简介:摘要越来越多研究表明内质网应激介导β细胞功能障碍参与了糖尿病的发生及发展过程。内质网应激(EndoplasmicreticulusstressERS)信号通路参与维持胰岛β细胞内质网稳态,适度的ERS对有利于细胞内环境恢复,但过久或太强的ERS可引起内质网稳态失去平衡,进而导致胰岛β细胞死亡或自身免疫性反应,引起糖尿病。减少内质网应激可能会成为治疗糖尿病的一个靶点。本文就ERS与各型糖尿病之间关系作一综述。
简介:目的通过动物实验及体外实验探索饮酒是否促进乳腺癌恶性进展,且这一作用是否与其诱导的慢性应激有关。方法利用小鼠乳腺癌移植瘤模型,体内观察2%乙醇慢性处理的小鼠乳腺癌E0771细胞对体内细胞生长转移的影响;利用体外细胞学实验观察0.2%乙醇慢性诱导对小鼠乳腺癌细胞E0771增殖、迁移及非锚定生长能力的影响;同时用分子生物学方法探索细胞内ROS水平及慢性内质网应激蛋白如p-eIF2a、Bip、XBP1-s等蛋白表达水平是否发生改变。结果与对照组相比,饮酒组小鼠体内肿瘤生长速度加快,转移增加;体外酒精处理可以显著促进乳腺癌细胞增殖、迁移等恶性生物学行为,酒精慢性处理可以诱导ROS、内质网应激活化蛋白p-eIF2a、Bip、XBP1-s表达上升。结论饮酒可能通过诱导乳腺癌细胞内质网应激促进其恶性进展。
简介:摘要目的探讨肝星状细胞(HSC)特异性肌醇依赖性激酶1α(IRE1α)基因敲除(IRE1αHSC-/-)对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的影响。方法杂交获得IRE1αfl/fl及IRE1αfl/fl/血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)Cre小鼠(美国梅奥诊所胃肠肝病实验中心惠赠),腹腔注射他莫昔芬(Tamoxifen)诱导PDGFRβCre活化并构建IRE1αHSC-/-小鼠,设为实验组;将IRE1αfl/fl小鼠设为WT组;两组分别予以腹腔注射CCl4或等体积橄榄油(Olive Oil),根据不同处理分组如下:野生型对照组(WT-O.Oil,n=5)、基因敲除对照组(IRE1αHSC-/--O.Oil,n=5)、野生型实验组(WT-CCl4,n=5)、基因敲除实验组(IRE1αHSC-/--CCl4,n=5),6周后处死,获取肝脏组织行苏木精-伊红(HE)染色及天狼猩红染色。蛋白质印迹法(Western blot)及免疫荧光染色比较各组肝脏中IRE1α、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、纤连蛋白(Fibronectin)、PDGFRα、结蛋白(Desmin)蛋白及荧光表达水平;组间比较均采用单因素方差分析。结果与WT比较,IRE1αHSC-/-可以减轻CCl4诱导生成的肝脏大量炎性细胞以及胶原蛋白沉积[(1.56±0.45)%比(2.43±0.49)%,F=50.300,P<0.01]。Western blot结果显示,IRE1αHSC-/--CCl4组中α-SMA、Fibronectin蛋白表达明显低于WT-CCl4组(3.11±0.88比5.49±1.85、3.21±0.79比5.65±1.97,F=17.900、18.780,P<0.05);免疫荧光结果示IRE1αHSC-/--CCl4组中α-SMA、Collagen Ⅰ及Desmin荧光相对表达量明显低于WT-CCl4组,差异有统计学意义[(13.19±3.52)%比(17.91±4.46)%、(18.66±6.73)%比(22.21±7.92)%、(8.85±2.11)%比(11.87±2.07)%,F=100.300、74.690、71.270,P<0.05]。结论HSC特异性IRE1α基因敲除能够通过抑制HSC活化,减少CCl4诱导的小鼠肝脏中胶原纤维沉积,缓解肝纤维化进程。
简介:摘要目的探讨阿司匹林(aspirin,ASP)对高脂血症诱导的足细胞内质网应激的影响及可能机制。方法培养足细胞分为4组:对照组、ASP(100 μg/ml)组、ox-LDL(100 μg/ml)组和ASP+ox-LDL组,在6 h、12 h、24 h、48 h以实时定量PCR法检测蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-1ike endoplasmic reticulum kinase,PERK)、真核细胞起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)、活化转录因子4(activating transcription factor-4,ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CAAT/enhancer binding protein homologous protein,CHOP)的表达;在24 h时以Western印迹法检测磷酸化(p)-PERK、p-eIF2α的表达;在12 h时以Western印迹法检测ATF4的表达。