简介:摘要探讨p62蛋白在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的表达情况。采用横断面研究,选择2011年12月至2013年5月上海市同济大学附属同济医院诊治的60例肺腺癌患者组织标本进行石蜡包埋和组织芯片制作,采用免疫组织化学技术(immunohistochemistry,IHC)检测肺腺癌患者癌组织和癌旁组织中p62的表达,分析p62表达与肺腺癌患者临床病理特征及生存预后的关系;同时以随机抽样的方式选取6例肺腺癌癌组织和癌旁组织通过蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)检测p62蛋白并进行灰度值分析。收集2018年4月至2019年10月初诊的肺腺癌住院患者术前检查标本,以及健康体检者血浆标本,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测肺腺癌患者和健康体检者血浆中p62的表达情况。IHC结果显示癌组织中的p62阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=5.593,P<0.001);同样,WB结果显示癌组织p62蛋白表达明显高于癌旁组织差异有统计学相关(t=2.238,P=0.049)。p62表达与肺腺癌患者肿瘤大小、临床病理分期及有无淋巴结转移差异有统计学相关(均P<0.05),p62高表达的肺腺癌患者总生存期差于p62低表达患者(95%CI为0.238~0.870,P=0.028),提示p62高表达与肺腺癌患者不良预后有关。肺腺癌患者血浆中的p62蛋白水平显著高于健康对照组,差异具有统计学意义(t=8.533,P<0.001),受试者工作特征曲线下面积为0.835(95%CI为0.779~0.891,P<0.001),明显高于CEA、CA125、CA153等单项传统指标,四项指标联合检测诊断效能则最高。p62在癌组织和血清中均呈高表达状态,与肺腺癌患者不良预后和总生存期相关。
简介:摘要目的观察微小RNA(miR)-142-3p靶向CD133对肝癌细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响。方法选取郑州大学第二附属医院2017年6月至2019年12月手术切除的肝癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁组织和肿瘤组织miR-142-3p表达水平。采用慢病毒在MHCC97H肝癌细胞建立miR-142-3p过表达和对照细胞系(miR-142-3p组和对照组),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞侵袭;采用软琼脂克隆形成实验分析两组细胞干细胞特性;生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-142-3p靶基因;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组增殖、侵袭和干细胞标志物细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、CD133和Nanog蛋白表达水平,组间比较采用t检验。结果miR-142-3p组细胞miR-142-3p表达水平(0.41±0.12)显著低于癌旁组织miR-142-3p表达水平(1.06±0.25),差异有统计学意义(t=3.081,P<0.05)。miR-142-3p组细胞吸光度(A)值(1.63±0.20)低于对照组细胞A值(2.13±0.22),差异有统计学意义(t=2.918,P<0.05)。miR-142-3p组细胞EdU染色阳性率[(30.48±5.12)%]低于对照组细胞EdU染色阳性率[(87.89±7.28)%],差异有统计学意义(t=3.409,P<0.05)。miR-142-3p组细胞Ki-67蛋白表达水平(0.50±0.13)低于对照组细胞Ki-67表达水平(1.15±0.14),差异有统计学意义(t=2.319,P<0.05)。miR-142-3p组细胞侵袭数量[(67.59±6.01)个]低于对照组细胞侵袭数量[(121.35±6.12)个],差异有统计学意义(t=3.409,P<0.05)。miR-142-3p组细胞MMP-9蛋白表达水平(0.48±0.18)低于对照组细胞MMP-9蛋白表达水平(1.57±0.15),差异有统计学意义(t=2.917,P<0.05)。miR-142-3p组细胞克隆形成率[(31.44±4.51)%]低于对照组细胞克隆形成率[(57.68±7.19)%],差异有统计学意义(t=5.103,P<0.05)。miR-142-3p组细胞Nanog蛋白表达水平(0.51±0.14)低于对照组细胞Nanog蛋白表达水平(1.36±0.17),差异有统计学意义(t=2.514,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示CD133是miR-142-3p的靶基因。miR-142-3p组细胞CD133蛋白表达水平(0.43±0.11)低于对照组细胞CD133蛋白表达水平(1.15±0.13),差异有统计学意义(t=2.514,P<0.05)。结论miR-142-3p通过靶向调控CD133表达水平调节着肝癌细胞增殖、迁移和干细胞特性。
