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  • 简介:目的:在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a(+)-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS株,生产重组颗粒(GNLY)。方法:选取含pET28a(+)-GNLY的BL21(DE3)pLysS菌株单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中,控制氧为30%~50%,温度为37℃;在基础培养基内生长4h后,补加以甘油为碳源的补料,继续生长到11h;加入葡萄糖至终浓度为1%,30℃诱导表达6h;收集菌体,纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性,用CFU方法检测其生物学活性。结果:发酵液中最终菌体密度达80g/L;纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%,含量为60mg/L;经鉴定所获重组颗粒素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论:用含重组质粒pET28a(+)-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达系统,可得到具有生物活性的重组颗粒,为大批量生产提供了条件。

  • 标签: 颗粒溶素 分批补料 发酵培养 重组蛋白质
  • 简介:目的建立人颗粒(granulysin.GNLY)mRNA荧光定量的检测方法,构建克隆载体pMD18-T-GNLY作为定量模板,在ABI7900HT型实时荧光定量PCR检测仪上通过荧光强度达到一定阈值时的循环数来定量起始模板,来建立实时荧光定量RT-PCR方法,并检测了40名正常健康献血者外周血中GNLY的表达。结果本方法的动态检测范围为10^3~10^9拷贝/μgRNA(r^2≥0.996),内参18srRNA的动态检测范围为10^3~10^8拷贝/μgRNA(r^2≥0.996);低值的批内、批间的重复性分别为10.33%和17.32%,高值的批内、批间的重复性分别为6.41%和8.46%;而40名正常健康人外周血的PBMCs中均有GNLYmRNA的表达,范围为3.12×10^6~4.32×10^7拷贝/μgRNA,均值为(2.0±1.3)×10^7拷贝/μgRNA。结论成功建立了人GNLY基因表达含量的荧光定量检测方法,检测结果可用绝对拷贝数表示,定量准确可靠。GNLYmRNA荧光定量测定方法的建立为研究GNLYmRNA表达水平与感染性疾病免疫机制的关系奠定了基础。

  • 标签: 颗粒溶素 聚合酶链反应 外周血单个核细胞
  • 简介:摘要目的探讨颗粒在精索静脉曲张(VC)患者精液的表达水平及临床意义。方法选择2016年9月至2017年7月在本院就诊的80例男性不育患者作为观察组,其中45例为原发性VC(VC不育组),35例患者不合并VC(非VC不育组)。同时,本研究选取30例健康男性为可育对照组。检测所有入组精液精子密度、精子活动率、精子正常形态比例以及颗粒的表达水平。结果VC不育患者精浆颗粒的表达水平均显著高于可育对照组;此外,与非VC不育患者相比较,VC不育患者精浆颗粒水平更高;精浆颗粒的表达与精子浓度(r=-0.364,P<0.001)、精子活力(r=-0.397,P<0.001)和精子正常形态(r=-0.441,P<0.001)均呈负相关。结论不育合并VC患者精浆颗粒表达水平显著高于正常健康人群,且其表达水平与VC等级密切相关。

  • 标签: 精索静脉曲张 不育,男(雄)性 精液分析 嗜酸细胞颗粒蛋白质类
  • 简介:目的:建立HPLC法测定垂盆草颗粒中槲皮含量的方法。方法:采用RP—HPLC法,色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-0.1%三氟乙酸溶液(46:54),检测波长371nm,柱温30℃。结果:槲皮在6.22μg/mL~62.24μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.0%(RSD=I.2%,n=6)。结论:本法操作简便、准确,可用于垂盆苹颗粒的质量控制。

  • 标签: 垂盆草颗粒 HPLC 槲皮素 含量测定
  • 简介:目的采用高效液相色谱法测定复方天麻颗粒中天麻的含量。方法采用DiamonsilC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,流速1.0ml/min,柱温30℃,检验波长为220nm。结果天麻在0.0565~0.5650μg范围内,线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为98.83%,RSD为2.65%。结论该方法操作简单、专属性强、重复性好,可作为复方天麻颗粒中天麻的质量控制。

