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  • 简介:摘要目的观察不同功率密度低强度脉冲超声(LIPUS)对骨骼肌C2C12成肌细胞脂联素(Adiponectin)及其受体的影响,探讨LIPUS促进C2C12成肌细胞分化的潜在机制。方法将体外培养的C2C12成肌细胞根据有无超声干预或超声干预的功率密度随机分为对照组、U0.1组、U0.3组和U0.5组,对照组接受假LIPUS干预,U0.1组、U0.3组、U0.5组分别接受功率密度为0.1 W/cm2、0.3 W/cm2、0.5 W/cm2的LIPUS干预。干预5 d后,分别采用CCK-8法检测细胞活力,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测脂联素、脂联素受体1(AdipoR1)和T-钙黏蛋白(T-Cadherin)mRNA水平,采用Western blot法检测脂联素、AdipoR1、T-Cadherin、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、活化型-磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)、肌细胞生成蛋白(MYOG)和胚胎肌球蛋白重链(eMHC)的蛋白水平,并对4组细胞肌管的分化能力进行免疫荧光化学检测。结果LIPUS干预5 d后,U0.1、U0.3和U0.5组细胞相对活力明显高于对照组(P<0.01)。U0.3组和U0.5组脂联素、受体AdipoR1和T-Cadherin mRNA水平均显著上调,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。U0.3组和U0.5组脂联素、AdipoR1、T-Cadherin蛋白和AMPK磷酸化水平与对照组比较,均显著增加(P<0.05),且U0.1组和U0.5组均显著低于U0.3组,差异均有统计学意义(P<0.01)。U0.3组和U0.5组C2C12成肌细胞分化指标eMHC、MYOG蛋白水平和C2C12成肌细胞融合指数与对照组比较,均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS可促进C2C12成肌细胞的分化,并以0.3 W/cm2、5 min/d、1 MHz,占空比为20%的LIPUS干预作用最明显,其调控机制可能与C2C12成肌细胞脂联素、受体AdipoR1和T-Cadherin的表达上调和下游AMPK磷酸化水平活化有关。

  • 标签: 低强度脉冲超声波 脂联素 脂联素受体 分化
  • 简介:目的:观察外源给予H2O2C2C12细胞中UII/UT系统表达的影响。方法:培养小鼠肌原细胞C2C12细胞株,应用胎盘蓝染色和测定细胞培养液中LDH的含量检测H2O2细胞损伤的影响,应用放射免疫的方法检测细胞培养液和裂解液中UII的含量,应用RT-PCR法测定C2C12中UTmRNA的表达,应用WesternBlot检测不同浓度H2O2对肌原细胞C2C12中UT蛋白表达的影响。结果:外源给予不同浓度的H2O2,C2C12细胞裂解液中UII的含量各组间无明显差异,但增加了细胞孵育液中UII的含量,10-4M和10-3M时分别增加了83.1%(p〈0.01)和94.5%(P〈0.01)。低浓度H2O2(0.5×10-6M,10-6M,10-5M,10-4M)刺激明显增加了UTmRNA的表达,而高浓度的H2O2(10-3M)刺激反而使UTmRNA的表达降低。高浓度的H2O2(10-6M,10-5M,10-4M,10-3M)刺激使UT蛋白表达分别增加了200.1%、255.6%、111.1%和100.1%(均p〈0.05)。结论:H2O2作为T2DM发病因素之一的活性氧族,可能是T2DM时骨骼肌组织中UII/UT系统表达增加的一个因素。