简介:摘要目的分析血清高尔基体蛋白73(GP73)和血清自噬相关蛋白p62水平对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者短期预后的临床价值及预测差异。方法回顾性分析本院2018年10月- 2020年4月收治的HBV相关ACLF患者32例的临床资料(A组),选择同期乙型肝炎肝硬化患者65例(其中Child-Pugh A级为B组34例、Child-Pugh B/C级为C组31例),另选同期健康体检者30名为对照组(D组)。测定四组入选者血清GP73与p62水平,对ACLF组患者随访3个月以分析患者预后情况;并比较死亡和生存患者入院时血清GP73与p62的水平。对数据进行单因素方差分析、独立样本t检验、Pearson相关性分析;采用受试者操作特征曲线(ROC)分析GP73与p62水平对生存患者的预测价值。结果A、B、C、D四组GP73水平分别为(284.30±70.55)ng/ml、(125.33±20.57)ng/ml、(159.82±31.20)ng/ml、(45.46±10.22)ng/ml;p62水平分别为(1.30±0.35)ng/ml、(2.88±0.58)ng/ml、(2.02±0.54)ng/ml、(4.68±1.03)ng/ml。GP73检测值A组显著高于其他三组(P < 0.05),D组显著低于其他三组(P < 0.05),C组显著高于B组(P < 0.05)。p62检测值A组显著低于其他三组(P < 0.05),D组显著高于其他三组(P < 0.05),B组略高于C组,差异有统计学意义(P < 0.05)。GP73与p62呈现负相关关系(r = -0.695,P < 0.001)。ACLF组中生存患者GP73水平显著低于死亡患者[(212.17±22.47)ng/ml与(340.08±32.91)ng/ml,t = 12.493,P < 0.05];p62水平显著高于死亡患者[(1.46±0.28)ng/ml与(1.18±0.35)ng/ml,t = 2.445, P < 0.05]。据ROC曲线分析结果显示:GP73的曲线下面积(AUC)为0.865、p62的AUC为0.750,两项联合AUC为0.968。结论GP73与p62均对HBV相关ACLF患者近期预后具有一定预测价值,但两项指标联合预测价值更高。
简介:摘要目的探讨自噬相关基因Beclin-1、LC3和p62在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及意义。方法回顾性分析2015年1月至2016年12月解放军陆军第八十一集团军医院接受手术治疗的112例原发性ESCC患者的临床资料。免疫组织化学法检测112例ESCC组织及31例癌旁正常食管黏膜组织中Beclin-1、p62和LC3蛋白的表达情况,分析3种自噬相关标志物在ESCC中的表达及其与患者临床病理特征的关系。结果112例ESCC组织中Beclin-1、LC3和p62阳性表达率分别为32.14%(36/112)、37.50%(42/112)和63.39%(71/112),31例癌旁正常食管黏膜阳性表达率分别为61.29%(19/31)、64.52%(20/31)和32.26%(10/31),差异均有统计学意义(χ2值分别为8.715、7.216、9.584,均P<0.01)。Beclin-1、LC3在ESCC中的阳性表达率均低于癌旁正常食管黏膜,p62在ESCC中的阳性表达率则高于癌旁正常食管黏膜。Beclin-1表达与ESCC患者组织学分级、肿瘤浸润深度、TNM分期、是否存在淋巴结转移均有关(均P<0.05);LC3表达与ESCC患者肿瘤浸润深度、TNM分期均有关(均P<0.01);p62表达与ESCC患者是否存在淋巴结转移有关(P<0.01)。在ESCC中,LC3与Beclin-1的表达呈正相关(r=0.731,P=0.001),而与p62的表达呈负相关(r=-0.215,P=0.023)。结论自噬在ESCC的发生、发展中发挥一定作用,联合检测自噬相关基因Beclin-1、p62和LC3可辅助临床诊断并指导后续综合治疗。
简介:无
简介:AbstractBackground:The mortality rate among patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC) has improved significantly with the advent of chemoradiotherapy strategies. However, distant metastasis remains problematic. Tumor-specific reactivity in cancer patients has been detected exclusively in CD39+ T cells, particularly in CD39+CD103+ T cells. Circulating cancer-specific T cells are important for protecting against metastasis. This study aimed to evaluate the predictive value of circulating CD39+CD8+ T cells for metastasis in patients with NPC.Methods:We performed a cross-sectional, longitudinal study of 55 patients with newly diagnosed NPC of stage III-IVa. All patients were initially