  • 标签: 复方天麻颗粒 天麻素 高效液相色谱法 含量测定
  • 简介:目的:建立护肝颗粒中槲皮、山柰、异鼠李的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法测定护肝颗粒中槲皮、山柰、异鼠李的含量,色谱柱HederaODS-2柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸,梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长360nm,柱温为35℃.结果:槲皮、山柰、异鼠李分别在0.0768-1.92μg,0.02004~0.501μg,0.021~0.525μg范围内进样量与峰面积积分值线性关系良好,r分别为0.9999、0.9998、0.9999,加样回收率分别为97.4%、98.1%、97.9%,RSD分别为1.4%、1.8%、1.3%.结论:该方法准确、稳定,可以用来同时测定护肝颗粒中槲皮、山柰、异鼠李的含量.

  • 标签: 护肝颗粒 HPLC 槲皮素 山柰素 异鼠李素
  • 简介:摘要目的研究复方锌布颗粒剂中布洛芬的出介质,建立高效液相色谱法测定复方锌布颗粒剂中布洛芬的出度。方法以磷酸盐缓冲液(pH=7.2)900ml为出介质,桨法,转速为50rpm,30min时取样,取样后采用HPLC法测定。结果布洛芬在74.1~174.7μg/ml的范围内呈现良好的线性关系(r=0.9997),其平均回收率为98.6%(RSD=0.3%),出曲线表明在30min内,布洛芬出度可达75%以上,限度为80%。结论3批样品的出度均符合规定。

  • 标签: 布洛芬 溶出度 溶出曲线
  • 简介:好氧颗粒污泥外表和内在的不同氧(dissolvedoxygen,DO)水平分别适合硝化和反硝化微生物的生长,形成具有同步硝化反硝化功能的脱氮体系。DO水平对颗粒污泥内部厌氧好氧区域的构成有影响,改变DO可以研究氧对好氧颗粒污泥同步硝化反硝化过程的影响。结果屈示,反应系统在一定DO参与下时有机物的去除效率较高,各种条件下均能达到90%左有;高DO(≥30mg/L)提商硝化速率,但易造成反应过程中NO2^-和NO3^-的积累;低DO(≤2.0mg/L)下反应积累的硝化产物少;在颗粒污泥同步硝化反硝化反也过程中适当控制供氧,可减少运行过程中N2O的排放。实验条件下,控制DO在1~2mg/L为佳;在低DO情况下,NO2^-通过短程反硝化反应直接还原为气态的N2O和N2;高DO情况下,大部分NO2以全程反硝化方式还原为气态氮。好氧颗粒污泥具有良好的硝化反硝化能力,阿DO对硝化反硝化过程有很大的影响,且低DO更有利于氮的盘除和N2O排放量的降低。

  • 标签: 环境工程 硝化 反硝化 N2O 颗粒污泥 氧化合物
  • 简介:目的:建立益肾灵颗粒中补骨脂、异补骨脂的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Diamonds色谱法,流动相为甲醇。水(48:52),检测波长246nm,流速为0.8mL·min^-1。结果:该方法的补骨脂的回收率为98.94%(RSD=0.89%,n=5);畀补骨脂的回收率为100.27%(RSD=1.83%,n=5)。结论:本法简便、灵敏、准确,可用于本品补骨脂、异补骨脂的含量测定。

  • 标签: 高效液相色谱法 益肾灵颗粒 补骨脂素 异补骨脂素
  • 简介:摘要目的:建立HPLC法测定丹磺颗粒剂中丹参含量的方法。方法:采用OSD柱,以甲醇.1%冰醋酸溶液(5:95)为流动相,检测波长为280nm,流速为1.0ml/min。结果:加样回收试验显示丹参平均回收率99.82%,RSD=1.93%(n=5)。结论:该方法简便,分离完全,结果可靠,适用于该制剂的质量控制。

