简介：

简介：纪录片《断刀》讲述的是朝鲜战争爆发后，中国这个硝烟方散的国家，在唇亡齿寒、家国安危的大义面前，派出中国人民志愿军赴朝，与朝鲜人民并肩作战，经过数次惨烈的战役最终将战线稳定在“三八”线一带的历史。

简介：Name姓名:张东健(JangDongGun)Dateofbirth生日:1972年3月7日March7th1972Height身高:180cmHobby兴趣:唱歌singing张东健曾主演不只一个而是两个破纪录的票房大片,1992年,因一次选秀赛初入娱乐圈。他先是在电视连续剧,如在《最后一场球赛》,同主演沈银河共同表演,最终与金喜善共同出演了他的电影处女作《无独有偶》(1997)。

简介：一位“90后”女孩儿“摔”成植物人，其男友不离不弃举债医治，被当地媒体称为“爱情传奇”。植物人女孩儿被家人接回后，却突然开口说话，道出“爱情传奇”背后的惊天真相；男友多次实施家暴，最终将其打残……当地警方立案一个多月后，家暴嫌犯被抓归案。

简介：摘要：

简介：目的构建超抗原SEA和喉癌来源的MAGE-A3基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达.方法分别用RT-PCR方法及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMAGEA3-IRES-SEA.经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA、MAGE-A3基因的表达.结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3基因和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组.重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平表达.结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础.

简介：摘要目的探讨高效抗反转录病毒治疗艾滋病患者早期生活质量的影响。方法选取2012年1月至2014年6月期间在我院接受治疗的艾滋病患者35例，所有患者接受高效抗反转录病毒治疗，12个月后对患者进行随访，了解其在对早期生活质量上的改善。结果治疗后，患者的体重与CD4+T细胞计数均获得了明显的改善，与治疗前比较具有统计学差异（P＜0.05）。此外，治疗后患者诺丁汉健康量表评分均获得了一定的改善，但在社会孤独感评分上，与治疗前比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论高效抗反转录病毒治疗艾滋病可在一定程度上提高患者的早期生存质量，但还需通过与患者交流沟的方式减轻患者的社会孤独感，鼓励患者正视自己的疾病，减轻自身的孤独。

简介：摘要目的在艾滋病患者中联合应用高效抗反转录病毒进行治疗，探究分析该治疗措施对患者生活质量产生的影响。方法将2016年4月—2018年4月作为研究时间段，在该时间段中从我中心选取100例艾滋病患者进行探究分析，所有患者均采用联合高效抗反转录病毒进行治疗，并展开为期6个月的跟踪随访，最终评价患者的生存质量。结果分别对治疗0/2/4/6个月后的生存质量进行评价，独立程度评分呈现出逐渐上升的趋势，生存质量在各个时间点上的评价差异具有统计学意义（P＜0.05）；而在治疗7到24个月时，患者生存质量评分达到最高值，各个时间点的生存质量评价差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论将联合高效抗反转录病毒治疗应用到艾滋病患者中的效果显著，而持续治疗7到24小时的情况下，可进一步改善患者的生活质量。

简介：目的对中国实验小型猪中内源性反转录病毒的存在与mRNA的表达进行检测,摸清中国实验小型猪中内源性反转录病毒的携带情况.方法根据已发表的PERV的序列设计并合成了三对引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)的存在与表达;同时,根据目前通用的env基因分型方法合成了三对用于分型检测的引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增的方法,对来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞的DNA和RNA样品进行了检测.结果在6个被检DNA样品中均检出了PERV特异性DNA的存在;同样,在被检RNA样品中均有PERV特异性RNA的表达,且所表达的PERV均为A型和B型,在所有样品中均未检出C型PERV的表达.结论初步表明中国实验小型猪中存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA的形式表达,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.

简介：缺血性脑损伤后的病理改变主要表现为：脑缺血后梗死病灶中心的梗死区、围绕梗死区的半暗带区及外围的周边区域。多年来缺血性脑血管病的治疗策略主要是通过改善血流动力学或其他手段阻断半暗带细胞后续的系列级联病理变化，如能量代谢异常、电解质紊乱、自由基大量生成、核酸内切酶激活等。从而保护或抑制半暗带组织神经元的损伤，改善病情。近年来，随着分子生物学技术的迅猛发展，人们发现缺血性脑损伤后细胞的死亡和功能障碍往往伴随或源自特定基因表达的变化。因此，基因治疗有可能足缺血性脑损伤治疗新途径和新策略的希望所在。