结果在足细胞培养24 h时,ox-LDL组和ASP+ox-LDL组PERK、eIF2α的表达水平达高峰,在12 h时,该两组ATF4、CHOP的表达水平达高峰。在足细胞培养6 h、12 h、24 h、48 h时,与对照组比较,ox-LDL组PERK、eIF2α、ATF4、CHOP的表达水平明显较高(均P<0.05);与ox-LDL组比较,ASP+ox-LDL组上述各指标表达明显较低(均P<0.05)。在足细胞培养24 h时,与对照组比较,ox-LDL组p-PERK、p-eIF2α的表达水平明显较高(均P<0.05);与ox-LDL组比较,ASP+ox-LDL组p-PERK、p-eIF2α的表达水平明显较低(均P<0.05)。在足细胞分组培养12 h时,各组ATF4蛋白水平的表达与mRNA表达相似。ASP组与对照组间上述各项指标表达差异无统计学意义。结论高脂血症可能通过诱导PERK和eIF2α的磷酸化、激活ATF4转录及诱导CHOP高表达,引起足细胞内质网应激,而阿司匹林可能部分阻断了PERK通路,进而可能对足细胞具有保护作用。
简介:摘要内质网是一种细胞器,可以使新合成的蛋白质通过甲基化、羟基化、脂化或形成二硫键正确折叠。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是由内腔中未折叠蛋白的积累引起的细胞应激反应。为应对ERS,细胞建立了一种进化保守的机制,称为未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)。UPR的稳态激活会执行适应性程序,当应激强调超过UPR的适应范围时,UPR便会触发细胞凋亡。此外,UPR的不同信号通路与微生物感染途径相互作用,开启或放大了炎性细胞因子的产生。文章对ERS介导细胞凋亡及免疫炎症反应进行总结和概述,以便进一步认识免疫炎性疾病的发病机理。
简介:摘要胰岛β细胞功能紊乱和凋亡是2型糖尿病发生和发展的重要病理基础之一,内质网应激(ER-S)和炎症之间的串扰是胰岛β细胞凋亡的重要因素,而联接内质网应激和炎症的关键蛋白是硫氧还相互作用蛋白(TXNIP),本综述主要探讨内质网应激在胰岛β细胞功能紊乱和凋亡中的作用机制,旨在为2型糖尿病的发病机制研究和治疗策略提供线索。
简介:摘要内质网应激(ERS)是细胞应激反应的核心环节。根据ERS持续时间,可将其分为急性ERS和慢性ERS 2种类型。根据诱发ERS的原因,可将其分为未折叠蛋白质反应(UPR)、内质网过度负荷反应(EOR)和固醇调节元件结合蛋白质(SREBP)通路调节反应3种类型。WFS1基因编码的跨膜糖蛋白质Wolframin蛋白质,是内质网上的常驻跨膜蛋白质,亦是参与调控ERS的蛋白质。目前,对ERS的研究主要集中在缺血缺氧、葡萄糖缺乏、脂质过度负荷、Ca2+紊乱等方面;对Wolframin蛋白质的相关研究,则主要集中在Wolfram综合征相应典型疾病,如糖尿病、视神经萎缩、双相情感障碍等方面。围生医学领域ERS与妊娠相关并发症密切相关,但是由于方法学等的滞涸,目前对ERS与子痫前期、妊娠期糖尿病(GDM)、妊娠期肝内胆汁淤积症等妊娠相关疾病研究的文献报道较少。笔者拟就激活ERS分类、Wolframin蛋白质与ERS关系,ERS介导的相应信号通路,Wolframin蛋白质在上述信号通路中的相应调控作用的最新研究等进行阐述,旨在为妊娠相关疾病的病理生理机制研究提供新的方向。
简介:摘要卵巢储备功能减退 (DOR) 包括生殖功能减退和内分泌功能减退,最终导致女性生育力下降。内质网是细胞内重要的细胞器,参与蛋白的合成折叠与分泌、脂质代谢、类固醇激素合成、Ca2+储存等细胞内活动。细胞内外环境的变化,如氧化应激等皆有可能扰乱内质网稳态,导致内质网未折叠蛋白反应 (UPR)。初期UPR有助于维持机体细胞存活,但刺激强度过高或时间过长,则会导致细胞凋亡。越来越多的研究证实,内质网应激参与DOR发生的病理机制,与卵泡闭锁、卵巢纤维化增加、激素合成功能下降等过程密切相关。本文将综述DOR发生发展过程中的内质网应激机制及其研究进展。
简介:目的探讨法舒地尔对于HK-2细胞氧化应激和内质网应激的影响。方法体外培养人肾近曲小管细胞,分为对照组、高糖组和法舒地尔组。对照组细胞采用正常浓度葡萄糖培养,高糖组采用高浓度葡萄糖培养,法舒地尔组细胞同时采用高糖和不同浓度法舒地尔处理。细胞活性和凋亡水平分别采用噻唑蓝(MTT)和DNA断端末端标记(TUNEL)试剂盒检测。采用活性氧(ROS)试剂盒,RealtimePCR和Westernblot检测ROS含量和基因表达水平。结果与对照组相比,高浓度葡萄糖可以引起HK-2细胞活力降低,凋亡率升高,而法舒地尔则可以促进细胞活力,降低凋亡率,呈现浓度梯度依赖性(P<0.05)。高浓度葡萄糖显著提升ROS含量,法舒地尔的浓度则与ROS的产量呈负相关(P<0.05)。高糖处理促进p47phox和Nox4表达水平升高,法舒地尔则能够逆转这一过程,且呈现浓度依赖性(P<0.05)。高糖组GRP78和Chop的表达水平均显著上升,而Bcl-2的表达水平显著下降(P<0.05)。法舒地尔能够抑制GRP78和Chop表达,并促进Bcl-2的表达水平,且有浓度依赖性(P<0.05)。结论法舒地尔可能通过参与调控细胞氧化应激和内质网应激发挥细胞保护作用。