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12 个结果
  • 简介:瞄准:检验在精子DNA损坏和精子之间的关系原子嘘染色的(H2B)。方法:我们从14连续asthenoteratozoospermic评估了精子样品不肥沃的人和六连续肥沃的控制。精子原子嘘染色的(H2B)和精子染色质正直(由精子染色质结构试金估计了并且表示了使用(i)DNA破碎索引的百分比[%DFI]并且(ii)高DNA污点能力[%HDS)])被评估。结果:HistoneH2B免疫细胞化学表明了二个原子染色模式:(i)焦点的有小斑点的染色;并且(ii)扩散染色。不肥沃的人有展出弥漫的H2B染色比的精子的一个更高吝啬的百分比做了肥沃的人(7.7%±4.6%vs.1.6%±1.2%,分别地P<0.01)。我们观察了在精子的比例之间的重要关系与弥漫原子嘘一染色和两精子%DFI(r=0.63,P<0.01)并且精子%HDS(r=0.63,P<0.01)。结论:数据证明不肥沃的人有精子的一个更高的比例与弥漫嘘一H2B与做肥沃的人并且建议精子DNA损坏力量比,至少部分地,由于反常地高嘘一个H2B层次。

  • 标签: 精子 精液DNA 组蛋白 男性不育症
  • 简介:从不肥沃的夫妇的28个男搭挡镇定的精液样品被划分成三相等的aliquots并且与三准备了选择媒介,例如PureSperm吗?(Nidacon,Gothenburg,瑞典),Sil选择加?(Fertipro,Beernem,比利时)并且SpermGrad?(Vitrolife,Gothenburg,瑞典)。在精液参数的吝啬的百分比的差别被重复措施分析估计。精子DNA的关联损坏刻痕结束标记,由终端deoxynucleotidyltransferasedUTP测量了(TUNEL)试金,并且鱼精朊缺乏测量了由与精子参数染色的chromomycinA3(CMA3),被皮尔森的关联决定。在有所有三媒介的准备以后,精子集中减少了(P<0.05)当有正常形态学的精子的百分比增加了时(P<0.05)。精子活动性,快速的活动性和进步能动集中(PMC)的百分比增加了(P<0.05)为每这些参数,PureSperm准备给了最好的结果(P<0.05)。DNA损坏的百分比在PureSperm和Sil选择正准备减少了(17.9%和31.3%,分别地P<0.05)并且在SpermGrad准备增加了(56.3%,P<0.05)。鱼精朊缺乏也在所有三种媒介减少了,59.3%,47.7%和40.3%为PureSperm,Sil选择加和SpermGrad准备,分别地(P<0.05)。损坏DNA的精子的百分比否定地与精子活动性,快速的活动性和PMC的百分比被相关,但是断然与静态的活动性被相关(P<0.05)。这比较学习和关联分析表明PureSperm准备与最好的活动性和鱼精朊缺乏的最低百分比产出精子。Sil选择正准备与DNA损坏的最低数量产出精子。SpermGrad准备与正常形态学有精子的一个高百分比,而且与DNA损坏有精子的最高的百分比。精子DNA损坏与精子活动性,快速的活动性,静态的活动性和PMC的百分比被相关。

  • 标签: 精液参数 精子 DNA 损坏 精子准备媒介 精子鱼精朊缺乏
  • 简介:在男性配子各种不同的DNA异常中,DNA断裂最为常见,尤其是在不育症患者中。目前越来越多的研究表明,DNA断裂并不显著影响精子细胞的存活率、活动率、形态以及与卵细胞的结合能力。研究还证明,卵母细胞在一定程度上可以修复受损的DNA,其修复程度依赖于精子细胞DNA的损伤类型和卵母细胞的质量。因此,研究精子DNA断裂(SDF)在自然分娩或辅助生殖技术助孕中对胚胎发育、胚胎着床、妊娠结果、子代健康的影响变得非常重要。至今,针对SDF对生殖的影响的研究极少,且研究报道的结论很不一致。导致这种不一致的原因可能与检测SDF的手段不同、实验设计不同和精液标本选择标准不同有关。因此,目前还不能确定是否将SDF检测拽术砬用于受精评估和ART技术中。这表明,制定SDF检测技术的标准化方法势在必行,另外关于SDF对ART的影响有必要进行进一步的临床研究。

