简介:摘要目的探究可溶性PD-L1分子在结核性胸腔积液中的表达特性及其生物学意义。方法选取86例于2016年6月~2017年6月至本院呼吸科诊治的胸腔积液患者,按照积液性质将其分为A组(结核性胸腔积液,30例)、B组(恶性胸腔积液,38例)、C组(非结核、非恶性胸腔积液,18例)。观察并记录三组患者的临床资料与胸腔积液,采用ELISA法检测患者胸腔积液sPD-L1水平,FCM法检测胸腔积液中CD4+T细胞、CD8+T细胞的表达以及PD-1在CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD14+单核细胞的表达和PD-L1在CD14+单核细胞的表达。患者ROC曲线分析sPD-L1在结核性胸腔积液中的诊断价值。结果A组sPD-L1含量以及CD8+细胞比例、PD-L1在CD14+单核细胞表达比例均明显高于B、C两组,比较差异具有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果表明,单因素分析A组胸腔积液sPD-L1的诊断敏感度为82.6%,特异度为82.9%。结论不同病因所造成的胸腔积液微环境具有不同的免疫功能状态,sPD-L1分子可对此作出有效反应,因此可被广泛用于结核性胸腔积液的临床诊断。
简介:背景和目的体细胞突变可能使肿瘤细胞具有编码"异己"免疫原性抗原的能力。由此推测,对由于错配修复缺陷所致大量体细胞突变的肿瘤,免疫检查点阻滞治疗可能有效。方法我们在41例进展期转移癌患者(有或没有错配修复缺陷)中对pembrolizumab[针对程序性死亡受体1(PD-1)的免疫检测点抑制剂]的临床疗效进行2期临床研究。患者分为错配修复基因缺陷结直肠癌患者组(dMMR)、错配修复基因正常结直肠癌患者组(pMMR)和错配修复基因缺陷非结直肠癌患者组,所有患者均采用Pembrolizumab静脉注射(10mg/kg,每14天重复一次)。观察终点是免疫反应率和20周的免疫相关肿瘤无进展生存率。结果结直肠癌dMMR组的客观反应率和免疫相关肿瘤无进展生存率分别为40%(4/10)和78%(7/9),而结直肠癌pMMR组分别为0%(0/18)和11%(2/18)。截至统计时,dMMR组未达无进展生存和总生存,而pMMR组则分别为2.2和5.0个月(疾病进展或死亡风险比0.10,P〈0.001;死亡风险比0.22,P=0.05)。非结直肠癌dMMR组的结果和结直肠癌dMMR组类似,其免疫相关客观反应率和无进展生存率分别为71%(5/7)和67%(4/6)。全基因组外显子测序显示dMMR肿瘤平均检测到1782个体细胞突变,而pMMR肿瘤仅有73个突变(P=0.007),且体细胞突变高载荷的肿瘤患者无进展生存期相对较长(P=0.02)。结论本研究表明,错配修复状态可以预测免疫检查点阻滞药物pembrolizumab的治疗效果。
简介:摘要目的构建肿瘤相关抗原表皮生长因子受体特异性嵌合抗原受体(EGFR-CAR)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体双修饰慢病毒载体表达系统。方法人PD-L1-Fc蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、亚克隆筛选高分泌PD-L1特异性抗体的稳定杂交瘤,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测抗体特异性,流式细胞术(FACS)鉴定对PD-1配受体封阻性能,Fortebio测定抗体亲和力,抗体全长测序,经保留鼠源CRD1、CRD2和CRD3人源化改造后构建单链抗体(single-chain variable fragment,scFv);人EGFR单克隆抗体杂交瘤系,经5′RACE技术扩增其轻链和重链可变区(VL和VH)基因,构建scFv,克隆至真核载体pcDNA3.1表达鉴定。基因合成EGFR-CAR(引入CD137协同信号胞内功能域)与PD-L1-scFv借助2A序列连接,克隆入慢病毒pLVX-EF1a-IRES-ZsGreen1表达载体,使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)共同转染293T细胞,获得包装病毒,感染293V细胞,FACS测定CAR膜表达,ELISA检测CAR感染293V细胞培养上清中PD-L1-scFv表达情况,转染激活人外周血T细胞,验证CAR膜表达。结果获得PD-L1抗体11E3,具备高度配受体封阻性能,经人源化改造后,亲和力稳定(2.67×10-10 mol/L),EGFR-scFv获得有效表达。进一步构建了EGFR-CAR和PD-L1双修饰慢病毒分泌型CAR(CTC0537-1)及膜表达型CAR(CTC0537-2),其病毒感染293V细胞阳性率为10%。CTZ0431-1感染293V细胞后,细胞膜表面表达EGFR-scFv,检测培养上清存在PD-L1-ScFv;CTZ0431-2感染293V细胞后,细胞膜表面EGFR-scFv和PD-L1-scFv有效表达,双表达病毒感染活化T细胞的CAR表达率为39.3%。结论成功构建了EGFR-CAR和PD-L1-scFv双表达慢病毒载体,EGFR-CAR中度结合亲和力,此为EGFR靶向和PD-L1抗体双修饰CAR-T细胞的实体瘤治疗研究提供了关键工具。