简介：摘要基因治疗在眼部疾病中的应用逐渐从单基因遗传性疾病扩展至多基因、多因素、常见病和慢性疾病中，这一新兴治疗方式仍处于早期探索阶段，预期获益和风险仍然存在很大的不确定性。在基因治疗药物的递送过程中，病毒载体是目前最成熟和应用最广泛的载体之一，其相关免疫的发生程度将影响基因治疗近期和远期效果，甚至造成永久性的视功能严重损伤。由此，载体相关免疫反应是基因治疗中安全性和长期疗效维持的重点和挑战，因此在基因治疗的围手术期和随访中应该重视载体相关免疫炎症监测，并采取积极、恰当的处理措施，从而取得最佳视功能获益。

简介：摘要目的探讨聚凝胺对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDCs)的毒性作用以及聚凝胺促慢病毒载体转染BMDCs的最佳浓度。方法制备BMDCs悬液，随机分为实验组和对照组。实验组用不同浓度的聚凝胺处理，对照组中加入等量磷酸盐缓冲液(PBS)，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双标记法评价聚凝胺对BMDCs的毒性作用。向BMDCs悬液中加入慢病毒载体[感染复数(MOI)＝10]，实验组用不同浓度的聚凝胺处理，对照组加入等量PBS，每天采用荧光显微镜动态观察各组绿色荧光蛋白(GFP)表达。刺激BMDCs成熟后，采用流式细胞术定量检测GFP表达。各组之间两两比较采用独立样本t检验。结果聚凝胺浓度≥11 mg/L时，活细胞数目显著减少[吸光度(A)值(0.881±0.007)比(1.031±0.017)，t＝7.832，P<0.05]，差异有统计学意义。安全浓度范围内，使用聚凝胺能显著提高GFP表达，聚凝胺浓度为8 mg/L时，GFP表达最高。结论聚凝胺对BMDCs存在剂量依赖的毒性作用，安全浓度范围内，聚凝胺可明显提高慢病毒载体对BMDCs的转染率，最适浓度为8 mg/L。

简介：目的：构建和鉴定靶向E2F-1基因的RNA干扰慢病毒载体。方法：体外合成两对互补并编码靶向E2F-1基因的特异性短发夹RNA（shorthairpinRNA,shRNA）序列和一个阴性对照组的寡核苷酸,克隆到pLKO.1-PURO-U6（AgeI/EcoRI）质粒载体中,经酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,将以上质粒分别和包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒。各组病毒载体转染Tca8113细胞后,运用Real-TimePCR和Western检测三组E2F-1mRNA和蛋白的表达水平。结果：经酶切和测序证明,pLKO.1-PURO-U6-E2F-1shRNA序列正确;转染后,各组慢病毒载体中,第一组质粒感染后的Tca8113细胞中E2F-1基因的核酸电泳条带明显减弱,Western检测出E2F-1蛋白的表达降低。结论：靶向E2F-1基因的shRNA慢病毒载体构建成功,并可特异性沉默E2F-1基因的表达,为研究E2F-1在口腔鳞癌的发生发展中的作用提供了初步的实验基础。

简介：目的：构建大鼠组蛋白去乙酰基转移酶（histonedeacetylase8，HDAC8）基因过表达的慢病毒载体，转染大鼠骨髓基质细胞（bonemarrowstromalcells，BMSCs）后观察HDAC8的表达。方法：采用DNA重组技术将HDAC8基因插入到慢病毒表达载体质粒pGC-FU中，重组获得慢病毒载体pGC—FU—HDAC8。重组慢病毒载体经过测序鉴定后，转染293T细胞生产病毒液，用得到的病毒液转染大鼠BMSCs，实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法分析转染前后HDAC8表达情况。结果：测序结果证实HDAC8基因正确插入载体中，成功构建大鼠HDAC8基因过表达载体。大鼠BMSCs转染后HDAC8mRNA及蛋白表达显著上调。结论：针对大鼠HDAC8基因过表达慢病毒载体构建成功，并能有效增强BMSCs中HDAC8基因的表达。

简介：目的探讨细胞分裂周期蛋白6（Cdc6）RNAi慢病毒载体的构建。方法设计5个靶向Cdc6的RNA干扰靶点序列（Target1、2、3、4、5）,构建靶向Cdc6的RNA干扰载体和Cdc6过表达载体,共转染293T细胞进行外源筛靶,采用Westernblot检测Cdc6蛋白表达情况,判断不同靶点的干扰效果,选择两条最佳RNAi有效靶点序列,制备靶向Cdc6的慢病毒载体,并将其转染Tca8113细胞,通过Real-timeRT-PCR和Westernblot检测Cdc6mRNA和蛋白表达水平,以MTT法测定Tca8113细胞生长水平。结果成功构建Cdc6siRNA表达质粒及Cdc6过表达载体质粒,经外源筛靶实验显示,相对阴性对照组（NC）,Target3和Target4靶点对Cdc6蛋白表达的敲减作用最显著,敲减率分别为69.15%和84.85%。在Tca8113细胞中,与NC组比较,靶向Cdc6慢病毒载体KD1和KD2组Cdc6mRNA表达的敲减率分别为50%和65%;Cdc6蛋白表达水平分别下降65.87%和79.38%;Tca8113细胞生长抑制率分别为25.84%和30.34%。结论成功构建两条靶向Cdc6RNAi慢病毒载体：Target3和Target4。