  • 标签: 辅助生殖技术 COMET DNA断裂 ICSI 体外受精.胚胎转移 精子染色质结构试验
  • 简介:男不孕可能清楚地在人的精子与异常DNAmethylation模式被联系。在氧化应力和精子染色体的全球methylation地位之间的一个协会也被建议了。现在的学习的目的是决定全球精子DNAmethylation地位是否在染色体的搬运人的精子被影响结构的错误。在5-methylcytosine之间的关系(m5C)在精子和染色质正直地位的层次被评估。学习病人包括了染色体的男搬运人有繁殖失败的结构的错误(n=24),并且控制包括了normozoospermic精子志愿者(n=23)。全球m5C水平用薄层的层析(TLC)和immunofluorescence被测量(如果)技术。精子染色质正直用染色的苯胺蓝色(AB)和TUNEL试金被估计。吝啬的m5C层次在调查染色体之间是类似的结构的错误搬运人(P)和控制(K)。然而,精子染色质完整测试比在控制在chromosomal重新整理搬运人揭示了显著地更高的值(P<;0.05)。尽管在精子染色质正直地位和精子DNA破碎和m5在两个都分析的组(P对K)并列的C水平以一种清楚地相反的方式被代表,低染色质正直可能与在染色体的搬运人观察的精子DNA的高hypomethylation地位被联系结构的错误。

  • 标签: 5-methylcytosine 染色质正直 chromosomal 重新整理 染色体 translocation 全球 DNA methylation 男不孕
  • 简介:RaufS等人利用电化学DNA生物传感器技术进行了有关枸橼酸西地那非(万艾可)与DNA之间相互作用的一项研究[BiosensBioelectron,2007,22(11):2471-2477]。该研究采用DNA修饰的玻璃样炭电极以及恒流电位测定法和微脉冲伏安法加以测定。通过测定不同电位时枸橼酸西地那非(万艾可)与DNA的相互作用来阐明二者的结合机制,以鸟嘌呤氧化峰面积或蜂曲线的下降程度作为0.2M乙酰缓冲(pH5)体系中二者相互作用程度的指示。所得的恒流电位测定法和微脉冲伏安法的结合常数(K)分别为(2.01±0.05)×10^5和(1.97±0.01)×10^5M^-1。

  • 标签: DNA修饰 传感器技术 相互作用 万艾可 电化学 生物
  • 简介:精索静脉曲张与减少的男繁殖潜力被联系了。与在biomolecular技术的进展,更好理解涉及精索静脉曲张挑起的阴囊的损坏的机制是可能的。尽管机制充分还没被描述了,它是可能的是multifactorial,当前的证据在联系精索静脉曲张的男subfertility的致病建议反应的氧种类(ROS)和结果的氧化压力(OS)的中央角色。过多的ROS与精子DNA破碎被联系,它可以调停与精索静脉曲张有关的差的精子功能和授精结果的临床的表明。ROS/OS和DNA破碎测试有潜力与常规精液分析相比提供另外的诊断、预示的信息并且可以在单个病人指导治疗学的管理策略。

  • 标签: 抗氧化剂 不孕 男复制 氧化应力 精子 DNA 损坏 精子 DNA 破碎
  • 简介:为精子的准备的许多技术当前是可得到的,哪个通常采用的大多数是密度坡度centrifugation(DGC)和游泳起来(啜)。迄今为止,这些方法看起来在为帮助繁殖技术(艺术)选择功能的精子有效,但是他们可以在精子DNA上有否定效果。在这研究,处理技术消除单个海滨的包含的精子和双海滨DNA损坏的这些精液的能力被在157件精液样品的二尾巴的彗星试金和精子染色质分散测试从寻求帮助繁殖治疗的病人估计。我们显示的结果啜并且DGC在消除包含双海滨DNA损坏和精子与的精子是同等地有效的高度损坏了(降级)DNA由存在描绘了单个海滨并且双海滨DNA裂缝。然而,DGC比在选择从单个海滨的DNA损坏是免费的精子啜是更有效的。未来研究应该描述DNA损坏的各种各样的类型的重要性并且检验处理在每个实验室过去常决定他们的能力消除DNA损坏并且因此,经由艺术阻止基因变化的潜在的传播的协议的精子。

