简介：目的：建立党参的ISSR-PCR反应体系,为今后利用ISSR标记技术进行党参鉴定及种质遗传多样性分析提供一个标准化程序.方法：采用试剂盒法提取党参基因组DNA为模板,通过单因素实验分析了ISSR-PCR反应体系中MgCl2、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、模板DNA用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响.结果：建立了重复性好,分辨率高的ISSR-PCR反应体系,即在25μL反应体系中,含有10×PCRBuffer缓冲液2.5μL,MgCl22.0mmol·L-1,dNTPs0.5mmol·L-1,引物0.4μmol·L-1,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA为30ng;扩增程序为：94℃预变性5min,然后94℃变性30s,51.7℃退火1min,72℃延伸1.5min,共计35个循环,循环结束后在72℃延伸7min,4℃保存.结论：建立了适用于党参的ISSR-PCR反应体系,为应用ISSR技术鉴定党参种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础.

简介：以期建立可用于地龙ISSR－PCR分析的最佳反应体系和扩增程序,模板DNA的量、引物浓度、镁离子浓度和Taq酶的量、引物退火温度等都会影响ISSR扩增,将地龙ISSR-PCR扩增体系中的dNTPs浓度定为0.2mmol·L-1

简介：确定了引物809以柴胡基因组DNA为模板扩增的最佳退火温度为54.5℃（见图2a）,因此选择0.3μmol/L作为柴胡ISSR-PCR反应体系中最佳的引物浓度,本实验在25μlISSR-PCR反应体系中对TaqDNA聚合酶设置了0.5

简介：[摘要] 炭疽是一种烈性传染病，17世纪欧洲曾发生过一次炭疽大流行，导致约6万人丧生。2001年炭疽首次被真正作为生化武器用于恐怖袭击。建立一种快速敏感特异的检测体系对于炭疽诊断是十分必要的。本研究中我们建立了快速鉴别炭疽芽孢杆菌的PCR体系，用相关菌种进行了特异性评价，并用模拟粪便标本对该体系开展了临床应用价值的评价。

简介：【摘要】目的：分析实时定量PCR实验室开展强化管理对污染的预防效果。方法：我中心于2020年6月在实时定量PCR实验室开展强化管理，分别于强化管理开展前（2019年6月-2020年5月）、强化管理开展后（2020年6月-2021年5月）对工作人员项目合格率进行对比。结果：强化管理后，工作人员操作流程知晓、污染来源知晓、个人防护措施、手卫生、污物处理、高压消毒锅使用等检查项目合格率均较强化管理前更高，数据差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：实时定量PCR实验室开展强化管理有助于提高工作人员防范意识，做好污物处理，避免污染发生，值得推广。

简介：

简介：目的建立梅毒螺旋体的荧光定量PCR检测方法。方法依据梅毒螺旋体（Treponemapallidum，TV）DNA多聚酶I（polA）基因序列，设计MGB—Taqman探针和PCR引物，对TPPA法检测到的不同国家和人种梅毒螺旋体抗体阳性患者和阴性人员血液样本进行检测，验证该PCR方法的灵敏度和特异性，以及2种检测方法的一致性。结果PCR产物测序证实新建的荧光PCR方法可以扩增到梅毒螺旋体polA基因区200bp长DNA片段。该方法特异性强、灵敏度高，可检出每微升血液中10拷贝梅毒DNA。在31例TPPA法检测结果为阳性的样本中，有21例为PCR阳性。证明其中10例TPPA法阳性为非现行感染，可能不具有传染性。统计分析表明该荧光PCR方法与TPPA方法对不同国家和种族人群检测结果未出现显著差异。结论新建的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好，可排除TPPA法阳性梅毒患者中非现行感染的旅行者，是适用于不同地区和种族的旅行者进行梅毒检测的新方法。

简介：目的应用PCR检验技术在口岸进行鼠疫检测,以提高鼠疫诊断的准确性和灵敏度,建立适合于口岸鼠疫检测的快速诊断方法,提高鼠疫检测水平.方法首先,根据口岸地区样品的特点确定相应PCR检测方法,然后对样品进行PCR检测、鼠疫细菌学检验和反向间接血球凝集试验.结果形成了一套适合于口岸地区鼠疫PCR检测的方法,灵敏度为7cfu的鼠疫菌.PCR反应体系中以dUTP代替DTTp,加入UDG酶防止产物污染,对特异性和敏感性无影响.对在口岸地区采集的鼠类标本111份、进口旱獭皮张500份进行了PCR检测,并分别进行鼠疫细菌学、反向间接血球凝集试验.PCR检测出3份阳性鼠类标本,与鼠疫细菌学检验结果一致:对进口旱獭皮张的PCR检测和反向间接血球凝集试验均为阴性.结论经实验研究建立了一套完整的鼠疫PCR检测方法,本方法特异性和敏感性强、操作简便、快捷、成本较低,适合在口岸地区推广应用.

