简介：如今,不用购买新型的qPCR仪器就可以实现用更短的测试时间来获得高质量的数据。通过一种快速qPCR分析方法,研究者们无需大量投资就可以提高实验通量。这种方法采用了一种高速qPCR高效混合器,从而减少了变性时间并将退火/延伸时间结合起来。该方法在保证数据质量的同时提高了分析通量。

简介：摘要目的探讨单管多重PCR对缺失型α-地中海贫血（α-地贫）的诊断效能。方法使用单管多重PCR基因诊断试剂对375例血液学方法筛检疑似α-地贫患者进行基因检测，并对其中部分标本进行测序。结果疑似为α-地贫的375份临床标本，基因检测证实其中267例为α-地贫，其结果经序列分析证实。与PCR检测相比，一管法RBC脆性、MCV、MCH与RDW-CV检测的灵敏度分别为80.1%、81.6%、79.0%、78.3%，特异性分别为78.7%、90.7%、66.7%、77.8%。结论与血液学方法相比，多重PCR检测具有快速、准确的优点，可用于人群和临床样品的缺失型α-地贫的分子筛查以及产前诊断。

简介：

简介：摘要目的对比分析细菌培养与聚合酶链反应检测在细菌性痢疾检验中的应用价值。方法选择我院60例腹泻患者作为研究对象，随机分成两组，各30例，分别通过聚合酶链反应法(设为观察组)和细菌培养法(设为对照组)检测细菌性痢疾。比较两组细菌性痢疾的检出率，观察不同状况患者的PCR循坏数。结果检测结果显示观察组的细菌性痢疾阳性率明显高于对照组检测的细菌性痢疾阳性率，差异具有统计学意义(P＜0.05)。年龄＜5岁、存在便血、培养阳性患者的PCR循坏数最低，而年龄≥5岁、无便血、培养阴性患者的PCR循坏数最高。结论聚合酶链反应检测法在细菌性痢疾的检验中具有更高的应用价值，值得临床推广应用。

简介：摘要目的探讨极速实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)、实时荧光PCR、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)和胶体金免疫层析法(gold immunochromatography assay，GICA)4种方法检测新型布尼亚病毒的特异度和灵敏度，为发热伴血小板减少综合征的早期诊断提供依据。方法采集2017年6月1日至9月30日山东大学附属济南市传染病医院86例临床诊断为发热伴血小板减少综合征患者的血清样本，分别应用极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、ELISA和GICA 4种方法进行检测。统计学分析采用χ2检验。结果86份患者血清标本中，极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、IgM-ELISA、IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA的新型布尼亚病毒阳性分别为82份(95.34%)、79份(91.86%)、41份(47.67%)、8份(9.3%)、19份(22.09%)和3份(3.49%)。极速实时荧光PCR特异度为100%，灵敏度达到1×103拷贝/mL，3次重复扩增试验显示其Ct值变异系数均<2%。在发热伴血小板减少综合征进展的1期、2期、3期病程中，极速实时荧光PCR的阳性检出率为41份(97.62%)、34份(94.44%)、7份(87.50%)，实时荧光PCR的阳性检出率为39份(92.86%)、33份(91.67%)、7份(87.50%)，在1期和2期两个病程，极速实时荧光PCR阳性检出率略高；IgM-ELISA阳性检出率从1期(28.57%)到3期(87.50%)显著增高，2期、3期与1期相比，差异均有统计学意义(χ2＝8.347、7.561，均P<0.01)；IgM-GICA的阳性检出率从1期(14.29%)到2期(33.33%)也有增高，差异有统计学意义(χ2＝3.962，P<0.05)，但与其他方法相比，其检出率偏低。1期，实时荧光PCR阳性检出率显著高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG)，差异均有统计学意义(χ2＝33.740、55.080、49.010、64.340，均P<0.01)。2期，实时荧光PCR的阳性检出率高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG)，差异均有统计学意义(χ2＝7.700、46.720、23.700、50.630，均P<0.01)。3期，极速实时荧光PCR、实时荧光PCR和IgM-ELISA表现出同样高的阳性检出率，远高于IgG-ELISA和GICA(IgM和IgG)。实时荧光PCR阳性检出率和IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA之间差异均有统计学意义(均χ2＝6.250，P<0.05)。结论极速实时荧光PCR在新型布尼亚病毒的早期检测中有更高的灵敏度和特异度，且重复性好、稳定度高，与传统实时荧光PCR相比大大缩短了扩增时间，对发热伴血小板减少综合征的早期快速诊断具有重要价值。

