简介：摘要本文报道了1例反复肺部感染、淋巴结肿大伴肝占位的患者，淋巴结活检、肝脏占位穿刺活检病理为炎性肉芽肿性病变伴非特异性坏死，DHR123流式细胞分析示中性粒细胞吞噬功能缺陷。全外显子测序显示患者CYBA基因存在c.7C>T（p.Gln3*）纯合突变，确诊患者为CYBA基因纯合突变所致的慢性肉芽肿病，予复方磺胺甲噁唑片口服。目前抗真菌治疗中，待情况稳定拟行干细胞移植。

简介：摘要目的对1个常染色体显性多囊肾病（ADPKD）家系进行临床表型分析和致病基因突变检测。方法本研究先证者因“左上颌骨根尖囊肿”于2017年10月10日在东莞市人民医院住院治疗。通过临床表现、影像检查和生化指标等对先证者确诊。采集家系成员及150名健康对照者外周血，通过高通量测序（NGS）法筛选先证者全外显子组突变基因；应用PCR及Sanger测序验证先证者及其家系成员候选突变基因位点，并进一步筛查健康对照者；应用ExAC、dbSNP、HGMD、1000 genomes、ClinVar、PKDB、Mutation Taster和PhyloP数据库及软件进行突变人群频率和生物信息学分析。结果先证者，男，46岁，高血压，尿潜血阳性，血肌酐升高。B超及CT示双侧多囊肾伴左肾结石，多囊肝。测序显示先证者及其二弟、妹妹、女儿和侄女皆存在PKD1基因c.11017-10C>A杂合剪接突变，且150名健康对照者中均未发现该突变。c.11017-10C>A已被dbSNP、ClinVar、HGMD、PKDB和Mutation Taster数据库收录，有害性预测结果为有害，可能导致产生多囊蛋白1（polycystin1，PC1）截短蛋白。结论在中国人群ADPKD家系发现PKD1致病基因突变c.11017-10C>A，拓展了该基因的突变谱。

简介：摘要本研究检测一个常染色体显性遗传马方综合征（MFS）家族中原纤蛋白1（FBN1）基因的突变，并探讨相关表型及其突变筛选的意义。对该家系所有成员进行体格检查和辅助检查，并进行全外显子测序（WES），生物信息学方法筛选致病突变，Sanger测序验证WES的数据可靠性。结果显示，FBN1的错义突变是由于第56外显子中第6806位的T碱基被C碱基替换（c.6806 T>C），导致处于该位置的异亮氨酸被苏氨酸取代（p.Ile2269Thr），此突变在中国汉族人群中尚未报道。该突变与患者的表型密切相关。综上，本研究结果扩大了FBN1的突变谱，有助于进一步研究MFS和MFS相关疾病的分子发病机制。

简介：摘要目的探讨F框/WD-40域蛋白7（FBXW7）基因突变对非小细胞肺癌（NSCLC）患者免疫治疗预后的影响。方法（1）选取2019年1月至2021年6月南京医科大学第一附属医院肿瘤科接受免疫检查点抑制剂治疗的晚期NSCLC患者125例，男70例，女55例，年龄［M（Q1，Q3）］为64（57，70）岁；收集其临床治疗及预后资料，分析FBXW7突变与免疫治疗疗效及预后的关系。（2）在cBioPortal数据库检索与免疫治疗相关的NSCLC数据集，共261例患者纳入研究，作为免疫治疗队列，男120例，女141例，年龄66（57，73）岁；其临床数据及基因突变数据均从cBioPortal数据库下载，分析FBXW7突变与NSCLC患者临床特征和免疫治疗预后的关系。（3）在癌症基因组图谱（TCGA）数据库下载1 030例NSCLC患者转录组和基因突变数据进行后续分析，作为TCGA队列，男633例，女397例，年龄为67（60，73）岁；分析FBXW7突变对免疫治疗疗效的影响，以及其影响NSCLC免疫治疗疗效的关键分子及其生物学功能。结果125例NSCLC患者中，FBXW7突变率为5.6%（7/125）；7例患者的FBXW7突变类型均为截断突变，在接受免疫治疗后，部分缓解4例，疾病稳定2例，疾病进展 1例，客观缓解率（ORR）为4/7，疾病控制率（DCR）为6/7。FBXW7突变患者中位无进展生存期（PFS）为13.0个月（95%CI：7.0~22.0个月），优于FBXW7野生型患者的4.0个月（95%CI：2.0~11.5个月）（P=0.046）。生物信息学分析显示，FBXW7突变型患者接受免疫治疗后临床获益更高。免疫治疗队列中FBXW7突变型患者的肿瘤突变负荷［M（Q1，Q3）］为17.8（11.5，29.3）个/Mb，高于FBXW7野生型患者［5.7（3.0，10.4）个/Mb，P=0.001］。TCGA队列中，FBXW7突变型患者的肿瘤突变负荷为15.9（4.2，28.1）个/Mb，基因插入或缺失来源的肿瘤新抗原为192.5（70.8，535.0）个，单核苷酸突变来源的肿瘤新抗原为363.0（194.8，534.8）个，均高于FBXW7野生型患者的5.6（3.2，8.9）个/Mb、53.0（12.0，131.0）个、83.5（34.0，178.0）个（P=0.002、0.008、P<0.001），表明FBXW7突变型肿瘤具有更强的免疫原性，可能产生强大的抗肿瘤免疫。FBXW7突变与T淋巴细胞的激活有关，表现为T淋巴细胞受体复合物与信号传导的激活。进一步对肿瘤免疫细胞浸润程度分析发现，FBXW7突变型肿瘤的CD8+T淋巴细胞和M1型巨噬细胞浸润率分别为10%（8%，14%）、8%（4%，11%），均高于FBXW7野生型肿瘤的7%（4%，12%）、4%（1%，8%）（P=0.049、0.046）。结论FBXW7突变型NSCLC患者接受免疫治疗后临床获益更高，FBXW7基因突变具有作为NSCLC患者免疫治疗疗效预测标志物的可能性。