简介:Trimetallicpalladium-copper-cobaltnanoparticlessupportedonreducedgrapheneoxide(PdCuCo/RGO)withdifferentmolarratiosofPd,CuandCocanbesynthesizedbyfacilechemicalreductionwithNaBH4asreductantandcetrimoniumbromideasstabilizer.Themorphology,structureandcompositionoftheas-synthesizedcatalystsarecharacterizedbytransmissionelectronmicroscopy,X-raydiffractionandXrayphotoelectronspectroscopy.Thecyclicvoltammetryandchronoamperometryareutilizedtoinvestigatetheelectrochemicalactivitiesandstabilitiesoftheas-obtainedcatalysts.TheresultsdemonstratethatthePdCuCo/RGOcatalystshowssuperiorcatalyticactivityandstabilityformethanolelectrooxidationinalkalinemediacomparedwithPdCu/RGO,PdCo/RGO,andPd/RGOcatalysts.ThesefindingssuggestthatthePdCuCo/RGOcatalystpossessesagreatpotentialasapromisinganodecatalystfordirectmethanolfuelcells.
简介:背景:协同刺激分子的异常表达与肿瘤细胞免疫逃逸关系密切。程序性死亡受体-1(PD-1)是重要的负性协同刺激分子,与相关配体结合后可诱导并维持肿瘤细胞的免疫耐受,从而促进肿瘤的发生、发展。目的:探讨结直肠癌患者外周血PD-1的表达及其临床意义。方法:选取2015年3月—2015年9月苏州大学附属第一医院的88例结直肠癌患者,以16名健康志愿者作为对照。采用ELISA法检测血清可溶性PD-1(sPD-1)含量,流式细胞术检测外周血CD3+T细胞上PD-1的表达。结果:结直肠癌患者外周血sPD-1含量和CD3+T细胞上PD-1阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05),且sPD-1含量与肿瘤分化程度、淋巴结转移和Dukes分期相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄和肿瘤部位无关(P>0.05)。结论:结直肠癌患者外周血PD-1高表达,且与肿瘤分期、转移呈正相关。检测PD-1有助于估计病情的进展,有望成为新的肿瘤标记物或抗肿瘤靶点。
简介:摘要免疫治疗,尤其是程序性死亡受体1(PD-1)和(或)程序性死亡配体1(PD-L1)免疫检查点抑制剂,重塑了肿瘤治疗模式,在包括非小细胞肺癌(NSCLC)在内的多种肿瘤治疗中部分患者均获得了显著的临床获益。如何筛选PD-1和(或)PD-L1抑制剂潜在获益人群成为免疫治疗时代面临的新挑战。NSCLC中PD-L1蛋白表达水平与PD-1和(或)PD-L1抑制剂疗效呈正相关,是重要的预测标志物之一。明确PD-L1检测的临床意义和检测时机,在PD-L1检测步骤、结果判读和质量控制等各个环节实现PD-L1检测的规范化和标准化,对提高检测的准确性和降低室间差异具有重要意义。针对PD-L1检测的实际问题,在结合文献、专家经验和委员会成员内部讨论基础上,最终达成此共识,以期规范PD-L1检测,为临床医师提供准确可靠的治疗依据以及给予临床检测一定的指导。必须指出的是,鉴于PD-L1检测客观复杂因素的存在以及国内PD-L1检测尚处于临床应用初期,此专家共识尚存在不足之处,期待未来有更多的研究和实践数据进一步完善。
简介:Praseodymium(Pr)wasimpregnatedtoCeO2-ZrO2solidsolutionbyanimpregnationmethod.Theas-obtainedPrmodifiedCeO2-ZrO2wasimpregnatedwith1wt.