简介：目的建立针对脆性X综合征FMR1基因CGG重复数的快速产前检测技术方法,用于基于人群的筛查。方法采用荧光PCR法对356名孕妇进行产前FMR1基因CGG重复数检测。结果本方法可检测CGG重复数小于130的携带者,共275例(77.25%)毛细管电泳结果显示为2组峰,提示为杂合型基因型,可明确诊断。81例(22.75%)仅见到一组峰,提示可能为纯合子,也可能为CGG重复数高于130的携带者。结论基于荧光PCR的检测技术,临床上可实现近80%孕妇FMR1基因CGG重复数精确、快速的初筛,剩余病例的明确诊断尚需其他技术辅助。

简介：

简介：摘要目的通过罗氏固体培养法,对环介导等温扩增技术(LAMP)和实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测痰结核分枝杆菌的优劣评价。方法选择临床经罗氏固体培养为阳性痰标本68份,阴性标本68份,分别采用LAMP和RT-PCR方法进行结核分枝杆菌检测结果，两者阳性检出率分别为88.2%.85.3%,两者差异没有统计学意义(P＞0.05);培养阳性标本经LAMP、RT—PCR检测结果灵敏度分别为91.2%和82.4%,两者差异没有统计学意义(P＞0.05);培养阴性标本经LAMP、RT—PCR检测结果的特异性分别为85.3%和88.2%,两者差异没有统计学意义(P＞0.05)。结论LAMP检测法阳性率高于RT-PCR法,但两者之间的差别尚无统计学意义,LAMP具有简单快速、准确,LAMP检测阳性标本灵敏度比RT-PCR好,LAMP检测阴性标本特异性稍低,LAMP具有简单、快速、准确,不需要昂贵的检验设备和严格的实验室设置，更适合基层结核病的实验诊断推广应用。

简介：【摘 要】目的：探究实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺结核患者痰标本价值的对照。 方法： 选取 2017 年 1 月到 2018 年 1 月我院确诊的肺结核疾病的患者 35 例作为研究对象，全部患者均行实时荧光定量 PCR 法检查、痰涂片抗酸染色和培养法检测，对照三种检测方式的诊断准确率。 结果 ：实时荧光定量 PCR 法肺结核疾病诊断准确率显著高于痰涂片抗酸染色和培养法检测，统计学意义存在（ P ＜ 0.05 ）。 结论：实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺结核患者痰标本 具有较高的应用价值，能够显示出痰标本中的结核杆菌数量变化情况，能够对病情起到监控作用，值得在临床。

简介：摘要目的分析细菌培养与聚合酶链反应(PCR)检测在细菌性痢疾检验中的应用效果。方法选择2012年2月-2014年1月来我院治疗腹泻的患者70例，70例患者分别采用细菌培养与聚合酶链反应检查，观察两种方法的检查效果。结果聚合酶链反应的检出率明显高于细菌培养组，差异有统计学意义(P＜0.05)。聚合酶链反应平均循环数在培养阴性、非脓血便、年龄大于5岁方面检出率最高，而聚合酶链反应平均循环数在培养阳性、脓血便、年龄小于5岁方面最低。结论在细菌性痢疾检验中采用聚合酶链反应检测准确性更高，临床医生对于腹泻患者细菌性痢疾检验可以采用聚合酶链反应检测，从而提高准确性。

简介：【摘要】目的：对比阴道细菌检验采用聚合酶链反应检验法、细菌培养法的实际效果。方法：从2020年1月-2020年12月在本院治疗阴道炎性感染患者中随机选择100例参与研究，给予100例患者均实施聚合酶链反应检验法、细菌培养法，比较两种检查方法对阴道细菌检验阳性率以及不同致病菌分布情况。结果：经统计，聚合酶链反应检验法的阳性检出率为91%明显高于细菌培养法阳性检出率72%，两种检验方法的阳性检出率差异存在统计学意义（P＜0.05）；从聚合酶链反应检验法、细菌培养法结果上看，细菌比重由低到高分别为肠球菌、棒状杆菌以及特纳菌，两种方法在各种致病菌的检出率上无明显差异，（P＞0.05）。结论：导致阴道炎症产生的致病菌包括肠球菌、棒状杆菌和特纳菌，从阳性检出率上看，聚合酶链反应检验法的准确性、特异性、敏感度明显高于细菌培养法，有助于减少误诊、漏诊的情况，具有值得积极推广的应用价值。