treated with standard combined chemoradiotherapy. Blood samples were obtained from 24 patients before and at 1 month and 6 months after treatment. T cell expression of CD39 and CD103, together with the markers of T cell exhaustion programmed death-1 (PD-1)/T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3 (Tim-3) and markers of cell differentiation CD27/CC-chemokine receptor 7/CD45RA, was examined by flow cytometry. The Wilcoxon rank-sum test analysis was used to analyze the differences between two groups. Kaplan-Meier analysis was used for analysis of progression-free survival (PFS).Results:The expression of circulating CD39+CD8+ and CD39+CD103+ CD8+ T cells was significantly higher in patients without distant metastasis (CD39+CD8+: 6.52% [1.24%, 12.58%] vs. 2.41% [0.58%, 5.31%], Z=-2.073, P=0.038 and CD39+CD103+ CD8+: 0.72% [0.26%, 2.05%] vs. 0.26% [0.12%, 0.64%], Z=-2.313, P = 0.021). Most CD39+ T cells did not express PD-1 or Tim-3. Patients with high expression of CD39+CD103+CD8+ T cells had better PFS than patients with low expression (log rank value = 4.854, P = 0.028). CD39+CD8+ T cells were significantly elevated at 1-month post-treatment (10.02% [0.98%, 17.42%] vs. 5.91% [0.61%, 10.23%], Z = -2.943, P = 0.003). The percentage of advanced differentiated CD8+ T cells also increased at 1-month post-treatment compared with pre-treatment (33.10% [21.60%, 43.05%] vs. 21.00% [11.65%, 43.00%], Z =-2.155, P = 0.031). There was a significant correlation between elevated CD39+CD8+ T cells and increased effector memory T cells (intermediate stage: r = 0.469, P = 0.031; advanced stage: r = 0.508, P = 0.019).Conclusions:CD39+CD8+ circulating T cells have preserved effector function, contributing to an improved prognosis and a reduced risk of metastasis among NPC patients. These cells may thus be a useful predictive marker for a better prognosis in patients with NPC.
简介:摘要:调节性T细胞是机体维持自身耐受性的重要组成部分。CD4+CD25+调节性T细胞(以下简称CDT细胞)来源于胸腺,是一具有免疫调节或免疫抑制作用的细胞亚群。它可以通过细胞接触依赖机制和抑制性细胞因子依赖机制来主动抑制自身免疫T细胞的活化,从而维持自身免疫耐受和防止自身免疫疾病的发生。最近研究发现,转录因子Foxp3对于调节性T细胞的发育是一个关键性的转录因子,并且已作为CD4+CD25+调节性T细胞的特异性标志。关键词:调节性T细胞,CDT细胞,转录因子Foxp3,免疫耐受,自身耐受,自身免疫疾病,免疫调节
简介:摘要:P2P借贷在一定程度上满足了经营消费个贷需求和大众理财需求,为金融机构服务个人和小微企业起到了重要补充作用。然而,在现行法律法规和监管缺位的情形下,P2P 借贷平台缺乏有效的客户身份识别手段,存在诸多洗钱风险隐患,给不法分子洗钱提供了新的可能。本文通过对
