简介:目的:通过对TNF及铜绿假单胞菌(PAO1)刺激肺上皮细胞株(A549)表达胞浆蛋白NOD2的研究,进一步了解NOD2在机体天然免疫病原体识别过程中的作用.方法:培养呼吸道肺癌上皮细胞株A549,以TNF、铜绿假单胞菌PAOI刺激细胞,并以未刺激组做对照,通过半定量RT-PCR技术观察胞浆蛋白NOD2的表达变化.结果:与未刺激组比较,TNF、铜绿假单胞菌PAO1都能够上调A549细胞NOD2蛋白的表达.结论:TNFα与铜绿假单胞菌PAO1刺激能增强A549细胞胞浆蛋白NOD2的表达,提示细胞内受体NOD2在呼吸道天然免疫病原体识别过程中可能起重要作用.
简介:摘要目的评价背根神经节核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)在大鼠神经病理性痛形成中的作用。方法成年雄性SPF级SD大鼠32只,体重240~260 g,2~3月龄,采用随机数字表法分为4组(n=8):对照组(C组)、神经病理性痛组(NP组)、阴性对照siRNA组(N组)和NOD2-siRNA组(R组)。N组鞘内注射1×108 IFU/ml阴性对照siRNA 10 μl,R组鞘内注射1×108 IFU/ml NOD2-siRNA 10 μl,连续鞘内注射3 d,1次/d。于鞘内注射后2周,采用坐骨神经选择性损伤(SNI)法制备神经病理性痛模型。于SNI前1 d、SNI后1、3、7、10、14和28 d时测定机械缩足反应阈(MWT)。于末次行为学测定结束后,处死大鼠,取L4-6背根神经节组织,采用Western blot法测定NOD2的表达,实时定量PCR法测定TNF-α、IL-1β、IL-6、NOD2的mRNA表达。结果与C组比较,NP组SNI后各时点MWT降低,背根神经节NOD2及其mRNA、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达上调(P<0.01);与NP组比较,R组SNI后各时点MWT升高,背根神经节NOD2及其mRNA、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达下调(P<0.01),N组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠神经病理性痛形成的机制可能与背根神经节NOD2表达上调,进而上调促炎因子表达有关。
简介:摘要目的了解肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)假定蛋白Cpn0423的生物学活性及其诱导宿主细胞炎症反应的作用途径。方法生物信息学软件初步分析Cpn0423的生物学特性,激光共聚焦显微技术检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体2(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor 2, NOD2)在骨髓源性的巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs)中的亚细胞定位。采用NOD2-siRNA干扰试验检测其抑制BMDMs细胞中NOD2的表达水平,ELISA法检测Cpn0423诱导BMDMs细胞分泌的巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)和IL-6,PCR法检测Cpn阳性患者支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中Cpn0423 DNA水平。结果Cpn0423与衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白同源性为85%~93%。NOD2-siRNA能有效抑制BMDMs细胞中NOD2 mRNA的表达水平。NOD2-siRNA干扰后,Cpn0423诱导BMDMs细胞分泌的细胞因子MIP-2 [(920.5±99.1) pg/ml vs (130.1±11.5) pg/ml,P<0.001]和IL-6 [(266.2±58.4) pg/ml vs (165.7±21.5) pg/ml,P<0.001]水平显著降低。83.3%(10/12)Cpn阳性患者BALF中Cpn0423 DNA为阳性,对照组未检出Cpn0423 DNA。结论Cpn0423通过NOD2途径诱导宿主细胞免疫应答,与Cpn引起机体慢性炎症损伤密切相关。
简介:目的探讨模式识别受体(nucleotidebindingoligomerizationdomain2,NOD2)在小鼠心肌梗死后心肌纤维化中的作用及其分子机制。方法雄性C57/BL6野生型小鼠18只,永久性结扎冠状动脉前降支复制心肌梗死模型,随机分为心肌梗死组(myocardialinfarction,MI)组、NOD2激动剂胞壁酰二肽(muramyldipeptide,MDP)组(MI+MDP)及假手术组(Sham),其中MI+MDP组在造模前30min给予小鼠腹腔注射MDP(100μg/只),MI组及Sham组均给予同等剂量的生理盐水。一周后取材,Masson染色观察心脏纤维化的程度,HE染色观察心肌组织形态学改变,免疫组化染色观察巨噬细胞的浸润情况,RT-PCR方法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemotacticprotein1,MCP-1)表达,Westernblot方法检测核因子-κB(nucleartranscriptionfactor-κB,NF-κB)的蛋白表达水平。结果与心肌梗死组比较,NOD2激动剂组巨噬细胞浸润增多,IL-6和MCP-1表达水平增加,NF-κB/p65的表达增加,心肌间质纤维化程度加重。结论NOD2可能通过激活NF-κB/p65信号通路,介导炎症反应参与心肌梗死后心肌纤维化过程。
简介:摘要背景克罗恩病(CD)是一种慢性非特异性的胃肠道炎症性疾病。迄今CD的发病机制尚未完全明确,但是大量来自于包括全基因组关联研究在内的有关遗传危险因子的资料明显地加深了我们对其的理解。最近的研究揭示NOD2和STAT4基因的遗传变异与CD发病呈正相关。目的本研究分析NOD2和STAT4基因的多态性与中国汉族人群CD发病的相关性。方法选取汉族克罗恩病患者66例与健康对照者66名作为研究对象,抽提基因组DNA,采用聚合酶链式反应和直接测序方法检测克罗恩病患者和健康对照者NOD2和STAT4的基因型,计算基因型与基因频率,采用χ2检验进行组间比较。结果NOD2基因rs2066842位点CC、CT和TT基因型频率CD组分别为90.91%、9.09%和0%,健康对照组分别为93.94%、6.06%和0%,CD组C和T等位基因频率分别为95.5%和4.5%,健康对照组分别为97.0%和3.0%;STAT4基因rs7574865多态位点TT、TG和GG基因型频率在病例组中分别为0.136,0.409和0.455,在对照组中分别为0.091,0.439和0.470,T和G等位基因的频率在病例组分别为0.341和0.659,在对照组分别为0.311和0.689。CD组与对照组间各位点的基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论虽然NOD2和STAT4基因的遗传变异与西方白种人CD的易感性相关,但是该基因多态性却罕与中国汉族人明显相关。
简介:TheserviceprovidedbytheGC(GammaCameras)intheNuclearMedicinedepartmentsfailsbecauseoftheirbreakdown,generallyduetotheassociatedelectronicsandnottothephysicaldetectioncomponents.Forthisreason,itwasdecidedtodevelopanelectronicsystemthatallowstherecoveryandoptimizationofdisusedGC,startingwiththedesignofthepreamplifierforaPMT(photomultipliertube).Thecircuitwasdesignedandsimulatedandthelistofcomponentsnecessaryfortheconstructionofthepreamplifierwasgenerated,aswellastheprintedcircuitboardwasdesignedforitsassembly.Bysimulatingthepreamplifierthisworkedinlinearmode.Thisdeterminesthattheamplitudeoftheoutputsignalisproportionaltotheamountofchargedeliveredbythedetector.ThiscardallowsanautomaticadjustmentofthesignalsofthePMTasdothemodernGC.
简介:HaveYouGotYourChinese"GreenCard"!¥LAOFUAnewlandofopportunity,orsimplyaquietspotfromwhichonecansitandwatchtherestoftheworldgoby...