简介：【摘要】目的 研究实时荧光聚合酶链式反应（FQ-PCR）技术应用于慢性乙型肝炎（CHB）患者血清标本HBV-DNA定量检测中的效果。方法 选取我院2020年1月-2021年12月确诊入院的CHB患者（n=85）作为研究组，同期HBV早期感染者（n=80）作为对照组。均给予

简介：目的探讨高脂血、溶血标本对荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定低水平HBV-DNA检测结果的影响。方法对收治的100例三酰甘油（TG）正常（TG≤1.46mmol/L）、实时荧光定量PCR测定为（4.0-9.0）×10^3IU/mL的乙型肝炎患者采集血清标本,进行即刻检测,另外选择100份乙肝五项全阴且测不出HBV-DNA的高TG标本和100份乙肝五项全阴且测不出HBV-DNA的全血标本分别制备成高脂血、溶血血清标本,同时进行高脂血和非高脂血、溶血血清和非溶血血清的HBV-DNA荧光定量PCR检测,并进行配对t检验。结果高脂血和非高脂血、溶血血清和非溶血血清的HBV-DNA水平差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高脂血、溶血标本低水平HBV-DNA荧光定量PCR定量检测结果较空腹采集即刻检测的结果降低。

简介：摘要目的探讨荧光定量聚合酶链反应结合传统方法检测泌尿生殖道支原体感染的临床价值。方法对我院皮肤科、泌尿外科、妇科就诊患者的泌尿生殖道标本115例行荧光定量聚合酶链反应、液体培养法检测，分析比较结果。结果通过对同种标本的2种方法结果的比较，检测阳性率的差异没有统计学意义；FQ—PCR呈阳性的标本，液体培养法均呈阳性；而液体培养法呈阳性的标本，FQ—PCR可能为阴性，考虑原因主要是液体培养时间过长，标本被污染，导致假阳性。结论液体培养法可作为泌尿生殖道支原体感染的初筛检查，结合FQ—PCR检测能提供准确的诊断，2者阳性的基础上结合液体培养法的药敏试验，能为临床治疗提供有价值的用药方案。

简介：【摘要】目的：研究乙型肝炎患者乙肝病毒检验中使用实时荧光定量聚合酶链反应的作用。方法：选择25例乙型肝炎患者进行研究，为研究组，另外同期选择25例HBV早期感染者作为对照，为对照组。均选择于2022年3月至2023年2月，均在乙肝病毒检验中使用实时荧光定量聚合酶链反应，对比数据差异。结果：在入院时，两组HBV DNA表达水平有明显差异，研究组高，P＜0.05；单独分析研究组数据发现，治疗后3、6、9个月的HBV DNA表达水平有统计学差异，P＜0.05；均低于治疗前，P＜0.05。单独分析研究组数据还发现，治疗9个月的HBV DNA变异率最高，对比其他时间段（治疗前、治疗后3个月），P＜0.05。结论：乙型肝炎患者乙肝病毒检验中使用实时荧光定量聚合酶链反应的作用积极。

简介：摘要目的应用微阵列比较基因组杂交（Array-CGH）联合荧光定量聚合酶链反应（QF-PCR）检测分析自然流产组织，探索该联合检测手段的特点与应用，进而为自然流产发生的遗传学因素提供参考。方法采集2016年7月至2019年9月就诊于大连市妇女儿童医疗中心的345例自然流产患者的流产组织，并采用Array-CGH联合QF-PCR技术进行遗传变异情况检测，分析其检测结果。结果QF-PCR技术共检测出染色体数目异常213例，Array-CGH技术补充检出染色体结构异常24例，综合遗传学异常检出率达到68.7%（237/345），并检测出本地区常见流产组织染色体异常类型。高龄孕妇（≥ 35岁）与非高龄组（<35岁）、孕早期孕妇（<10周）与非孕早期组（≥ 10周）流产组织染色体异常发生率比较显著增高[84.43%（141/167）比53.93%（96/178）、59.42%（205/284）比9.28%（32/61）]，差异有统计学意义（P<0.01）。结论Array-CGH联合QF-PCR技术分析全面准确，互为补充。部分染色体异常在流产组织中较为常见，需重点检测分析。应对高龄孕产妇开展及时的产前遗传咨询与监测，对孕早期发生的流产警惕遗传学因素。