  • 标签: 尾加压素II G蛋白偶联受体 过氧化氢
  • 简介:摘要目的观察Apelin-13对高铁环境中骨骼肌细胞C2C12细胞铁死亡的影响并探讨其可能的机制。方法C2C12细胞培养在改良Eagle培养基(DMEM)中,实验分为对照组、柠檬酸铁胺(FAC)组、Apelin-13组、Apelin-13+FAC组、铁死亡诱导剂RSL3组和Apelin-13+FAC+RSL3组。细胞活力采用二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测;采用比色法检测细胞内总铁离子和二价铁离子浓度,酶联免疫法检测细胞中谷胱甘肽(GSH)水平,可见分光光度法检测细胞中丙二醛(MDA)水平,化学荧光法检测细胞内活性氧(ROS)水平;透射电镜检测C2C12细胞超微结构。蛋白质印迹分析检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)、铁蛋白重链-1(FTH-1)、血红素加氧酶(HO)-1和核因子E2相关因子-2(Nrf-2)蛋白的表达水平。结果与FAC组比较,FAC+Apelin-13组细胞活力显著增加(光密度值0.52±0.06比0.28±0.04,t=7.837、P=0.007),细胞中GSH的浓度显著增加[(2.41±0.35)μmol/g Pro比(0.91±0.12)μmol/g Pro,t=9.778,P=0.003],细胞中ROS[(22.06±5.79)a.u./mg Pro比(52.71±7.28)a.u./mg Pro,t=8.064,P=0.006]、MDA[(4.63±0.51)mmol/mg Pro比(9.11±0.84)mmol/mg Pro,t=8.642,P=0.006]、总铁离子[(1.53±0.24)μmol/g Pro比(3.17±0.55)μmol/g Pro,t=6.135、P=0.013]和二价铁离子[(0.75±0.08)μmol/g Pro比(1.94±0.36)μmol/g Pro,t=5.068、P=0.027]的水平降低,细胞内铁沉积明显减少。对照组和Apelin-13组线粒体结构清晰,形态正常;FAC组细胞内线粒体出现膜密度增加,膜皱缩及破裂,线粒体内部存在空泡变性,出现明显线粒体损伤,符合铁死亡的形态学特征;与FAC组比较,FAC+Apelin-13组内线粒体损伤情况明显改善。与FAC+Apelin-13组比较,FAC+Apelin-13+RSL3组细胞活力显著降低(光密度值0.23±0.04比0.48±0.06,t=7.642、P=0.007)。与FAC组比较,FAC+Apelin-13组细胞中GPX-4(相对表达水平0.96±0.14比0.31±0.07,t=7.712、P=0.008)和FTH-1(相对表达水平0.57±0.08比0.27±0.05,t=6.944、P=0.011)蛋白的表达水平显著上调,Nrf-2C2C12细胞核中的表达(相对表达水平0.42±0.04比0.19±0.05,t=7.114、P=0.008)及Nrf-2细胞核中表达与Nrf-2总蛋白表达水平的百分比[(58.36±5.24)%比(36.58±5.32)%,t=5.858、P=0.015]以及HO-1的蛋白表达水平(相对表达水平0.49±0.07比0.28±0.05,t=6.472、P=0.012)均显著升高。结论Apelin-13抑制了高铁环境诱导的C2C12细胞铁死亡,其机制可能涉及到Nrf-2/HO-1信号通路。

  • 标签: 肌疾病 铁超负荷 肌少症 信号传导
  • 简介:目的研究血管紧张素II和坎地沙坦对小鼠骨骼肌细胞C2C12)胰岛素敏感性的影响及其机制。方法C2C12诱导分化成熟后,分为对照组(C组)、模型组(M组:AngII)、坎地沙坦低剂量组(Can1组:坎地沙坦0.1μM+AngII)、坎地沙坦中剂量组(Can2组:坎地沙坦1μM+AngII)、坎地沙坦高剂量组(Can3组:坎地沙坦10μM+AngII)。各组细胞给予相应药物及胰岛素处理后,检测2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)的摄取率,并用RT-PCR法和Western印记法分别检测各组细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和胰岛素受体底物分子-1(ISR-1)的mRNA及蛋白表达水平。结果M组摄取2-NBDG较C组明显降低(P〈0.01),而Can3组摄取2-NBDG则较M明显增加(P〈0.05)。M组ISR-1和Akt的mRNA表达较C组明显降低(P〈0.01),Can2组及Can3组ISR-1、PI3K和Atk的mRNA表达较M组明显升高(P〈0.05)。M组p-ISR-1和p-Akt蛋白表达较C组明显降低(P〈0.01),Can2组及Can3组p-ISR-1和p-Akt较M组明显升高(P〈0.05)。结论AngII通过下调胰岛素信号通路中重要因子ISR-1、Akt的mRNA及蛋白表达抑制胰岛素的生物学效应,引起骨骼肌细胞胰岛素抵抗;而坎地沙坦通过抑制AngII的这种作用改善骨骼肌胰岛素抵抗。