简介:摘要目的观察慢性氟中毒大鼠肝脏微管相关蛋白1轻链3(LC3)B、P62、Beclin1的蛋白和mRNA表达,探讨自噬在氟中毒肝损伤发病机制中的作用。方法采用成组设计,54只SD大鼠,按照体重(100 ~ 120 g)采用随机数字表法分为9组,每组6只,雌雄各半,分别为对照组(NC组)、低氟组(LF组)、高氟组(HF组)、NC +雷帕霉素(RAP)组、LF + RAP组、HF + RAP组、NC +氯喹(CQ)组、LF + CQ组、HF + CQ组。NC组饮用自来水(氟离子浓度< 0.5 mg/L),LF和HF组分别饮用氟离子浓度为5.0、50.0 mg/L含氟水;NC + RAP、LF + RAP、HF + RAP组分别以相应的饮水饲养3个月后经腹腔每天注射1.5 mg/kg RAP,共10 d;NC + CQ、LF + CQ、HF + CQ组分别以相应的饮水饲养3个月后经腹腔每天注射60 mg/kg CQ,共10 d。采集各组大鼠四肢骨、24 h尿液,检测骨氟、尿氟含量;苏木素-伊红染色法观察肝组织形态学变化;免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法检测肝脏LC3B、P62、Beclin1蛋白和mRNA表达情况。结果染氟后,与NC组比较[(0.03 ± 0.00)mg/kg、(0.34 ± 0.08)mg/L],HF组骨氟[(3.86 ± 0.08)mg/kg]、尿氟含量[(1.11 ± 0.16)mg/L]均较高(P均< 0.05)。光镜下,NC组大鼠肝组织小叶结构清晰,肝索排列整齐,细胞结构正常,LF、HF组出现不同程度的肝细胞水肿;给予RAP后,与相应染氟组比较,肝细胞形态未见明显变化;给予CQ后,与相应染氟组比较,可见肝细胞明显水肿,随染氟浓度增加水肿程度加重。与NC组比较,HF组LC3B、Beclin1蛋白表达量较高(P均< 0.05),P62蛋白表达量较低(P < 0.05)。腹腔注射RAP后,与LF组比较,LF + RAP组LC3B、P62蛋白表达量较低(P均< 0.05);与HF组比较,HF + RAP组LC3B、Beclin1蛋白表达量较低(P均< 0.05)。腹腔注射CQ后,与LF组比较,LF + CQ组P62蛋白表达量较高(P < 0.05);与HF组比较,HF + CQ组P62蛋白表达量较高(P < 0.05)。结论早期(3个月)氟摄入可促进大鼠肝细胞自噬,引起肝细胞水肿,RAP有类似作用;CQ可能通过抑制肝细胞自噬而诱导肝脏损伤。
简介:【摘 要】目的:对小儿高热惊厥患者的临床护理方法进行分析。方法:本实验的研究对象为2020年3月-2021年1月我院收治的62例小儿高热惊厥患者,根据双盲法将患者划分为甲组(31例)和乙组(31例)。在两组患者入院后均对其进行急救,甲组患者运用的护理方式为精细化护理,乙组患者运用的护理方式为常规护理,将两组患者护理优良率、各相关指标进行比较,分析小儿高热惊厥患者适宜的护理方式。结果:经比较研究后发现,与乙组患者相比较,甲组患者护理优良率更高,且各相关指标更优,组间差异具有显著性特征(P,0.05)。结论:于小儿高热惊厥患者的临床护理实践中运用精细化护理优势明显,可帮助患者尽快缓解临床症状。故应在小儿高热惊厥患者的护理实践中加大力度运用精细化护理模式。
简介:摘要:目的 观察游离组织瓣修复口腔颌面部缺损的效果。方法 此次研究对象为我院近年来收治的62例口腔颌面部缺损患者,针对患者采用游离组织瓣修复,观察患者所获取的治疗效果。结果 通过实验观察,62例患者中60例患者组织瓣成活,总成活率是96.8%。在这其中,腓骨复合组织瓣的成活率是96.2%,前臂皮瓣的成活率是96.8%,股外侧皮瓣的成活率是100.0%。结论 在口腔颌面部缺损的修复中,前臂皮瓣可以作为首要选择方案,股前外侧皮瓣仅仅在患者出现大面积缺损都情况下予以应用,针对上颌骨和下颌骨缺损可以应用腓骨复合组织瓣予以修复。手术操作后一周对皮瓣加以监测,及时观察患者血管相关危象,同时进行手术探查,是确保游离组织瓣获取更高成活率的关键所在。
简介:摘要目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿外周血CD4-CD8-双阴性T淋巴细胞(DNT)、T淋巴细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞、CD19+B淋巴细胞的变化及临床意义。方法回顾性分析2019年1月至2020年2月上海交通大学附属儿童医院收治的肺炎患儿,年龄段划分为0~3岁、4~7岁、≥8岁,急性期接受外周血T淋巴细胞亚群检测,其中185例MPP患儿为观察组,根据病情分为117例MPP普通组和68例MPP重症组,另外选取69例非MPP肺炎患儿作为对照组。采用流式细胞术分析各组患儿外周血DNT、T淋巴细胞亚群、NK细胞、CD19+B淋巴细胞绝对计数。分析不同年龄段DNT水平。结果1.观察组外周血淋巴细胞CD3+[1.527(1.059,2.348)×109/L]、CD4+[0.771(0.559,1.206)×109/L]、CD8+[0.528(0.343,0.773)×109/L]、CD4+/CD8+[1.570(1.130,1.945)]、CD19+ [0.455(0.285,0.771)×109/L]、DNT[0.168(0.095,0.294)×109/L]均低于对照组[2.116(1.506,3.728)×109/L、1.170(0.685,2.114)×109/L、0.696(0.414,1.226)×109/L、1.780(1.230,2.210)、0.694(0.483,1.343)×109/L、0.235(0.134,0.391)×109/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。