简介：对102份血清标本分别用PCR和ELISA方法检测HBV—DNA,HBsAg,抗—HBs,HBeAg,抗—HBe,抗—HBc（IgG）,抗—HBc（IgM）和Pre—S2。PCR检测结果表明:在HBsAg（+）血清中,HBV—DNA的检出率为70%。在HBeAg（+）血清中,HBV—DNA的检出率为100%。在抗—HBs（+）/抗—HBc（+）血清中,HBV—DNA的检出率为20%。因此大多数HBsAg携带者具有乙型肝炎病毒（HBV）传染性,抗—HBs（+）抗—HBc（+）血清不能排除HBV的传染性。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制措施。方法选取本院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液,每个患者的血液平均分为A、B、C、D组，A组即刻测定，B组室温放置2天测定，C组4℃放置7天测定，D组溶血即刻测定，比较不同的储存时间、温度以及标本是否溶血对乙肝病毒DNA进行荧光定量测量结果的影响。结果未溶血标本与溶血标本相比以及不同储存时间和温度相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论标本溶血、储存时间以及温度对荧光定量PCR检测乙肝大三阳血清标本DNA的结果无影响。

简介：聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是一种在体外模拟自然DNA复制过程,用聚合酶催化物扩增核酸分子的新技术。由美国Cetus公司的KaryMullis于1984年发明,Saiki等人于1985年首先在《Science》杂志上完整地描述了PCR技术。应用PCR技术进行体外基因扩增,可使极微量的单拷贝特定核苷酸片段在数小

简介：摘要目的比较PCRHBV-DNA和ELISAHBsAg两种检测方法在检测内窥镜中HBV的检测情况，从而确定本次研究的试验方法。方法现场采集内窥镜各关键部位（镜身、孔道、活检钳）的样品207份，平均分成两份，按各自所用试剂盒的要求分别进行试验，比较两种试验的阳性检出率、一致性等试验评价指标。结果PCRHBV-DNA阳检率为27.54%、ELISAHBsAg阳检率为2.42%，经χ2检验，χ2=4.63P=0.031、一致性检验，kappa＝0.089,P=0.008，由此说明两种检验方法在内窥镜中痕量的HBV的检测过程中有显著性差异。结论PCRHBV-DNA对与内窥镜中痕量的HBV的检测试验方法优于ELISAHBsAg方法，在本次调查研究中应该采用PCRHBV-DNA的检测方法。

简介：

简介：摘要目的探讨和研究实时荧光逆转录聚合酶链式反应在流感病毒检测中的应用效果。方法采用实时荧光PCR对617例流感样病例患者的咽拭子标本进行流感病毒核酸的测定，对检测出的阳性标本采用MDCK进行培养并分离，对两种方法的检测结果进行分析，对比特异性及灵敏度。结果本组617例标本中实时荧光PCR共检测出阳性标本152例，阳性率24.6%；细胞培养法在此152例阳性标本中共分离出流感病毒79例，阳性率12.8%，实时荧光PCR检测阳性率显著高于细胞培养法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论实时荧光PCR能够快速有效的检测出流感病毒核酸，是实验室快速诊断的有效手段。

简介：摘要目的通过观察我院收治的对宫颈病变患者的临床诊断资料，探讨分析采用实时荧光PCR检测高危型HPV的价值。方法对我院收治的158例宫颈病变患者患者，进行实时荧光PCR检测，分析检测结果，并与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)的检测结果对比。结果HPV在宫颈癌患者阳性表达率达90%以上,与HC-Ⅱ相比，差异无统计学意义；PCR检测宫颈病变与HC-Ⅱ的检测结果的阳性率分别为74.7%与70.9%，差异无统计学意义（P>0.05）；但两种方法检测HSIL的HPV阳性率明显高于宫颈炎症、湿疣（P<0.01），除LSIL外，其他病变中的PCR检出率均略高于HC-Ⅱ。结论采用实时荧光PCR检测高危型HPV，可用于确诊患者是否患有宫颈癌，提示高危型HPV感染与宫颈病变、宫颈癌发生有一定的相关性，值得进一步推广与应用分析。

