacteresticpropertiesoftheactionoforganizertospecifytheembryonicbodyacis.Toanalyzehowthematernalinheritedfactorscontrolitsexpressionpattern,weclonedthe5'regulatoryregionofnoggingene.The1.5kbupstreamsequensecoulddirectreportergenetoexpressinvivoanddatafromdeletionanalysisindicatedthata229basepairfragmetisessentialforactivatingnogginexpression.WefurtherdemonstratedthattheresponseelementswithinthisregulatoryregionwereindeedunderthecontrolofgrowthfactoractivinandWntsignalingpathwaycomponents.

  • 标签: 爪蟾 组织基因 NOGGIN 调节区 5'旁侧区 克隆
  • 简介:流行性感冒的所有已知的子类型A病毒在野水鸟被维持,这些病毒的自然水库。流行性感冒A病毒被孤立从许多有改变病态和死亡率的动物种类。更重要地,流行性感冒A病毒与潜在地致命的结果在人引起呼吸疾病。在人的本地或全球的爆发被过量住院和死亡典型地描绘。在1997,H5N1子类型的高度病原的鸟的流行性感冒病毒在传给人的香港出现了,导致由鸟的流行性感冒病毒感染的人的死亡的首先记录的盒子。在越南,印度尼西亚,和泰国在家禽在2003年7月开始的新爆发,和高度病原的鸟的H5N1流行性感冒病毒后来在整个亚洲并且进欧洲和非洲传播了。这些病毒继续与高死亡率感染人并且引起隐约可见的世界范围的担心流行。而且,H5N1病毒爆发在整个亚洲在家禽工业上有破坏效果。因为H5N1病毒爆发看起来从南部的中国发源,我们这里在中国检验H5N1流行性感冒病毒,与他们的生物性质上的一个重音。

  • 标签: 甲型流感病毒 H5N1型 生物学特性 高致病性禽流感 H5N1禽流感病毒 H5N1亚型
  • 简介:Thenuclearmatrixattachmentregions(MARs)andthebindingnuclearmatrixproteinsinthe5'-flankingcisactingelementsofthehumanε-globingenehavebeenexamined.UsinginvitroDNA-matrixbindingassay,ithasbeenshownthatthepositivestage-specificregulatoryelement(ε-PREII,-446bp--419bp)upstreamofthisgenecouldspecificallyassociatewiththenuclearmatrixfromK562cells,indicatingthatε-PREIImaybeanerythroidspecificfacultativeMAR.IngelmobilityshiftassayandSouthwesternblottingassay,anerythroid-specificnuclearmatrixprotein(ε-NMPk)inK562cellshasbeenrevealedtobindtothispositiveregulatoryelement(ε-PREII).Furthermore,wedemonstratedthatthesilencer(-392bp--177bp)upstreamofthehumanε-globingenecouldassociatewiththenuclearmatricesfromK562,HELandRajicells.Inaddition,thenuclearmatrixproteinspreparedfromthesethreecelllinescouldalsobindtothissilencer,suggestingthatthissilencerelementmightbeaconstitutivenuclearmatrixattachmentregion(constitutiveMAR).Ourresultsdemonstratedthatthenuclearmatrixandnuclearmatrixproteinsmightplayanimportantroleintheregulationofthehumanε-globingeneexpression.

  • 标签: 核基质蛋白 K562细胞 结合区 人ε珠蛋白基因 基因表达 分子调节机制
  • 简介:Thenon-classicalHLAclassIantigenHLA-GisanimmunemodulatorwhichinhibitsthefunctionsofTcells,NKcells,andtheDendriticcells(DC).Asaresult,HLA-Gexpressioninmalignantcellsmayprovidethemwithamechanismtoescapetheimmunesurveillance.Inmelanoma,HLA-Gantigenexpressionhasbeenfoundin30%ofsurgicallyremovedlesionsbutinlessthan1%ofestablishedcelllines.OnepossiblemechanismunderlyingthedifferentialHLAGexpressioninvivoandinvitroisthattheHLA-Ggeneisepigeneticallyrepressedinmelanomacellsinvitro.Totestthishypothesis,wetreatedtheHLA-GnegativemelanomacelllineOCM-1AwiththeDNAmethyltransferaseinhibitor5-aza-2'-deoxycytidine(5-AC)andanalyzedwhetherHLA-Gexpressioncanberestored.OurdatastronglysuggestthatHLA-GissilencedasaresultofCpGhypermethylationwithina5'regulatoryregionencompassing220bpupstreamofthestartcodon.Aftertreatment,HLA-GmRNAexpressionwasdramaticallyincreased.WesternblotandflowcytometryshowedthatHLA-Gproteinwasinduced.Interestingly,HLA-Gcellsurfaceexpressiononthe5-ACtreatedOCM-1AcellsismuchlessthanthatontheHLA-GpositiveJEG-3cellswhileasimilaramountoftotalHLA-Gwasobserved.Possiblemechanismsforthedifferencewereanalyzedinthestudysuchascellcold-treatment,peptideloadingandantigenprocessingmachinerycomponents(APM)aswellasβ2microglobulin(β2-m)expression.DatarevealedthattheAPMcomponentcalreticulinmightbeinvolvedinthelowerHLA-GsurfaceexpressiononOCM-1Acells.Takentogether,ourresultsindicatedthatDNAmethylationisanimportantepigeneticmechanismbywhichHLA-Gantigenexpressionismodulatedinmelanomacellsinvitro.Furthermore,tothefirsttime,wehypothesizedthatthedeficiencyofcalreticulinmightbeinvolvedinthelowHLA-Gsurfaceexpressiononthe5-ACtreatedOCM-lAcells.

  • 标签: 感应现象 HLA-G 基因表达 黑色素瘤 肿瘤细胞 OCM-1A