简介：摘要目的探讨不同驱动基因突变晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者接受免疫治疗的疗效及预后影响因素。方法回顾性收集2016年4月至2021年5月河南省肿瘤医院接受程序性细胞死亡受体1（PD-1）抑制剂治疗、驱动基因（EGFR、KRAS、ALK等）阳性、晚期NSCLC患者的资料，分析不同驱动基因突变状态的患者接受免疫治疗的模式、无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）及预后影响因素。结果本研究共纳入120例患者，男70例，女50例，年龄［M（Q1，Q3）］为57（50，65）岁。其中KRAS突变患者52例、EGFR突变患者42例、ERBB2突变患者16例、MET突变或扩增患者5例、ROS-1融合患者5例、BRAF突变患者2例、ALK及RET突变患者各1例。120例患者的PFS［M（95%CI）］为6.4（5.1~7.8）个月，OS为31.2（22.0~40.3）个月。KRAS突变肺癌患者接受免疫治疗的生存获益最大，PFS为9.7（4.8~14.6）个月，OS为31.2（19.4~50.6）个月，且免疫治疗多为一线（34.6%，18/52）、二线（38.5%，20/52）治疗。EGFR突变患者PFS、OS分别为3.9（1.8~6.1）个月、18.0（12.1~23.8）个月，一般在EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）耐药后接受免疫治疗，二、三、四线及以上治疗线数患者比例分别为38.1%（16/42）、11.9%（5/42）、47.6%（20/42）。程序性细胞死亡受体配体1（PD-L1）表达水平（以表达水平≥50%为参照，阴性：HR=3.710，95%CI：1.372~10.031，P=0.010；表达水平1%~49%：HR=2.738，95%CI：0.841~8.912，P=0.094）、年龄（每增加1岁，HR=0.957，95%CI：0.933~0.982，P=0.001）、不同驱动基因突变（以KRAS突变为参照，EGFR突变：HR=2.676，95%CI：1.317~5.436，P=0.006；ERBB2突变：HR=3.411，95%CI：1.493~7.792，P=0.004；其他突变：HR=0.727，95%CI：0.322~1.643，P=0.444）为PFS的影响因素。PD-L1表达水平（以表达水平≥50%为参照，阴性：HR=2.305，95%CI：0.748~7.103，P=0.146；表达水平1%~49%：HR=1.286，95%CI：0.337~4.913，P=0.713）、免疫治疗线数（以≥三线为参照，一线：HR=0.322，95%CI：0.114~0.914，P=0.033；二线：HR=0.375，95%CI：0.178~0.789，P=0.010）为OS的影响因素。结论KRAS突变肺癌患者多在前线接受免疫治疗，生存获益最多，EGFR突变肺癌患者多在后线接受免疫治疗，患者能获得较好的生存获益。PD-L1表达水平、年龄、不同驱动基因突变为PFS的影响因素，PD-L1表达水平、免疫治疗线数为OS的影响因素。

