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  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)干扰后,在人支气管上皮细胞(thehumanbronchialepithelialcells,16HBE)中的表达情况。方法应用real-timePCR方法检验lncRNA-ENST00000414355干扰效果。结果正常16HBE细胞中ENST00000414355干扰48h后,三条阳性序列的实验组ENST00000414355表达均下降,都具有统计学意义P值均<0.0001;在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中ENST00000414355干扰后,第一条阳性序列转染下达到沉默效果,且具有统计学意义P<0.0001;在氯化镉转化16HBE第35代细胞在ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论ENST00000414355在正常16HBE细胞中干扰效果最明显,在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

  • 标签: 实时荧光定量PCR,LncRNA,16HBE
  • 简介:【摘要】:实时荧光定量 PCR 技术是普通聚合酶链式反应技术基础上演变起来,一种灵敏度较高的核算定量技术。与常规 PCR 相比,它的不同之处在于其根据 PCR 产物中莹光信号的强度定量 , 不仅提高了反应的特异性和自动化程度,而且有效解决 PCR 污染等问题,实现了检测质量的飞跃 . 当前已经被广泛应用于医学诊断和环境监测多种领域的研究,本文对实时荧光定量 PCR 的原理,分类以及应用做一系统性综述。

  • 标签: 实时荧光定量 PCR 原理 应用
  • 简介:摘要随着时代的进步,社会的发展,大多数疾病已经可以得到很好的治愈,但是大规模的流感病毒的爆发,仍然困扰着我们,特别是甲型H1N1流感。流感病毒传染性强,变异性强传播速度快,爆发后难以控制,极大的危害了社会的安定和谐,,影响了人们的生活质量。所以及早点了检测发现流感病毒是抑制病毒传播,控制流感病毒爆发程度的最为关键的步骤。现在国内外常用的检测流感病毒的方法主要有血清学检测、核酸扩增法检测、细胞培养法、流感病毒抗原检测法等。但是这些常用的方法耗费大量时间和精力,不适用于流感病毒的快速检查。相反,荧光定量RT-PCR是各种检测方法中最灵敏、最有效、最准确的。所以对于荧光定量RT-PCR检测流感病毒的应用的研究是有很大医学价值。

  • 标签: 荧光定量RT-PCR 检测 流感病毒 应用
  • 简介:摘要探讨乙型肝炎血清标志物和乙型肝炎病毒DNA量之间的关系,分析荧光定量PCR在乙型肝炎检测中的作用。HBVDNA定量是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一,但在指导诊疗时仍需结合血清标记物、肝损害指标乃至HBV基因分型。方法PCR核酸探针杂交法、RELISA、竞争定量PCR、实时荧光定量PCR,本文综述定量检测HBVDNA意义及PCR检测方法。结论实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA是反映HBV复制水平的可靠指标,有助于疾病的诊断及预后判断。

  • 标签: 乙型肝炎病毒 核糖核酸 实时荧光定量PCR
  • 简介:【 摘要 】 目的: 评价实时荧光定量 PCR 在病毒检测中的应用效果 。 方法: 研究我中心 2019年 3月 ~2019年 9月期间纳入的 158例疑似 HFMD患者,研究中使用到的核酸检测仪器选取 ABI-7300进行 FQ-PCR检测,观察并分析 FQ-PCR检测病毒发生情况。 结果: 经检测, 158例疑似 HFMD患者中, FQ-PCR检测的 EV阳性确诊为 115例,阳性率 72.78%,其中 EV71RAN阳性有 109例, CA16PNA检测的阳性 53例;而 ELISA检测出的 EV阳性确诊为 63例,阳性率 39.87%,两者 差异大, P<0.05。 15例 HFMD患者实行 FQ-PCR检测到的 EV阳性 12例,而 ELISA检测 6例阳性数,差异显著, P<0.05。 结论: 实行 FQ-PCR检测对 HFMD病毒检测率提升,值得临床进一步研究。

