简介:近年来的研究显示泛素-蛋白酶体通路在细胞凋亡调控中发挥了重要的作用.本实验就蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO与经典的凋亡诱导剂足叶乙甙(VP16)对白血病细胞系M-07e及TF-1的联合效应进行了初步研究.应用MTT法及台盼蓝拒染法显示Z-LLL-CHO及VP16联合作用于M-07e及TF-1细胞,可增强两种药物单独的细胞杀伤效应.流式细胞术检测提示单独应用Z-LLL-CHO及VP16均可使S+G2/M期细胞比例增加,两者联合应用导致细胞凋亡峰比例的显著增高.通过对M-07e细胞裂解物做免疫印迹检测,发现在Z-LLL-CHO及VP16单独作用中均导致Bcl-2蛋白被酶解为22kD的片段,而联合作用时Bcl-2的酶解现象具有叠加效应.结论:Z-LLL-CHO与VP16联合作用较单独作用有更强的细胞杀伤及诱导细胞凋亡活性,细胞周期S+G2/M期比例的增加及Bcl-2酶解片段的增加是导致蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO及VP16对白血病细胞系联合效应的可能机制.
简介:本研究建立可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ类(sHLA-Ⅰ)检测方法,并探讨贮存血中sHLA-Ⅰ浓度变化的意义.采用ELISA双抗夹心法定量检测60例正常广东人血清中sHLA-Ⅰ水平和20例献血员成分血中sHLA-Ⅰ含量.结果表明:采用本技术时,可溶性HLA-Ⅰ最低检测限为2.84ng/ml,批内变异系数为5.80%,批间变异系数为9.00%,回收率≥98.57%,广东人sHLA-Ⅰ平均值为(699.54±360.10)ng/ml.贮存28天的RBC和随机供者血小板的sHLA-Ⅰ的浓度明显高于其它成分血,并且与成分血中残存的白细胞数和贮存时间有关.结论:用ELISA法检测可溶性HLA-Ⅰ灵敏、特异、稳定,在临床输血过程中可考虑选择性输注含有不同浓度可溶性HLA-Ⅰ的成分血.
简介:Aim:ToobservetheapoptoticchangesfollowingexposuretoEMPandtoexplorethepossibleinjurymechanisminNIH-3T3fibroblasts.Methods:FollowingNIH-3T3cellswereexposedtoEMP,theproliferationandviabilityofNIH-3T3fibroblastswereestimatedbyhemacytometerandMTTMeasurements.Apoptoticratewasmeasuredbyflowcytometer.TheimnmohistochemicalSPmethodwasusedtodeterminebcl-2,p53.ThepositivelystainedcellswereanalyzedwithCMIAS-Ⅱimageanalysissystematamagnification400.AlldatawereanalyzedbySPSS8.0software.Results:TheproliferationandviabilityofNIH-3T3cellsweremarkedlyinhibitedandsignificantapoptosiswasinducedfollowingexposuretoEMP.EMPcouldincreasethenumberofnon-adherentcells,thehighestratio(33.9%)ofnon-adherentcellsalsooccurredat6h.TheAs70valueofMTTdecreasedimmediatelyat1h,6hfollowingthecellswereexposedascomparedwiththecontrol(P<0.05).Thehighestratioofapoptosiswas15.07%at6h,thendecreasedgradually.Down-regulationofbcl-2andup-regulationofp53wereinducedbyEMP(P<0.05).Conclusions:EMPcouldpromoteapoptosisofNIH-3T3fibroblasts.EMPcouldalsodown-regulatebcl-2levelandup-regulatep53levelinNIH-3T3fibroblasts.Bcl-2andp53genemaytakepartintheprocessofapoptosis.
简介:目的:观察抗氧化剂维生素E对慢性肾衰这残存肾组织和残肾功能的保护作用。方法:在5/6肾切除大鼠慢性肾衰模型上,以假手术大鼠为对照,采用形态计量和生化测定方法,对比分析术后30,60,90,120d给予或不给予维生素E治疗的慢性肾衰大鼠残肾纤维化程度,残肾功能及其活性氧化代谢状况等指标。结果:大鼠术后残存肾小球呈代偿性肥大,肾小球毛细血管代谢性增生的同时,有显著的氧自由基反应亢进,抗氧化能力减弱,肾小球硬化,滤过膜增厚,肾间质纤维化,肾组织羟脯氨酸含量增高,肾功能进行性恶化;而用维生素E治疗的大鼠,氧自由基反应和抗氧化能力趋于正常,肾小球硬化,滤过膜增厚,肾间质纤维化和肾组织羟脯氨酸含量增高的程度显著减轻,肾小球代偿性肥大和肾小球毛细血管代偿性增生的发生后移,肾功能恶化的速度显著减慢。结论:维生素E通过其抗氧化作用,显著抑制5/6肾切除所致慢性肾衰残肾组织纤维化,延缓残肾功能进行性恶化的速度,而对代偿性肾小球肥大和毛细血管增生无明显直接影响。
简介:目的:分析真核表达产物CTL4-Ig对T细胞活化功能的影响。方法:构建并用真核表达系统表达CTLA4-Ig,通过蛋白A亲合柱纯化获得纯品;然后观察CTLA4-Ig对淋巴细胞转化功能及T细胞表面分子CD25表达的影响;用^3H-TdR掺入法研究CTLA4-Ig对混合淋巴细胞反应的影响。结果:CTLA4-Ig抑制PHA对淋巴细胞的转化;同时,抑制PHA刺激的淋巴细胞表面CD25分子的表达,抑制率达53%,与对照相比抑制显著(P<0.05),且这种效应有剂量依赖性;CTLA4-Ig抑制单向混合淋巴细胞反应,抑制率选87.53%,与对照相比亦抑制显著(P<0.05).且效应亦呈剂量依赖性。结论:CTLA4-Ig能有效阻断T细胞的活化,并且阻断效应是通过多种信号途径起作用的。