2.MPP普通组的外周血淋巴细胞CD3+[1.704(1.215,2.566)×109/L]、CD4+[0.855(0.628,1.267)×109/L]、CD8+[0.582(0.378,0.843)×109/L]、NK[0.269(0.176,0.417)×109/L]、CD19+[0.461(0.317,0.808)×109/L]、DNT[0.180(0.117,0.306)×109/L]均明显高于MPP重症组[1.369(0.831,1.760)×109/L、0.676(0.433,0.924)×109/L、0.495(0.292,0.699)×109/L、0.196(0.112,0.380)×109/L、0.391(0.181,0.730)×109/L、0.143(0.071,0.265)×109/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.急性期,观察组外周血DNT与相同年龄段对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05);观察组中,0~3岁组外周血DNT[0.230(0.125,0.364)×109/L]高于4~7岁组[0.143(0.085,0.233)×109/L]和≥8岁组[0.144(0.078,0.271)×109/L],且在0~3岁组病情越重,指标越低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论急性期,MPP患儿外周血各淋巴细胞亚群变化显著。外周血DNT淋巴细胞绝对计数降低,且病情越重,指标越低。小年龄患儿DNT绝对计数较高。监测外周血DNT对评估MPP免疫功能状态或病情可能有一定价值。
简介:【摘要】目的:探索分析对宫颈癌患者应用蒙西医结合治疗后CD4+/CD8+和中性粒细胞的影响。方法:将
简介:摘要目的分析CD4+CD25+调节性T细胞与原因不明复发性流产的相关性。方法抽取2018年10月到2019年10月枣庄市妇幼保健院收治的原因不明复发性流产患者110例作为研究组,另抽取同期收治的正常行人工流产术的患者80例作为对照组。检测并比较两组患者外周血及蜕膜组织中CD4+CD25+调节性T细胞比例、调节性T细胞特异性调节因子Foxp3和EBi3的mRNA的表达水平、血清炎性因子水平,分析其与原因不明复发性流产的相关性。结果研究组外周血以及蜕膜组织中调节性T细胞比例分别为(4.86±1.13)%、(6.85±1.73)%,低于对照组的(9.31±1.88)%、(11.29±2.04)%,P<0.05。研究组外周血以及蜕膜组织中调节因子Foxp3和EBi3的mRNA表达水平均低于对照组,且外周血中Foxp3和EBi3的mRNA表达水平低于蜕膜组织,P<0.05。研究组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)分别为(9.25±1.67)、(11.47±2.95)、(0.29±0.15)、(7.44±1.35)ng/L,而对照组TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10分别为(1.46±0.53)、(5.74±1.06)、(4.58±0.93)、(16.62±4.34)ng/L,研究组TNF-α、IL-2水平高于对照组,而IL-6、IL-10水平低于对照组(P<0.05)。结论调节性T细胞比例、调节性T细胞因子水平可能与维持妊娠有关,原因不明复发性流产与调节性T细胞降低有一定的相关性。
简介:摘要目的了解γδT细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在HIV感染者/AIDS患者外周血中的表达水平,探讨γδT细胞、CD4+CD25+ Treg在HIV感染/AIDS病情进展中的相关性以及可能的作用机制。方法采用免疫荧光单克隆抗体标记技术、流式细胞术检测AIDS患者12例、HIV中期感染者19例、HIV早期感染者15例、健康体检者30例外周血中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、γδT细胞、CD4+CD25+ Treg的表达水平;采用Pearson分析γδT细胞与CD4+CD25+Treg相关性。结果γδT细胞在AIDS组、HIV感染中期组、HIV感染早期组、健康对照组外周血中的表达(Mean±SD, %)分别为:4.46±1.37、3.59±0.67、3.12±0.33、1.73±0.36,组间比较差异有统计学意义(F=6.091,P=0.018)。CD4+CD25+Treg在AIDS组、HIV感染中期组、HIV感染早期组、健康对照组外周血中的表达(Mean±SD, %)分别为:10.28±1.94、7.37±1.03、6.68±0.58、4.03±0.82,差异有统计学意义(F=13.568,P=0.020)。γδT、CD4+CD25+Treg在4组中的比较,有明显统计学意义,AIDS组>HIV感染中期组>HIV感染早期组>对照组。相关性方面,γδT、CD4+CD25+Treg与CD4+T细胞呈负相关(r分别为-0.982、-0.712, P值分别为0.001、0.002),与CD8+T细胞计数呈正相关(r分别为0.873、0.809, P值分别为0.000、0.000);γδT细胞与CD4+CD25+Treg呈正相关性(r=0.911, P=0.000)。结论HIV感染诱导了γδT细胞、CD4+CD25+Treg的增殖,两者可能参与了机体感染HIV后引起的免疫应答。γδT细胞与CD4+CD25+Treg成正相关,两者可能具有协同作用。