  • 标签: 病毒检测 实时荧光定量 PCR 应用效果 评价
  • 简介:【摘要】目的 利用实时荧光定量PCR针对乙肝DNA开展检测,分析为检测结果产生影响的各方面因素。  方法 此次研究针对300例病例,且全部确诊为乙型肝炎病毒感染,收治开始和结束时间分别为2021年3月、2022年2月,对患者血液标本开展采集,利用实时荧光定量PCR对其进行检测,分析检测结果。   结果 300例标本中,实时荧光定量PCR诊断乙肝DNA准确260例,占比86.67%;漏诊误诊40例,占比13.33%。实时荧光定量PCR诊断准确率和临床诊断无较大差异(P<0.05)。  结论 在针对乙肝DNA进行检测的过程中,使用实时荧光定量PCR可以产生较高的价值,但是可能会出现误诊等情况,所以需要进行综合预防。

  • 标签: 实时荧光定量PCR 乙肝DNA
  • 简介:摘要:目的 探讨和分析荧光定量 PCR技术在临床微生物检测中的应用价值。方法 采用回顾性分析的方式,在我院 2019年 5月 -10月期间入院接受治疗的患者当中随机选择 75例,统一使用荧光定量 PCR技术进行微生物检测,统计检测结果。结果 这 75例患者当中,共有 70例患者被检测出细菌微生物。分别为沙门氏菌 20例,阳性率为 28.57%。大肠杆菌 40例,阳性率为 57.14%。白色念珠杆菌 10例,阳性率为 14.29%。结论 本次实验研究证明了荧光定量 PCR技术不仅对微生物的检测速度快,而且准确率比较高。在目前有着良好的应用价值,值得在新时期临床诊疗过程中推广使用。

  • 标签: 荧光定量 PCR技术 临床检测 微生物 应用方法
  • 简介:  【摘 要】 目的:采用实时荧光定量 PCR仪检测流感样病例标本中的流感病毒,分析其检测效果。方法:在 2018年 1月至 2019年 12月实验室所收集的 120例流感样病例患者作为本次研究对象,分别采取流感病毒细胞分离检测法和实时荧光定量 PCR检测法,分析其检测结果。结果:实时荧光定量 PCR法检测阳性率明显高于流感病毒细胞分离检测法, P<0.05具有统计学意义。结论:对流感病毒进行检测时可以优先考虑选择实时荧光定量 PCR法,其检出阳性率更高,值得进行推广应用。    【关键词】 实时荧光定量 PCR仪 ;细胞培养 ;流感病毒检测    [Abstract] Objective: to detect influenza virus in influenza like cases by real-time fluorescent quantitative PCR and analyze its detection effect. Methods: 120 cases of influenza like patients collected in the laboratory from January 2018 to December 2019 were selected as the research objects, and influenza virus cell isolation and detection method and real-time fluorescence quantitative PCR detection method were adopted to analyze the detection results. Results: the positive rate of real-time fluorescent quantitative PCR was significantly higher than that of influenza virus cell isolation detection, P < 0.05, with statistical significance. Conclusion: the real-time fluorescent quantitative PCR method can be preferred in the detection of influenza virus, and its positive rate is higher, which is worthy of promotion and application.

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  • 简介:【摘要】目的:探讨在实施流感病毒核酸检测中实时荧光定量PCR检验方式运用可行性。方法:选取2018年1月1日~2020年12月31日,我中心收到的300件流感样病例咽拭子作为研究对象;针对流感病毒核酸利用实时荧光定量PCR完成检测,就获得结果进行分析。结果:对于300件流感样病例咽拭子完成检测后,80件获得流感病毒核酸阳性结果;其中56例属于甲型H1N1病毒,15件属于季节性甲3亚型病毒,6件属于季节性甲1型病毒,2件属于乙型病毒,1件属于丙型病毒。结论:实时荧光定量PCR检验方式有效运用,呈现出有效性以及科学性特点,对于流感病毒核酸检测准确性以及快速性可以做出保证,对于流感病毒流行规律可以进行认真分析,对于公共卫生事件突发可以给予充分预防。