  • 标签: 坎地沙坦 血管紧张素II 胰岛素抵抗 胰岛素信号通路
  • 简介:摘要目的探讨紫丁香苷对脂多糖(LPS)诱导肌管细胞萎缩的保护作用及其分子机制。方法诱导C2C12成肌细胞分化为肌管细胞后,按随机数字表法分为空白组、模型组、紫丁香苷组。模型组与紫丁香苷组培养基内加入终浓度为200 ng/ml 的LPS进行干预;紫丁香苷组培养基内同时加入10 μmol/L紫丁香苷干预24 h。采用细胞计数(CCK-8)法检测各组细胞活力,Griess试剂检测细胞上清液NO释放量;ELISA法检测上清液TNF-α水平;Western blot法检测NF-κB、过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(peroxisome proliferators-activated receptors γ1,PPARγ1)、肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)表达情况。结果与模型组比较,10、100 μmol/L紫丁香苷组细胞增殖率[(101.08±8.92)%、(79.53±5.19)%比(69.07±7.16)%]升高(P<0.01或P<0.05),其中10 μmol/L的紫丁香苷效果更佳。与模型组比较,干预6 h紫丁香苷组NO[(2.92±0.33)μmol/L比(3.57±0.41)μmol/L]水平降低(P<0.01),干预24 h紫丁香苷组细胞TNF-α[(2.73±0.29)pg/ml比(4.15±0.29)pg/ml]水平降低(P<0.01),细胞NF-κB[(0.95±0.24)比(1.16±0.28)]蛋白表达降低(P<0.05),MyHC[(0.79±0.15)比(0.70±0.16)]蛋白表达升高(P<0.05)。结论紫丁香苷可抑制LPS诱发的炎症反应,提高肌管细胞活力,拮抗LPS对肌管细胞的损伤作用。

  • 标签: 紫丁香苷 脂多糖类 肌萎缩 炎症 成肌细胞,骨骼肌
  • 简介:ThefirststarsintheearlyUniversewereformedabout400millionyearsafterthebigbang.VerificationoftheexistenceofthesestarsisimportantforourunderstandingoftheevolutionoftheUniverse[1].IthasbeenpredictedthatforPopulation-IIIstellarproductionyields,theabundancesofodd-Zelementsareremarkablydeficientcomparedtotheiradjacenteven-Zelements[2].Astronomersaresearchingforlong-lived,lowmassstarswiththeuniquenucleosyntheticpatternmatchingthepredictedyields[3].

  • 标签: FIRST DIRECT MEASUREMENT
  • 简介:C2C的模式在中国完成了培养用户网络购物习惯的使命,而最终要盈利却不得不绕道B2C。4月17日,易趣网副总裁常琳的晚餐时间是和易趣新平台上的个人大卖家们一起度过的。席间,那些自eBay易趣时代就栖身此处的大卖家们不断地向常琳提出各种吸引卖家进驻的建议。

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  • 简介:对于网络营销,大凡会上网的人都会说:“不就是推销吗?”诚如斯言,营销就是推销,也就是在网络上卖东西。对于如何卖东西,每一个电子商务人又都有自己不同的看法。即使如吾辈从来没有亲自经历过布置店铺.描述宝贝.卖出宝贝等过程的动嘴型人,也会对营销指手划脚,然而大抵无非是这样:说一些再也不能官方的话;讲一些再也不能浅薄的道理;不吝出笔,每一出则洋洋洒洒,不下万言。长此以往,还未亲临商战已著作等身,盆满钵满了。然而,如果没有亲历过那种开店等客人的期待,那种发货等款项的焦急。以及那种做成第一单生意的舒坦,那么,这些所谓的营销仅仅只是充斥版面的无病呻吟。网络营销是一门另类阐述社会关系的学科。如果只是坐在研究室就得出了营销方法。那也只是一些花拳绣腿,不管文字多么考究。语言多么华丽。以下这些文字,来源于身处最前线的淘友们在经验居、个人论坛里面的经验之谈。没有可以抑扬顿挫的音韵,也不适合做深情款款的朗读。这些文字只传递了一个信息:我曾经这么做。现在正在这么做,这么做给我带来了白花花的银子。

