简介：多重连接探针扩增技术（multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA）是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的新技术。该技术仅需20ng/μlDNA,即可通过简单的杂合、连接、PCR扩增及电泳步骤,在同一反应管中对四十多个不同的靶基因进行检测和定量分析。这一技术最先于2002年由荷兰的Schouten等[1]报道。如今短短几年中,该技术已被欧洲、亚洲等几十个实验室采用。迄今为止,已有150多篇不同领域采用该技术方法的报道在重要刊物上发表。

简介：目的：探讨TaqmanMGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的可靠性。方法：采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA含量，TaqmanMGB双探针方法和测序方法检测其YMDD变异，以测序方法为参考方法，评价TaqmanMGB双探针方法的可靠性。结果：246例HBVDNA阳性患者血清标本中,TaqmanMGB双探针方法阳性检出率100％，100例正常对照全部为阴性；YMDD无突变106例，YMDD有突变（YIDD变异＋YVDD变异）140例，与核酸测序方法比较，符合率100％。该方法经过敏感度实验，最低检出下限为1×10^3copies／ml。结论：TaqmanMGB双探针方法能便捷、灵敏、特异地检测YMDD基序变异情况，适用于临床检测慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗的YMDD基序变异。

简介：目的:探索建立一种利用核酸酶免疫试验中探针的熔解温度差异检测已知突变位点的方法.方法:目的靶基因经扩增后,5'末端标记洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)的等位基因探针与已结合在酶标板上的扩增产物杂交,其杂交的探针-DNA二聚体的碱基错配与未错配之间存在变性温度差异.选择适宜的熔解温度进行已知突变位点的检测,并利用酶联免疫吸附试验对标记探针进行识别、放大和结果判断.结果:实验结果表明,当熔解温度为37℃时,扩增产物的加样量为5μl/孔和检测探针加入量为10pmol/孔时所测得A450值为0.800～0.923.等位基因检测探针的熔解温度为53℃,P1、P2与靶DNA结合率分别为86%和16%.当P1、P2按不同比例杂合时,其与结合率存在着明显的线性关系(r=0.9985).从8例人类乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性的血清标本检测中证实1例酪氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YVDD)突变、3例野生型,其余4例可能是杂合型突变.结论:本法具较高的检测灵敏度,且其突出的特点是能检测出标本中杂合突变所占的比例,间接反映出患者体内突变的类型和比例.这对于疾病的诊断、治疗、预后评价等都具有较高的价值.

简介：目的用合成仪自动地合成60mer寡核苷酸SARS冠状病毒的探针来制作寡核苷酸基因芯片。方法根据寡核苷酸探针的制作要求，选取SARS冠状病毒的特异序列30条、长度为60mer的片段进行合成，并对合成后的纯化方法与条件进行探索。将经12％变性PAGE胶纯化后的探针直接点样制备成12×12阵列的寡核苷酸的基因芯片，初步与处理后的临床样品进行杂交。结果经PAGE纯化的寡核苷酸探针的纯度高，能满足寡核苷酸芯片制备的要求。临床SARS患者标本进行处理后与寡核苷酸芯片杂交、扫描检测，效果较好。结论本室合成的60mer的寡核苷酸SARS冠状病毒探针能用于基因芯片的制备与检测，这为该疾病的实验室诊断提供了一种快速、平行的检测方法。

简介：目的：探讨多重连接探针扩增（multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA）技术在分析胚胎停止发育（以下简称胚胎停育）流产绒毛组织染色体非整倍体异常中的应用,探讨染色体非整倍体异常导致胚胎停育与胎儿性别、患者年龄间的关系。方法：收集324例临床诊断为胚胎停育患者的流产绒毛组织,采用MLPA技术进行染色体检测,并分析检测结果与胎儿性别及患者年龄间的相关性。结果：在324例胚胎停育患者中,检出绒毛染色体非整倍体异常共68例（20.99%）,其中常染色体三体33例（13-三体12例、18-三体6例、21-三体15例）,常染色体缺失3例（13-单体1例、21-单体2例）,性染色体数目异常32例（45-XO15例、47-XXY13例、47-XXX1例、47-XYY3例）。常染色体数目异常组与染色体数目正常组间的胎儿性别分布差异无统计学意义（P〉0.05）。对绒毛染色体数目正常组[平均年龄（32±6）岁]、常染色体数目异常组[平均年龄（34±7）岁]、性染色体数目异常组[平均年龄（28±6）岁]3组患者的年龄进行比较,发现差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：MLPA技术可以作为一种辅助检测手段,用于检测胚胎停育流产绒毛组织染色体的非整倍体异常,染色体数目异常导致的胚胎停育与胎儿的性别无关,但与患者的年龄有关,胚胎常染色体数目异常组的孕妇年龄大于染色体数目正常组及性染色体数目异常组。