简介：

简介：摘要目的探讨人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染/艾滋病患者接受抗反转录病毒治疗(anti-retroviral therapy，ART)后发生低病毒血症(low level viremia，LLV)对其治疗预后的影响。方法纳入2015年1月至12月在广州医科大学附属市八医院感染门诊接受ART≥1年且存在LLV的HIV感染/艾滋病患者(LLV组)，根据性别、年龄、传播途径1∶1匹配血浆HIV-1 RNA<50拷贝/mL的患者为对照组(抑制组)。根据病毒载量将LLV组分成3个亚组，其中LLV-1亚组指HIV-1 RNA为50～200拷贝/mL，LLV-2亚组指HIV-1 RNA为201～400拷贝/mL，LLV-3亚组指HIV-1 RNA为401～1 000拷贝/mL。分析LLV对后续3年抗病毒治疗应答的影响。统计学分析采用威尔科克森符号秩检验、Kruskal-Wallis检验和χ2检验。结果LLV组共纳入137例患者，其中男111例，女26例，年龄为(39.5±13.5)岁。同时抑制组纳入137例患者。LLV-1、LLV-2和LLV-3亚组分别为93、25和19例。LLV组和抑制组ART前CD4+T淋巴细胞计数与CD4+T淋巴细胞计数/CD8+T淋巴细胞计数比值差异均无统计学意义(均P>0.05)。随访3年，LLV组累计发生病毒学失败患者比例[7.3%(10/137)]高于抑制组[1.5%(2/137)]，差异有统计学意义(χ2＝5.578，P＝0.018)；LLV-1、LLV-2和LLV-3亚组分别有8例(8.6%)、2例(8.0%)和0例发生病毒学失败，各亚组病毒学失败发生率差异无统计学意义(P>0.05)。LLV组和抑制组在随访1、2、3年时的CD4+T淋巴细胞计数差异均无统计学意义(均P>0.05)，LLV组在随访1、2、3年时的CD4+T淋巴细胞计数/CD8+T淋巴细胞计数比值均低于抑制组，差异均有统计学意义(Z＝-3.183、-2.094、-2.312，均P<0.05)。LLV-1、LLV-2和LLV-3亚组的CD4+T淋巴细胞计数/CD8+T淋巴细胞计数比值在随访1、2、3年时的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论ART超过1年存在LLV的HIV感染者/艾滋病患者更易发生病毒学失败，且免疫功能恢复减慢，提示需对其尽早给予干预。

简介：摘要：从目前自动扶梯的运转来看，逆转事故是造成乘客伤亡的重要原因。基于自动扶梯的运行情况，有效的预防逆转事故的发生，不但能够提高自动扶梯的运行安全性，同时还能够避免乘客受伤。因此，我们应当认真分析自动扶梯的逆转事故的原因及危险因素，并制定具体的防护措施，使整个自动扶梯的逆转系统得到有效的预防和提升。本文结合自动扶梯的运行情况，对试运转事故的原因进行了分析，并提出了有效的预防和治理方案，对自动扶梯的逆转事故预防起到了重要作用。

简介：用1羽份重组鸡痘病毒vFV282活疫苗对7日龄商品鸡分别进行刺种免疫和肌注免疫，28d时刺种进行二次免疫，通过不同时间阶段脾脏淋巴细胞转化指标分析表明，ConA刺激脾淋巴细胞增殖反应的净增值（OD570nm）于免疫后7d时明显升高0.092，28d时达到最高峰0.155，42d时下降至0.032，首次免疫后刺种组明显优于肌注组，二次免疫高于一次免疫组。

简介：肺癌是影响人类健康最危险的恶性肿瘤之一，近二十年来五年生存率并没有显著的提高，与治疗方法上缺少有效突破有一定的关系。已经证明肺癌与很多癌基因的激活和抑癌基因的缺陷或缺失有关，后者主要有p53、p16、p15基因。近年来肺癌的基因治疗成为热门，也取得了突飞猛进的发展，批准进入临床试验的基因制剂和治疗方案逐年增多，预示基因治疗将成为21世纪最重要的治疗手段。