  • 标签: DNA损伤 技术能力 精子 双链 删除 辅助生殖
  • 简介:前列腺癌作为欧美国家男性常见的恶性肿瘤,具有明显的遗传倾向。目前研究显示,DNA修复基因(如BRCA2)的突变与前列腺癌疾病进展和癌症相关致死率密切相关。然而,针对未发现家族易感性的局灶性前列腺癌患者,因DNA修复基因突变的水平极低,难以进行常规检测。而对于转移性前列腺癌患者,目前关于其DNA修复基因突变的频率鲜有报道。

  • 标签: DNA修复基因 基因突变频率 前列腺癌患者 转移性 家族易感性 恶性肿瘤
  • 简介:目的筛选和鉴定新的前列腺癌相关基因,探讨其在前列腺癌中的表达情况,为研究其仵前列腺癌发生、发展中的作用奠定基础。方法通过生物学信息筛选,RT—PCR验证,确定前列腺癌相关新基因PCAG1。然后提取14例配对前列腺癌及癌旁组织标本中总RNA,经逆转录获得cDNA,应用RTPCR检测标本中PCAG1mRNA表达水平。免疫组织化学染色检测PCAG1在38例前列腺癌组织及配对邻近正常组织中蛋白表达水平,免疫荧光法确定PCAG1蛋白亚细胞定位,并通过统计学方法分析PCAG1表达水平与前列腺癌的关系。结果RT—PCR及免疫组化显示PCAG1在前列腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,且只在少数几种正常组织中低表达,多数正常组织中无表达,呈现明显的前列腺癌特异高表达的特性;免疫荧光确定PCAG1蛋自主要定位于线粒体中。结论PCAG1在前列腺癌组织中高表达,提示可能与前列腺癌的发生、发展相关。PCAG1独特的转录调控模式预示其具有潜在的临床应用价值。

  • 标签: 前列腺肿瘤 前列腺癌相关基因 PCAG1
  • 简介:目的构建长链非编冯RNABRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BREAS1的全长目的片段,将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDHCMVMC8EF1分别双酶切后进行连接,转化到感受态大肠杆菌后,通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落,提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒,并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2,分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BREAS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BREAS1全长序列,经过双酶切、连接、转化、筛选及I)NA测序,成功构建重组慢病毒载体质粒pCDH-BRE-AS1。通过荧光显微镜检测,几乎昕有经过嘌呤霉素筛选的OSRC2细胞均具有绿色荧光,显示其被重组慢病毒感染;荧光实时定量PCR显示,感染了RNABRE-AS1慢病毒的OSRC2细胞中,BREAS1的表达水平上升了38.5倍。EdU插入实验显示BREASl抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体,并证明BREAS1能抑制肾癌细胞增殖。

  • 标签: BRE-AS1 慢病毒载体 肾细胞癌 长链非编码RNA
  • 简介:几项回顾性研究提出证据表明膀胱癌能够通过检测尿液中肿瘤细胞DNA而被诊断出。本研究通过一个前瞻性的盲法试验检验尿液DNA检测是否能取代膀胱镜检在肉眼血尿的初始评估中的地位。对475例肉眼血尿患者进行了泌尿系的标准检测,包括膀胱镜检和CTU,并且提供了行膀胱镜检前(n=461)和膀胱镜检后(n=444)的尿液样本。样本中的细胞都是通过特殊的筛选设备收集的,

  • 标签: DNA检测 膀胱镜检 肉眼血尿 尿路上皮癌 盲法试验 筛选设备