简介:目的建立犬骨髓单个核细胞(Bonemarrowmononuclearcells,BMNCs)的分离培养、体外扩增和成骨诱导方法,为骨缺损的修复提供理想的骨组织工程种子细胞。方法用1.063g/mlpercoll液分离2.5mlBeagle犬骨髓,利用细胞贴壁筛选法进行分离、培养、扩增和成骨诱导。结果采用1.063g/mlpercoll液可获得纯度较高的BMNCs,接种细胞生长良好,平均倍增周期为1d,经成骨诱导培养后可定向分化为成骨细胞。结论采用1.063g/mlpercoll液能够较好的进行Beagle犬BMNCs的分离培养和体外扩增,分离得到的细胞具备骨髓基质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)的特性。
简介:摘要在无遮掩的外海进行沉桩施工,桩长超过打桩船极限打桩长度,且由于特殊原因,打桩设备无法更换时,沉桩施工的难度将非常巨大。本文就仰光外海引航站工程,谈谈外海施工遇到桩长超过设备打桩能力时的措施和“体外下桩”工艺在实际应用中的思考。
简介:目的研究人脐血来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkiller,CIK)体外培养扩增,并检测其功能。方法应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞,贴壁培养2h,获得悬浮单个核细胞,体外以重组人白介素-1、重组人白介素-2、γ-干扰素和CD3抗体诱导培养15d。在CIK发育过程中,在光镜下观察其生长情况,应用流式细胞仪检测CIK表型。采用MTT法检测CIK对肿瘤细胞的杀伤性。结果CIK前3d细胞扩增不明显,在培养4d后,细胞增殖,呈团,可观察到不规则形的细胞.细胞体积增大,胞质少、胞核大、圆.有时可观察到细胞分裂相。培养12d后CIK细胞高表达CD3^+CD56^+,CD3^+CD8^+细胞缓慢增长,CD3、CD4细胞有所增加,在d7之后有所下降,CD3^+细胞维持高水平且变化不明显。CIK细胞对2种来源于不同组织的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性。结论人脐血经重组人白介素-1、重组人白介素-2、γ-干扰素和CD3抗体体外诱导培养,能诱导出CIK,并对恶性肿瘤细胞有明显的杀伤活性。
简介:目的温对猴骨髓基质干细胞(BMSCs)进行体外培养及扩增,观察其原代及传代细胞的生长特点及生物学特点。方法抽取4只成年猴髂骨骨髓,用全骨髓培养法进行体外培养获得BMSCs,胰酶消化传代,用条件培养基培养传代细胞。逐日倒置显微镜观察细胞生长情况,对传代细胞进行HE染色及碱性磷酸酶(ALP)染色。结果成年雄性恒河猴BMSCs体外培养生长良好,原代细胞10-13d汇成单层,传代后4~7d长满瓶底。HE染色光镜下观察见BMSCs为单核细胞,细胞呈梭形、多角形,传代细胞碱性磷酸酶染色呈强阳性。结论猴BMSc的体外培养增殖能力强,可诱导为成骨细胞,可作为灵长类动物骨组织工程的种子细胞。
简介:摘要目的验证改良导管侧孔灌注法静态尿道压力(rest urethral pressure profile,RUPP)测定的准确性及分析其临床价值。方法分别用传统及改良法行RUPP体外试验,分析比较试验数据,得出结论。结果传统及改良RUPP组Pura、Pves、Puramax、Pves∆的结果分别为(13.73±0.94)、(8.53±0.82)cmH2O,(6.93±0.78)、(6.73±0.52)cmH2O,(47.00±1.91)、(46.87±2.97)cmH2O,(6.93±0.78)、(6.73±0.52)cmH2O。除Pura差异有统计学意义外(P<0.05)外,两组间Pves、Pves∆、Puramax差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论改良导管侧孔灌注法RUPP准确性与传统方法相当,且无需进行强制"Pura=Pves"操作,保证所有检测数据的真实性,或许是一种更理想的静态尿道压力检测方法。