简介：摘要目的分析急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者NOTCH1与FBXW7基因突变特征及其临床特点对预后的影响。方法回顾性分析2016年3月至2021年3月河南省人民医院有二代基因测序数据的61例T-ALL患者的临床资料，包括男46例，女15例，年龄［M（Q1， Q3）］为18（11，30）岁。分析T-ALL患者NOTCH1/FBXW7基因突变特征与临床和实验室参数的关系，以及其对无事件生存期（EFS）和总生存期（OS）的影响。结果共34例（55.7%，34/61）患者检出NOTCH1基因突变，其中异二聚体结构域（HD）突变22例（64.7%），脯氨酸/谷氨酸/丝氨酸/苏氨酸结构域（PEST）突变7例（20.6%），同时存在HD与PEST突变5例（14.7%）。9例（14.8%，9/61）患者检出FBXW7基因突变，其中5例同时存在NOTCH1和FBXW7突变。23例（37.7%，23/61）患者为野生型。NOTCH1/FBXW7基因突变组患者与野生型组患者外周血白细胞数量［M（Q1， Q3）］分别为76.4×109/L（8.3×109/L，149.2×109/L）、54.1×109/L（5.3×109/L，156.6×109/L），血红蛋白水平分别为（89.1±27.1）、（99.5±23.1）g/L，骨髓原始细胞比例［M（Q1， Q3）］分别为84.5%（69.0%，91.3%）、60.0%（35.0%，80.0%），SIL-TAL1、HOX11、HOX11L2基因表达率分别为7.9%（3/38）比17.4%（4/23）、18.4%（7/38）比4.3%（1/23）、5.3%（2/38）比13.0%（3/23），差异均无统计学意义（均P>0.05）；但NOTCH1/FBXW7基因突变组患者血小板水平［M（Q1， Q3）］为60.5×109/L（36.8×109/L，100.3×109/L），低于野生型组患者的116.0×109/L（63.0×109/L，178.0×109/L）（P=0.018）。伴NOTCH1/FBXW7基因突变组患者的基因突变个数［M（Q1， Q3）］为2.5（1.8，4.0）个，高于NOTCH1/FBXW7野生型组的0（0，1.0）个（P<0.001）。成人NOTCH1/FBXW7基因突变组患者的中位EFS和OS分别为28.0个月（95%CI：7.3~48.7个月）、30.0个月（95%CI：8.9~51.1个月），均优于成人野生型组患者的4.5个月（95%CI：0~11.6个月）、9.0个月（95%CI：0~19.1个月）（P=0.008、0.014）；而儿童NOTCH1/FBXW7基因突变组中位EFS和OS分别为12.0个月（95%CI：10.4~13.6个月）、19.0个月（95%CI：13.6~24.4个月），儿童野生型组分别为10.0个月（95%CI：8.9~11.1个月）、21.0个月（95%CI：0~51.4个月），差异均无统计学意义（P=0.673、0.434）。结论T-ALL患者NOTCH1/FBXW7基因突变率较高，NOTCH1/FBXW7基因突变组患者血小板计数减低，且具有较好的EFS和OS，NOTCH1/FBXW7基因突变可能作为成人T-ALL患者个体化治疗的一个分层依据。

简介：摘要非小细胞肺癌（NSCLC）约占全部肺癌患者的80%~85%。针对NSCLC发生、发展过程中最常见的驱动基因表皮生长因子受体（EGFR）基因突变及间变性淋巴瘤激酶（ALK）融合基因阳性人群靶向药物的研发显著提高了这部分患者的生存期。近些年研究者们发现了NSCLC中除EGFR及ALK外越来越多的非常见基因突变，如c-ros原癌基因1（ROS1）、BRAF V600E、神经营养因子受体络氨酸激酶1（NTRK1）、人类表皮生长因子受体2（HER2）、间充质上皮转移因子（MET）、原癌基因（RET）、EGFR 20外显子插入以及鼠类肉瘤病毒癌基因（Kras）G12C突变等。针对这些非常见突变的多种靶向药物得以研发并投入临床应用，其中很多药物已取得了显著的疗效。建议在初诊时对局部晚期或转移性NSCLC患者，尤其是非鳞NSCLC患者进行可以涵盖非常见突变的基因检测，对于非常见突变患者采取个体化治疗策略。

简介：摘 要：广西柳江红花二线船闸项目在边坡支护施工过程中发现地质突变，原有勘察显示为中风化灰岩，实际开挖揭露为强风化泥质粉砂岩。使用预应力抗滑桩锚索支护体系，很好地解决了施工过程中突遇不良地质的问题，通过荷载和结构抗力计算，结合经济效益的比较与施工过程的介绍进一步探讨该支护方式的可行性，为同类工程提供参考借鉴。