  • 标签: HPLC法 丹参素 颗粒剂 测定 RP 加样回收试验
  • 简介:目的:建立益肾灵颗粒中补骨脂与异补脂骨的HPI,C的测定方法.方法:采用C18柱(4.6×250mm,5μm),0.01m01磷酸盐缓冲液(pH6.5)-甲醇(50:50)为流动相,流速:1.0ml/min.结果:平均回收率:补骨脂为98.9%,RSD=2.0%、异补骨脂为98.2%,RSD=0.8%(n=5).结论:补骨脂与异补骨脂能得到较好分离,可用于益肾灵颗粒中补骨脂的质量控制.

  • 标签: 益肾灵颗粒 补骨脂素 异补骨脂素 含量测定 高效液相色谱法
  • 简介:目的建立复方金钱草排石颗粒中槲皮和山柰的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,C18色谱柱(250mm×4.6mm),以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相,检测波长为360nm,流速为1.0ml·min^-1。结果槲皮线性范围为0.0027~0.1075μg,平均回收率=101.13%,RSD=2.40%;山柰线性范围为0.0123~0.4912μg,平均回收率=98.66%,RSD=1.22%。结论该法准确、简便、快捷,可以同时测定复方金钱草排石颗粒中槲皮和山柰的含量。

  • 标签: 复方金钱草排石颗粒 高效液相色谱法 槲皮素 山柰素
  • 简介:本实验采用HPLC对该药丹参钠的出度进行了含量测定,  将丹参钠对照品溶液(0.44mg/ml)按2,  目的对消淤降脂胶囊中丹参钠的出度进行测定

  • 标签: 中丹参 丹参素 出度测定
  • 简介:以纤维为骨架,丙烯酸(AA)为单体,采用接枝共聚方法在85%磷酸溶液反应介质中合成了pH值敏感水凝胶(C-gAA)。主要研究了C-g-AA水凝胶的pH值敏感性及在不同pH值溶液(pH值分别为1.15,6.86,11.05)中的胀可逆性和胀动力学行为,并与在去离子水中的胀行为进行对比。结果表明,C-g-AA水凝胶的胀比随着凝胶中AA组分的增加而增加,最高可达73%;水凝胶溶胀具有明显的pH值敏感性,当pH值〉7时达到胀平衡,水凝胶对pH值的胀可逆性良好;不同pH值溶液中的胀动力学表明,胀初期水分子在水凝胶中的扩散行为可用non-Fickian扩散定律来描述,整体胀行为满足Schott二级动力学方程,而在去离子水中,水凝胶溶胀初期的扩散特征指数同样保持稳定,但整体胀行为却不遵循Schott二级动力学方程。

  • 标签: pH值敏感性 溶胀动力学 水凝胶 纤维素
  • 简介:目的建立肤痒颗粒的山柰含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定;色谱柱为KromasicC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(55:45),检测波长为367nm,进样量10μL。结果山柰素质量浓度在0.925~9.25μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为98.73%,RSD=0.33%(n=6)。结论HPLC法专属性强、重现性好、简便易行,可用于该制剂的质量控制。

  • 标签: 肤痒颗粒 山柰素 高效液相色谱法 含量测定
  • 简介:摘要目的研究催产加新生化颗粒用于药物流产的效果观察。方法选择我中心门诊自愿药流的健康妇女240例,随机分为研究组与对照组各120例,研究组在服用米索前列醇3小时后肌注催产20U,l次/d,连用3d,并同时口服新生化颗粒12g/次,2次/d,连用7d。对照组在孕囊排出后口服抗生预防感染。结果两组完全流产率比较差异有统计学意义(P<O.05)。两组平均出血时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者阴道出血量间差异有统计学意义(P<0.05)。结论催产加新生化颗粒用于药物流产可以提高完全流产率、缩短阴道出血时间、减少出血量,有临床应用价值。

  • 标签: 药物流产催产素新生化颗粒阴道出血