  • 标签: 流感病毒核酸检测 实时荧光定量PCR 诊断结果
  • 简介:【摘要】目的:探究荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用效果。方法:选取我院2021年5月~2022年5月收治的100例住院患者作为研究对象,采集患者的临床标本,并对其进行荧光定量PCR技术检测,分析对微生物检测结果。结果:50份粪便标本中,检测出沙门氏菌有29例,占比58.00%。肠出血大肠杆菌有2例,占比4.00%,溶血性杆菌8例,占比16.00%;在脓液液标本的50份中,金黄色的葡萄杆菌有8例,占比16.00%。选取沙门氏菌、肠出血大肠杆菌、溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌阳性的各4株,检测特异性,结果为特异性100%, 没有假阴性和假阳性检测。结论:在临床微生物检测中实施荧光定量PCR技术干预可提高检测结果准确性,具有较高的灵敏度与特异性,值得推广实施。

  • 标签: 荧光定量PCR技术 临床微生物检测 应用
  • 简介:【摘要】目的 探讨荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用效果。方法2020年1月-2021年12月期间医学研究对象80例为我疾控中心合作医院收治的患者,其中50例取粪便标本,30例取尿液标本,全部样本均采用荧光定性PCR方法测定,并观测微生物参数。结果 荧光定量PCR技术在医学微生物学检验的特异性可以达到100%,且102拷贝/mL核酸样本可以实现最大核酸检出范围。结论 荧光定量PCR技术在微生物学检验中具有很大的特异性和敏感度,而且可以为临床上提供科学的、正确地参考,因此可以采用。

  • 标签: 临床微生物检测 荧光定量PCR技术 特异性 灵敏度
  • 简介:摘要目的评价实时荧光定量检验在结核病患者临床诊断中的应用价值。方法采集我院收治的怀疑为结核病的76例患者痰液标本开展研究,每例患者采集两份痰液标本,1份进行痰涂片抗酸染色检测,1份进行实时荧光定量检验,将病理结果作为金标准,比较两种方法诊断结核病的准确性、特异性、敏感性。结果实时荧光定量检验诊断结核病的准确性、特异性、敏感性均高于痰涂片抗酸染色检测,P<0.05,有统计学意义。结论实时荧光定量检验用于结核病诊断,结果可靠,可有效减少疾病漏诊、误诊。

  • 标签: 实时荧光定量检验 结核病 痰涂片抗酸染色 准确性
  • 简介:目的建立人颗粒溶素(granulysin.GNLY)mRNA荧光定量的检测方法,构建克隆载体pMD18-T-GNLY作为定量模板,在ABI7900HT型实时荧光定量PCR检测仪上通过荧光强度达到一定阈值时的循环数来定量起始模板,来建立实时荧光定量RT-PCR方法,并检测了40名正常健康献血者外周血中GNLY的表达。结果本方法的动态检测范围为10^3~10^9拷贝/μgRNA(r^2≥0.996),内参18srRNA的动态检测范围为10^3~10^8拷贝/μgRNA(r^2≥0.996);低值的批内、批间的重复性分别为10.33%和17.32%,高值的批内、批间的重复性分别为6.41%和8.46%;而40名正常健康人外周血的PBMCs中均有GNLYmRNA的表达,范围为3.12×10^6~4.32×10^7拷贝/μgRNA,均值为(2.0±1.3)×10^7拷贝/μgRNA。结论成功建立了人GNLY基因表达含量的荧光定量检测方法,检测结果可用绝对拷贝数表示,定量准确可靠。GNLYmRNA荧光定量测定方法的建立为研究GNLYmRNA表达水平与感染性疾病免疫机制的关系奠定了基础。

