简介：目的研究组织型转谷氨酰胺酶（tissuetransglutaminase,TG2）是否参与人SaOS-2细胞系成骨分化过程。方法使用携带短发夹RNA（shorthairpinRNA,shRNA）的慢病毒转染SaOS-2细胞以敲减TG2表达,以SaOS-2细胞及转染了含阴性对照shRNA病毒的SaOS-2作为对照组,分别进行体外成骨诱导培养,并进行以下检测：诱导14d后各组矿化情况（茜素红染色）;诱导4、7d后碱性磷酸酶活性及I型胶原、骨钙素、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的mRNA表达,并与诱导前的表达水平相比较。结果SaOS-2细胞组及转染阴性对照shRNA组在体外成骨诱导过程中I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达和ALP活性逐渐增加,14d时形成明显矿化结节,而TG2敲减后的SaOS-2细胞在诱导14d时矿化水平显著低于对照组,诱导7d时ALP活性及I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达水平显著低于对照组。结论组织型转谷氨酰胺酶参与SaOS-2细胞体外成骨分化及矿化。

简介：目的通过动物实验及体外实验探索饮酒是否促进乳腺癌恶性进展，且这一作用是否与其诱导的慢性应激有关。方法利用小鼠乳腺癌移植瘤模型，体内观察２％乙醇慢性处理的小鼠乳腺癌Ｅ０７７１细胞对体内细胞生长转移的影响；利用体外细胞学实验观察０.２％乙醇慢性诱导对小鼠乳腺癌细胞Ｅ０７７１增殖、迁移及非锚定生长能力的影响；同时用分子生物学方法探索细胞内ＲＯＳ水平及慢性内质网应激蛋白如ｐ-ｅＩＦ２ａ、Ｂｉｐ、ＸＢＰ１-ｓ等蛋白表达水平是否发生改变。结果与对照组相比，饮酒组小鼠体内肿瘤生长速度加快，转移增加；体外酒精处理可以显著促进乳腺癌细胞增殖、迁移等恶性生物学行为，酒精慢性处理可以诱导ＲＯＳ、内质网应激活化蛋白ｐ-ｅＩＦ２ａ、Ｂｉｐ、ＸＢＰ１-ｓ表达上升。结论饮酒可能通过诱导乳腺癌细胞内质网应激促进其恶性进展。

简介：目的：探讨内质网应激（endoplasmicreticulumstress，ERS）及相关炎症反应在糖尿病大鼠肾脏损害中的作用及血管紧张素II受体拮抗剂缬沙坦对其的影响。方法采用腹腔注射链脲佐菌素方法建立糖尿病肾病大鼠模型。将大鼠随机分为对照组（Con组）、糖尿病组（DM组）、缬沙坦组（DM＋V组）。缬沙坦组每日灌胃给予缬沙坦（10mg／kg）共6周。应用免疫组化法及Westernblot方法检测ERS相关蛋白P-IRE1α、P-JNK及中性粒细胞趋化因子MCP-1的表达及定位，实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测IRE1α、JNK及MCP-1mRNA的表达变化，同时观察各组大鼠尿蛋白、BUN、Scr等指标的变化。结果与Con组相比，DM组大鼠肾脏病理炎细胞浸润加重，P-IRE1α、IRE1α、P-JNK、MCP-1蛋白表达上调，IRE1αmRNA、MCP-1mRNA表达水平上调；与DM组相比，DM＋V组肾脏病理炎症细胞浸润减轻，P-IRE1α、IRE1α、P-JNK、MCP-1蛋白表达下调，IRE1αmRNA、MCP-1mRNA表达水平下调。3组间JNKmRNA及蛋白表达无明显差异。结论糖尿病大鼠肾脏中存在内质网应激和炎症反应的激活，缬沙坦可能部分通过抑制内质网应激中的IRE1／JNK／MCP-1通路，减少炎症反应，从而发挥肾脏保护作用。