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简介：摘要目的对1型糖尿病（T1DM）患者含NLR家族CARD域蛋白4（NLRC4）基因外显子及外显子内含子交界区的罕见变异进行鉴定，并探讨其对基因功能的影响。方法选取2017年8月到2020年9月中南大学湘雅二医院代谢内分泌科508例T1DM患者作为病例组，男264例，女244例，年龄［M（Q1，Q3）］为27（11，43）岁。同时选取同期体检科527名健康对照者，男290名，女237名，年龄［M（Q1，Q3）］为47（36，60）岁。对T1DM患者和健康对照者的NLRC4基因的外显子区域进行捕获测序，并进行一代测序验证。构建NLRC4基因野生型和突变型质粒，转染293T细胞，采用免疫印迹试验（WB）检测NLRC4蛋白表达量以及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶前体（procaspase-1）切割产物含量。在转染野生型或突变型NLRC4质粒的293T细胞中加入放线菌酮（CHX），检测NLRC4蛋白降解情况。使用免疫荧光检测NLRC4蛋白质的定位。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清白细胞介素（IL）-1β浓度。结果测序结果显示，4例患者及2名健康对照者NLRC4基因的3号外显子存在杂合变异c.208C>T；2例患者4号外显子存在杂合变异c.1564T>C，1例患者4号外显子存在c.1219G>C；这3种变异可能为T1DM的致病性变异。NLRC4野生型和c.208>T、c.1564T>C、c.1219G>C突变型质粒转染的293T细胞中，NLRC4蛋白表达水平、降解速率、定位以及procaspase-1的切割产物含量无明显改变；但转染c.1219G>C、c.208C>T突变型质粒的293T细胞分泌的IL-1β浓度［M（Q1，Q3）］分别为15.25（12.98，17.52）、15.44（13.81，17.07）ng/L，均低于野生型质粒的18.70（16.59，20.81）ng/L（P=0.020、0.010）。结论NLRC4基因外显子罕见变异c.208C>T、c.1564T>C和c.1219G>C可能不改变蛋白质的表达水平、蛋白质的降解及定位，但c.208C>T和c.1219G>C错义突变可能抑制了炎症因子IL-1β的产生，从而对基因功能产生影响。

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简介：摘要目的构建斑马鱼脑出血模型，并以此筛选诱导斑马鱼脑出血的相关基因。方法通过吗啉代寡核苷酸（MO）技术和单细胞显微注射技术构建斑马鱼脑出血模型，并从宏观、微观角度多重验证。首先，造模实验采用注射Control MO的正常野生型AB品系斑马鱼作为对照组，实验组在AB斑马鱼胚胎单细胞时期分别注射神经嵴源性细胞（NCDCs）发育相关基因的MO，包括col8a1 MO、tfap2α MO、msx1a MO、msx2 MO、dkk1a MO等，于显微镜白光视野下初步验证模型。其次，采用Tg（flk1：GFP；gata1：dsRed）双转基因斑马鱼进行模型验证，该转基因鱼用绿色荧光蛋白（GFP）标记血管内皮细胞，用红色荧光蛋白（dsRed）标记血红细胞，能够更清晰地观察到斑马鱼脑出血的部位。在斑马鱼胚胎单细胞时期注射Control MO 作为对照组，注射col8a1 MO作为实验组，正常培养至受精后48 h通过激光共聚焦观察红细胞渗漏情况，构建荧光视野可观察的脑出血模型。最后，采用Tg（flk1：GFP）转基因斑马鱼进行基于血脑屏障的模型验证，通过Dextran-Rhodamin和DAPI染料的渗漏现象进一步明确斑马鱼血脑屏障的破坏与脑出血的发生，并进行定量统计，从而验证NCDCs发育相关基因与脑出血表型的关系，证明造模有效。结果与注射Control MO的正常野生型AB品系斑马鱼对照组相比，col8a1、tfap2α和msx1基因突变的实验组斑马鱼有明显的脑出血现象，出血比例分别为18.18%（52/286）、23.04%（62/251）、35.94%（23/64），而msx2和dkk1a基因突变的斑马鱼极少观察到脑出血，出血比例仅分别为1.03%（1/97）和1.15%（1/87）。注射Control MO与col8a1 MO的Tg（flk1：GFP；gata1：dsRed）双转基因斑马鱼红细胞渗漏发生率分别为0.37%（1/273）与18.18%（52/286）（P<0.001）。注射Control MO与col8a1 MO组Tg（flk1：GFP）转基因斑马鱼DAPI阳性的细胞核数分别为（10.05±5.27）个与（60.35±3.96）个（P<0.001）；Dextran-Rhodamin染料渗漏引起的中脑实质荧光示踪强度值分别为2.54±4.70与5.13±3.52（P<0.001），两组比较差异有统计学意义。结论本研究成功构建了斑马鱼脑出血模型，并筛选出col8a1、tfap2α、msx1等诱导斑马鱼脑出血的相关基因。