  • 标签: 颗粒溶素 聚合酶链反应 外周血单个核细胞
  • 简介:摘要:目的 比较不同类型肝病患者应用荧光定量PCR法检查血清HBV-DNA的临床结果。方法 选取2020年4月~2021年8月我院收治的276例肝病患者作为研究对象,其中慢性乙型肝炎213例、乙肝后肝硬化37例、原发性肝癌26例;应用荧光定量PCR检测各组的HBV-DNA,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝病毒的血清免疫标志物HBeAg,比较检测结果。结果 肝硬化、原发性肝癌患者的PCR水平明显低于慢性乙型肝炎患者;HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率显著高于HBeAg阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 荧光定量PCR检测肝病患者的血清HBV-DNA,能够直观反映出患者体内的病毒携带以及病毒复制情况,从而为临床评估病情提供依据,值得推广。

  • 标签: 肝病 荧光定量PCR 血清HBV-DNA 临床价值
  • 简介:【摘要】目的:对比两种荧光定量PCR试剂在乙型肝炎病毒(HBV)-DNA检测中的应用价值。方法:采用泰普生物和达安基因两种HBV荧光定量PCR检测试剂盒对收治的20例临床样本进行检测,对两种试剂检测结果的一致性进行分析。结果:两种检测试剂阳性一致性、阴性一致性及总一致性均为100%;两种试剂具有较好的相关性,相关系数r=0.985。结论:泰普生物和达安基因两种HBV荧光定量PCR检测试剂盒在HBV-DNA检测中均能够发挥较高的检测价值,可在临床上推广使用。

  • 标签: 荧光定量PCR试剂 HBV-DNA 试剂盒
  • 简介:摘要:目的:对乙肝病毒核酸荧光定量与乙肝免疫标志物定量检测及肝功能损害程度进行分析和研究。方法:使用实时荧光定量聚合酶链反应来检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸含量,检测后用分辨荧光分析法定量检测五种HBV免疫标志物,之后再使用速率法来检测丙氨酸氨基转移酶以及天冬氨酸氨基转移酶的水平,从这些检测结果分析研究乙肝患者肝功能的损害程度。结果:HBV免疫标志物与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸存在相关联系,与其中的HBsAg、HBeAg呈正相关。而乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸与肝功能损害指标不存在相关性。结论:虽然通过检测乙型肝炎患者HBV免疫标志物能够从HBsAg、HBeAg中反映出乙肝病毒复制的指标之一,但所反映的信息并不能有效的判断乙肝病毒量以及患者肝功能损害的程度。

  • 标签: 乙肝病毒核酸荧光定量 乙肝免疫标志物 定量检测 肝功能
  • 简介:摘要:目的:对实时荧光定量PCR在痰标本中结核分枝杆菌检测中的应用价值进行分析。方法:本次实验对象为结核患者,实验时间集中在2018年9月-2020年9月,共计90例患者参与本次实验中来。本次实验分组依据为结核分枝杆菌检测手段,依据不同检测方法将所选患者分为甲组、乙组及丙组。甲组患者实施实时荧光定量PCR检测,乙组患者实施抗酸染色检测,丙组患者实施改良罗氏培养法检测,对三组患者检验结果进行分析及对比。结果:对本次实验进行系统的分析,甲组患者中共计16例患者检测结果为阳性,乙组患者中共计8例患者检测结果为阳性,丙组患者中共计10例患者检测结果为阳性,分别占总人数比重的53.33%、26.67%及33.33%,三组相关数据之间差异凸显,(p<0.05)。结论:相比抗酸染色检测及改良罗氏培养法检测,实时荧光定量PCR检测在痰标本中结核分枝杆菌检测中的应用效果更加突出,其能够在一定程度上提高检测结果的准确性,而且具有操作简单、等待时间较短等优势,为疾病预防控制中心工作人员开展工作提供了极大的便利。

  • 标签: 痰标本 结核分枝杆菌检测 实时荧光定量PCR