  • 标签: 网络营销 电子商务 社会关系 个人论坛 研究室 文字
  • 简介:自2010年在香港上市后,好孩子集团缄121已有大半年,7月20日,好孩子国际控股有限公司突然宣布了上市后的首个重磅消息:全力打造“C2C王国”。这将成为未来10~15年好孩子的核心战略目标。

  • 标签: 好孩子集团 香港上市 C2C 2010年 公司 控股
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  • 简介:本文报道了C6H12O6(NH4)SO4CH5OHHO(CH5OH/HO=0.90)体系在35℃时体系溶解度和饱和溶液的折光指数,并绘出了体系相应的溶度图和饱和溶液的折光指数曲线图。结果表明:所研究的体系为四元体系C6H12O6(NH4)SO4CH5OHHO中的一部分。当溶液中肌醇饱和时,溶度曲线落在约50%的等醇水比面上。当(NH4)SO4在溶液中达到饱和时,出现共饱点。其组成为(NH4)SO4:10%,C6H12O6:2.08%,CH5OH:4475%。同时出现分层,在富醇相随着乙醇浓度的增加,出现肌醇与硫酸铵共饱线。在富水相硫酸铵饱和溶度曲线落在约5%乙醇的等醇水比面上,折光指数曲线由三支组成,其中两条分别与C6H12O6·HO和(NH4)SO4相对应,另外一条线与(NH4)SO4和C6H12O6·HO的共饱线相对应

  • 标签: 三元体系 溶解度 肌醇 硫酸胺 乙醇
  • 简介:网络跨境代购近些年来在电子商务的蓬勃发展的带动下初现规模,逐步发展成为两种主要的代购发展模式,即B2C专业代购网站模式以及C2C职业私人代购模式。由于这两种模式主体的权责不统一,立法规制上不能将其混为一谈。面对新的市场乱象问题,如何对这二者中的法律关系和责任承担进行界定为论文的研究重点,第一部分对于提出的概念作引介性介绍,第二部分分析论证两个模式中买方、代购方、卖方之间分别存在的不同法律关系,第三部分进一步分析三方主体的责任承担问题,第四部分是对这二者法律规制的探究。

  • 标签: 网络跨境代购 两种模式 法律关系 责任承担
  • 简介:The12C+13Csystemhasbeenstudiedextensively,becauseofthesimilarityoftheentrancechanneltotheastrophysicallyimportant12C+12Creaction[1??3].Untilnow,threedifferentmethodshavebeenexploitedtoperformthefusioncrosssectionmeasurementsfor12C+13CundertheCoulombbarrier:(1)measuringtheyieldofcharacteristicrays,(2)thetotal-rayyieldsusingNaIsummingdetectorsand(3)theactivityofthereactionresidue24Na(T1=2=15.0h).Recently,thefusioncrosssectionof12C+13Chasbeenmeasureddownto0.9nbthroughtheactivitymeasurementbyourgroup[4].Althoughthestatisticalmodelcalculationsinallthesethreemethodshavebeenroutinelyusedtoconverttheobservedpartialcrosssectionsintothetotalfusioncrosssections[5],thesystematicuncertaintyinducedbythestatisticalcorrectionshasnotbeenstudiedverywell.

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  • 简介:当前最主要的C2C平台(eBay易趣、淘宝、拍拍、当当宝)在注册、认证,支付、搜索引擎等方面都存在着一定的差异性和相同点,了解这些也许能帮助您更好地选择平台。

  • 标签: 电子商务平台 搜索引擎 差异性 注册 支付