%Pdtopreparethecatalysts.ThestructureandreducibilityofthefreshandhydrothermallyagedcatalystswerecharacterizedbyX-raydiffraction(XRD),Raman,X-rayphotoelectronspectroscopy(XPS),COchemisorptionandH2temperature-programmedreduction(H2-TPR).Theoxygenstoragecapacity(OSC)wasevaluatedwithCOservingasprobegas.EffectsofimpregnatedPronthestructureandoxygenstoragecapacityofcatalystswereinvestigated.TheresultsshowedthattheagedPr-impregnatedsampleshadmuchhigherOSCandbetterreducibilitythantheunmodifiedones.TheschemeofstructuralevolutionsofthecatalystswithandwithoutPrwasalsoestablished.PartialoftheimpregnatedPrdiffusedintothebulkofCeO2-ZrO2duringageing,whichinhibitedthesintering,andincreasedtheamountofoxygenvacanciesinCeO2-ZrO2support.Furthermore,thoseimpregnatedPrspecieswhichcoveredonthesurfaceofthesupportobstructedthestrongmetal-supportinteractionbetweenPdandCesoastoreducetheencapsulationofPdaswellasthebackspill-overoftheoxygenduringthecatalyticprocess.
简介:摘要目的通过体外药物代谢动力学(PK)/药物效应动力学(PD)研究,比较国产和原研替加环素对细菌的抗菌与杀菌效果。方法利用体外PK自动模拟系统PASS400模拟不同剂量替加环素给药方案(100 mg,1次/d;50 mg,12 h/d;100 mg,12 h/d),观察国产与原研替加环素对大肠埃希菌标准株(ATCC25922)、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌标准株(ATCC BAA-1706)和多重耐药鲍曼不动杆菌临床菌株(AB-16703)时间杀菌曲线以及相关PD参数。应用GraphPad Prism 7统计软件对数据进行分析。结果在模拟不同给药剂量PK条件下,国产与原研替加环素具有相似的抗菌效果,但均表现较弱的抗菌效果。两者的时间杀菌曲线几乎重叠,最大杀菌量均<2 log,在24 h内,细菌都恢复生长到细菌的生长平台期。在PD参数比较中,原研与国产替加环素(100 mg,1次/12 h)对大肠埃希菌ATCC25922最大杀菌量分别为(-1.101±0.147)lg CFU/mL和(-1.105±0.208)lg CFU/mL;对肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1706最大杀菌量分别为(-1.999±0.187)lg CFU/mL和(-1.865±0.066)lg CFU/mL;对鲍曼不动杆菌AB-16703最大杀菌量分别为(-0.240±0.209)lg CFU/mL和(-0.230±0.187)lg CFU/mL。不同给药方案下,两种药物对三种菌的最大杀菌量、细菌再生至初始菌量时间、24 h杀菌量和杀菌与恢复生长曲线与空白对照曲线面积差比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论替加环素在体外模拟人体药物代谢过程条件下不能表现出良好的抗菌活性;原研与国产替加环素体外PK/PD效果相似。
简介:Pt(Ⅱ)andPd(Ⅱ)complexeswith2',3',4',5,7-pentahydroxy-flavoneweresynthesizedandcharacterizedbyelementalanalysis,molarconductance,IR,1HNMR,TG-DTA,UV-Visspectroscopictechniques,andfluorescenceanalysis.Thescavengingeffectonthesuperoxideradical(O-2)andtheinhibitoryeffectonlipidperoxideswerealsoinvestigated.Boththeligandandthecomplexesexhibitscavengingeffectonsuperoxideradicals,andtheeffectofthecomplexesisgreaterthanthatoftheligand.ThePt(Ⅱ)complexexhibitsthestrongestscavengingefficiency.BothPt(Ⅱ)andPd(Ⅱ)complexeshavetheinhibitoryeffectonlipidperoxides,andtheeffectofthecomplexesisgreaterthanthatoftheligand,butthePt(Ⅱ)complexhasahigheffectofpromotinglipidperoxides.