简介：摘要目的应用微阵列比较基因组杂交（Array-CGH）联合荧光定量聚合酶链反应（QF-PCR）检测分析自然流产组织，探索该联合检测手段的特点与应用，进而为自然流产发生的遗传学因素提供参考。方法采集2016年7月至2019年9月就诊于大连市妇女儿童医疗中心的345例自然流产患者的流产组织，并采用Array-CGH联合QF-PCR技术进行遗传变异情况检测，分析其检测结果。结果QF-PCR技术共检测出染色体数目异常213例，Array-CGH技术补充检出染色体结构异常24例，综合遗传学异常检出率达到68.7%（237/345），并检测出本地区常见流产组织染色体异常类型。高龄孕妇（≥ 35岁）与非高龄组（<35岁）、孕早期孕妇（<10周）与非孕早期组（≥ 10周）流产组织染色体异常发生率比较显著增高[84.43%（141/167）比53.93%（96/178）、59.42%（205/284）比9.28%（32/61）]，差异有统计学意义（P<0.01）。结论Array-CGH联合QF-PCR技术分析全面准确，互为补充。部分染色体异常在流产组织中较为常见，需重点检测分析。应对高龄孕产妇开展及时的产前遗传咨询与监测，对孕早期发生的流产警惕遗传学因素。

简介：目的探讨聚合酶链反应（PCR）在细菌和真菌性中枢神经系统感染快速诊断中的临床价值。方法收集137例中枢神经系统感染患者留存的脑脊液进行DNA提取,采用细菌和真菌通用引物扩增病原体DNA并进行序列测定,对比同期脑脊液培养方法与PCR方法的检测结果。结果137份脑脊液标本中PCR检测到细菌50株,真菌6株,脑脊液培养检测到细菌38株,真菌5株;PCR检测法灵敏度为40.9%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为38.2%,诊断效率为56.7%;传统培养法则分别为31.4%、100%、100%、34.7%、44.4%。PCR的灵敏度、阴性预测值和诊断效率均明显优于传统培养方法,特异度和阳性预测值与培养法相当,两方法鉴定菌种的符合率为97.7%。结论通用引物PCR扩增法具有快速、特异、灵敏、准确等特点,对细菌和真菌性中枢神经系统感染的病原学快速诊断具有重要的应用价值。

简介：摘要目的探索外周血和组织样本检测结直肠癌大鼠Kirsten肉瘤病毒基因同源基因(KRAS)的一致性，评估其指导结直肠癌患者靶向治疗的价值。方法收集2015年1月至2021年8月江南大学附属医院451例结直肠癌患者的外周血及手术切除的肿瘤组织样本；外周血进行IAMB检测，组织样本同时进行组织IAMB法和Sanger测序。并选择其中44例样本同时进行外周血NGS检测和组织参比试剂盒检测。分析不同方法检测患者外周血和组织KRAS基因状态的一致性。同时收集患者的临床病理特征和靶向治疗相关随访数据。不同检测方法检测结果差异的比较使用配对样本McNemar检验；外周血和组织样本的一致性检验使用Kappa检验。结果IAMB法和Sanger测序法检测结直肠癌组织样本KRAS基因的突变率分别为47.9%(216/451)、45.2%(204/451)，IAMB法检测外周血中KRAS基因的突变率为39.0%(176/451)，外周血和组织IAMB法检测的阳性符合率、阴性符合率、总符合率分别为72.2%(156/216)、91.5%(215/235)、82.3%(371/451)。1例组织样本未检测到KRAS基因突变而外周血检测到KRAS基因突变的患者接受西妥昔单抗治疗2个月后即发生进展，其疗效低于文献中的中位无进展生存期。结论外周血IAMB法检测结直肠癌患者KRAS基因有助于结直肠癌患者个体化治疗辅助诊断。

简介：目的了解肺炎衣原体(TWAR)与心脏病的相关性，多方面探讨冠心病的发病因素。方法采用聚合酶链反应(PCR)法，对冠心病100例，高血压病40例，心肌疾病40例，心律失常40例，正常对照60例，血清TWARDNA进行检测。结果不同组别间TWAR阳性率的差别有高度显著性(χ2＝30.52，P＜0.05)，其中冠心病占31.0%，心肌疾病占32.5%，高血压7.5%，心律失常12.5%，正常对照1.67%，提示冠心病和心肌疾病TWAR阳性率较高。结论冠心病、心肌疾病TWAR阳性检出率比高血压，无临床心脏病证据的心律失常和正常对照组高，提示TWAR是引起冠心病和心肌疾病的原因之一。