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简介：摘要表皮生长因子受体（EGFR）基因突变的非小细胞肺癌（NSCLC）代表了一类治疗上具有一定特殊性的肺癌，即具有EGFR敏感突变的晚期NSCLC患者一线治疗优先选用酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）。然而，作为EGFR突变中第三常见的20号外显子插入突变（ex20ins），对肿瘤治疗的反应与敏感突变并不一致，对TKIs整体反应不理想。本文介绍了EGFR ex20ins NSCLC的临床特征和预后，并重点探讨了其对TKIs、化疗和免疫治疗等不同治疗方式的反应，以期能为临床医师的治疗决策提供参考。

简介：摘要目的检测Bmi-1基因在口腔白斑细胞和组织中的表达，分析其在口腔白斑恶性转化中的作用及临床意义。方法免疫组化法检测南京医科大学附属无锡人民医院口腔科和华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心1996至2018年收治的109例口腔白斑患者（其中男51例，女58例，年龄18~74岁）白斑组织样本中Bmi-1表达，分析其表达水平与口腔白斑患者临床病理参数、预后的关联；采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western蛋白印迹法检测正常口腔黏膜上皮细胞、口腔白斑细胞、口腔鳞癌细胞、口腔白斑组织和配对的邻近正常组织中Bmi-1基因mRNA和蛋白表达水平；在口腔白斑细胞系Leuk-1中沉默Bmi-1基因表达后分析其对Leuk-1细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响。结果Bmi-1在重度和轻度上皮异常增生的口腔白斑组织中的蛋白表达水平差异有统计学意义（6 819±994比4 713±372，P=0.017）；Bmi-1高表达的口腔白斑患者的未癌变生存率为65.5%（36/55），低于Bmi-1低表达者［88.9%（48/54），P=0.003］。Cox回归分析显示Bmi-1的表达水平可作为预测口腔白斑恶性转化的预测指标（HR=2.522，95%CI：1.128~5.640，P=0.024）。Bmi-1在口腔白斑组织中的mRNA表达水平为0.455±0.120，高于其在邻近正常口腔黏膜组织（0.063±0.009，P=0.014）；Bmi-1在随访期发生癌变的口腔白斑组织中的mRNA表达水平（1.405±0.397）高于未发生癌变的口腔白斑组织（0.145±0.017，P<0.001）；在口腔白斑细胞系Leuk-1中转染Bmi-1-shNC和Bmi-1-shRNA2腺病毒后，二者的克隆形成数（824±40比414±38，P=0.002）和细胞凋亡率（17.7%±2.3%比36.0%±2.0%，P=0.004）差异均有统计学意义。结论Bmi-1表达上调促进了口腔白斑细胞的恶性生物学行为，Bmi-1表达可作为预测口腔白斑恶性转化的分子标志物。

简介：摘要目的分析青少年型重症肌无力（MG）患者的临床特征及相关基因变异特点。方法收集2019年6月至2020年5月在中山大学附属第一医院神经内科就诊的青少年型MG患者的临床资料，征得患者知情同意后留取血标本，应用Illumina平台对血标本进行全外显子检测，运用生物信息软件及SPSS 22.0进行数据处理及结果分析。结果根据纳入和排除标准共纳入54例青少年型MG患者，男28例，女26例，起病年龄（3.79±0.89）岁。入组患者中眼肌型患者52例（96.3%），54例患者的MG-ADL评分为（3.44±0.44）分，AChR-Ab抗体滴度为（5.88±2.45）nmol/L。2例患者合并胸腺增生，5例患者有MG家族史。在54例患者中共发现了169个变异基因，其中肌联蛋白titin（TTN）基因变异例数最多，共发生变异17例（31.5%）。TTN基因变异组中，有7例（7/17）患者有眼球固定表现，非变异组中有4例（10.8%）患者出现眼球固定症状，两组比较差异有统计学意义（P=0.016）。突触核包膜蛋白1（SYNE1）和兰尼碱受体1（RYR1）基因变异共7例（13.2%），未发现此类基因变异与MG临床表现的明确关系。结论青少年型MG的好发人群为学龄前儿童，无性别差异，以眼肌型多见。青少年型MG中TTN基因变异比例较高，提示该基因可能是青少年型MG患者的潜在治疗靶点。

简介：无

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