简介：摘要目的探讨微生物检验人员生物安全防护存在的问题及对策。方法调查统计加强生物安全防护前后微生物检验人员的安全防护知识认知状况。结果加强生物安全防护管理之后，微生物检验人员安全防护知识认知水平显著提高，加强管理后实验室感染概念、职业感染危险因素、以及生物安全防护概念，等方面方面的了解明显高于之前，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论微生物检验人员实验过程当中存在较高的生物危险性，需要分析其中风险因素并加强安全防护管理，从而避免检验人员的感染。

简介：摘要目的探讨微生物检验人员生物安全防护存在的问题及对策。方法调查统计加强生物安全防护前后微生物检验人员的安全防护知识认知状况。结果加强生物安全防护管理之后，微生物检验人员安全防护知识认知水平显著提高，加强管理后实验室感染概念、职业感染危险因素、以及生物安全防护概念，等方面方面的了解明显高于之前，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论微生物检验人员实验过程当中存在较高的生物危险性，需要分析其中风险因素并加强安全防护管理，从而避免检验人员的感染。

简介：摘要目的通过对基层疾控机构病原生物实验室生物安全存在问题进行探讨，提出更好预防生物安全事故发生的对策。方法通过实验室的科学合理建设，硬件设施的改善，防护设备的加强和正确使用，完善体系，严格管理制度，强化人员培训等。结果通过对“硬件、软件、人员”这构成生物安全的三要素进行完善，最大限度的减少疾控机构实验室安全隐患，从根本上减少或尽可能杜绝生物安全事件发生。

简介：临床生物化学及检验是医学检验专业的主干课程之一,也是一门发展非常迅速的重要应用性学科。通过改革实验教学模式和方法,优化重组实验教学内容,增加了综合性、创新设计性实验的比例,改革实验教学考核方式,导入案例教学法。探索以问题和课题为核心的教学模式改革,调动了学生学习的积极性和创造性,使学生得到了创新性科学研究的锻炼,培养了学生独立思维能力和初步从事科研的能力。

简介：遵照“前期趋同，后期分化”的原则，《临床微生物学和微生物检验》第3版教材以“临床微生物学导论”作为桥梁，保证教学从医学微生物学向临床微生物过渡。本教材的临床细菌学、临床真菌学和临床病毒学等三篇是主体内容，应作为课堂教学的重点。微生物的分类、临床意义、微生物性性和微生物检验等四方面，其中确定微生物的分类和命名是本书的特色。根据临床要求，强调了标本直接检验的重要性。微生物检验篇可在临床专业实习阶段，结合国内外的进展与本医院的实际状况进行消化。

简介：通过调查四所不同级别医院2004年微生物检验情况，发现过去认为致病力弱的条件致病菌已占主流，如：铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、肠球菌、克雷伯菌属等，耐药菌株及多重耐药菌株也增多。为此，笔者对微生物检验教学提出强化条件致病菌、细菌对抗菌药物敏感实验、检验程序的教学，加强教师的临床实践活动等改革思考。

简介：作为生物制药专业的主干课程之一,微生物学的教学优化是学好该课程的关键因素。该文结合教学内容、教学方法和实践教学等三个方面,阐述如何加强微生物学的教学改革,提升学习效果,持续改善教学质量。

简介：通过加强生物安全知识的学习，提高专科学校微生物实验室生物安全意识，避免微生物实验室发生污染。根据医学微生物学实验室的特殊性及专科学校和我校实验室的特点，制定一系列的相关的规章制度，如实验室准入制度，生物防护与安全制度，建立生物安全实验室标准操作程序等。通过学习生物安全知识，增强生物安全意识，加强实验室的生物安全管理，能有效地保障学生和实验室工作人员的生物安全。

简介：摘要食物过敏是一种常见疾病，在过去的二十年中其患病率明显增加，这表明环境对易感性产生了重要影响。研究发现生产方式、宠物接触，以及饮食习惯等是影响食物过敏重要风险因素，同时这些因素对肠道菌群的构成有显著影响，而肠道菌群在形成免疫系统方面起着至关重要的作用。最近的研究已经开始聚焦于这些肠道共生微生物在食物过敏发展中的作用，一些动物模型的研究明确显示肠道共生微生物的组成与食物过敏有密切相关性，如梭状芽孢杆菌有助于防护食物过敏。未来的挑战是识别可用于预防或治疗食物过敏的共生微生物。

简介：通过近十余年来对生物化学教学改革的回顾和总结，从教学内容、教学方法和素质培养等方面进行了一些探索，初步形成一套适用于医科学生教育的教学模式。

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