简介：摘要目的研究在细菌检验中PCR检验法的临床效果以及应用价值。方法采取不同检验方法表法将我院自2015年7月至2017年7月期间收治的100例细菌样本随机分为两组，参照组实行革兰氏染色法检验，实验组实行PCR检验法检验，分析对比参照组和实验组细菌样本的阳性检验率。结果参照组细菌样本的阳性检出率72.00%对比实验组阳性检出率94.00%，统计学具有显著数据参比意义（P＜0.05）。结论将PCR检验法应用在细菌检验中具有显著作用，可以提升检出率。

简介：摘要：目的 为了分析 PCR 检验在麻疹病毒检验中的作用效果情况。 方法 选取 2018 年 7 月 -2019 年 7 月所检测的麻疹患者 90 例，根据患者采样的时间分为试验组和参照组，每组各 45 例，其中参照组患者给予 MV-IgM 抗体检测，试验组患者给予聚合酶链反应检验，之后对 2 组患者麻疹病毒阳性检出率情况，和对患者发病后选取的样本进行检测，对患者的阳性检出率情况进行登记。 结果 对患者发病在 7 天后采集的样本进行检测，其中，试验组患者阳性反应为 41 例，所占的比例约为 91.1% ，参照组患者阳性反应为 32 例，所占的比例约为 71.1% ；试验组患者发病 7 天后采集的样本检测阳性率约为 91.1% ，明显高于参照组患者 71.1% ， 2 组患者情况对比差异性比较明显， p ＜ 0.05 。对比 2 组患者麻疹病毒阳性检出率，试验组患者阳性反应为 43 例，参照组患者阳性反应为 40 例，试验组患者麻疹病毒阳性检出率为 95.5% ，明显的高于参照组阳性检出率 88.9% ，两组情况对比有统计学意义， p ＜ 0.05 。 结论 对麻疹病毒检验采用 PCR 检验，有着重要的临床价值，这对于初期患者来说， PCR 检验结果有着非常重要的作用，其临床价值和效果非常大。

简介：目的用荧光定量PCR(FQ-PCR)法对乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)进行检测，并探讨其临床实际应用价值。方法用FQ-PCR法检测HBV-DNA；用ELISA法检测HBV标志物；用全自动生化分析仪检测肝功能。结果外周血检测表明：HBV-e抗原阳性和HBV-e抗体阳性的乙型肝炎患者，HBV-DNA检测阳性率分别为98．0％和45．7％，含量分别为10^7.23±2.67和10^4.56±1.47拷贝／ml；临床各组别中，急性肝炎组HBV-DNA含量明显高于其他各组别(P<0．01)；对慢性乙型肝炎，干扰素治疗组显示：对低拷贝量(<10^6拷贝／m1)的疗效尚可．对高拷贝量(≥10^6拷贝／m1)的疗效较差；拉米夫定治疗组表明：低拷贝量组略好于高拷贝量组，前3个月疗效比较好，但从第4个月皆开始出现耐药株，在治疗1年时发生率可达22．6％。治疗结束后6个月和12个月复查结果表明：拉米夫定治疗组复发率明显高于干扰素治疗组。结论实时FQ-PCR法可及时、准确的自动化检测出标本中拷贝数量，灵敏度、特异性、重复性明显优于RT-PCR，它对乙型肝炎的诊断，治疗方案的选择、调整和疗效预期具有比较好的实用价值。

简介：

简介：目的评价PCR检测女性自取阴道下端拭子标本诊断淋病的检验效果方法每例入选者均取2个宫颈拭子标本和1个自取阴道下端拭子标本，1个宫颈拭子标本和自取阴道下端拭子标本行淋球菌PCR检测，另1个宫颈拭子标本行淋球菌培养。结果共有298例入选者。诊断出淋病31例。宫颈拭子培养、宫颈拭子PCR、自取阴道下端拭子标本PCR的敏感性分别是75．8％(25／33)，87．9％(29／33)和97．0％(32／33)，特异性分别是100％(265／265)，99．6％(264／265)和99．6％(264／265)。结论自取阴道下端拭子标本PCR检测淋球菌的敏感性至少不低于传统的宫颈拭子，自取阴道下端拭子标本可以替代宫颈拭子行PCR诊断女性淋病。