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  • 简介:基因芯片技术是20世纪90年代中期在生命科学领域中发展起来一种分子生物学新兴技术,是多学科交叉融合。简要概述了基因芯片技术产生、原理、特点、制作方法和类型,及其在新基因发现中应用。

  • 标签: 基因芯片 新基因 应用
  • 简介:基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道一种表型克隆新方法,是目前寻找差异表达基因较有效方法,较过去方法有许多先进之外。本文对此方法原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

  • 标签: 抑制消减杂交 表型克隆 定位克隆
  • 简介:来自生物谷报道称:2010年两会期间,政协委员在关于“低碳”提案,据粗略统计约占10%。而关注“低碳”问题,换言之也就是关注民生问题。这对正处于高速发展之中,同时国力不断强大中国来说,完全是情理之中事情。

  • 标签: 转基因 战争 政协委员 低碳 生物
  • 简介:目的:筛选和鉴定同源盒基因A10编码蛋白(HOXA10)靶调节基因。方法:以人子宫内膜细胞系AN3CA为实验对象,采用染色质免疫沉淀方法筛选HOXA10靶基因;采用平端克隆方法构建HOXA10靶基因库;采用DNA序列分析结合生物信息学方法鉴定HOXA10靶基因。结果:共获得含有HOXA10结合片段克隆197个,选取插入片段大于100bp质粒67个进行DNA序列分析,其中含有HOXA10结合序列TTAT基因16个。结论:初步筛选出16个HOXA10候选靶基因,为进一步研究HOXA10基因调节机理提供了新思路。

  • 标签: 同源盒基因A10 靶基因 染色质免疫沉淀技术
  • 简介:诺奖得主美国科学家奥利弗·史密斯.与另外两位诺奖得主,发现了如何操纵小鼠胚胎干细胞,创造了一整套“基因敲除”小鼠方式。为人类攻克某些疾病提供了药物试验模型。他们在涉及胚胎干细胞和DNA重组方面有着一系列突破性发现,这一突破对21世纪生物医学研究做出了奠基性贡献,使生命科学发生了革命性变化。因此获得2007年度诺贝尔生理学或医学奖。

  • 标签: 基因敲除 诺贝尔生理学或医学奖 胚胎干细胞 美国科学家 试验模型 生物医学
  • 简介:基因治疗是近年来治疗肿瘤新方法,因治疗策略不同而发展为2个分支:一是分子肿瘤治疗,包括肿瘤抑制1基因治疗、自杀基因治疗、反义基因治疗、抑制肿瘤血管形成治疗、免疫基因治疗;二是virotherapy。简要综述了肿瘤基因治疗各种方法及其在胃癌治疗中应用和发展前景。

  • 标签: 胃癌 基因治疗 进展
  • 简介:基因芯片又称DNA微阵列,分为cDNA微阵列和寡聚核苷酸微阵列.DNA微阵列技术是探索基两组功能一种强有力工具.扼要介绍基因芯片、表达谱芯片技术和原理,以及基因芯片技术在肿瘤基因组学中应用。

  • 标签: 基因芯片 DNA微阵列 表达谱芯片 肿瘤基因组学
  • 简介:RNAi是指通过双链RNA介导特异性降解靶mRNA,导致转录后水平基因沉默现象。其作用途径有RdRP依赖RNAi途径与非RdRP依赖RNAi途径2种。利用RNAi基因敲除技术在dsRNA序列选择、质粒或病毒为载体dsRNA体内合成、发夹样siRNA转录、dsRNA导入方法等方面取得了很大进展,在研究人类或其他生物基因组中未知基因及蛋白质功能等领域具有诱人应用前景。

  • 标签: RNA干扰 基因敲除 转录后基因沉默 小干扰RNA MRNA
  • 简介:目的:以转坛£抗虫基因白桦不同月份叶片为实验材料,揭示基因组DNA甲基化水平与植物叶片发育及外源基因表达水平之间相关性。方法:应用DNA-MSAP方法检测叶片基因组DNACCGG位点甲基化状态,利用Northern杂交技术分析其外源基因表达水平。结果:转基因白桦叶片基因组DNA同年5~9月总甲基化水平分别为21.95%、29.62%、25.41%、41.39%和47.24%,除7月份稍有波动外,整体呈现随着叶片成熟和衰老渐升高趋势;全部扩增位点中,半、全甲基化位点比例分别为17.99%和15.19%,在各月份叶片中变化较大,其中半甲基化位点比例分别为10.37%、19.14%、14.92%、17.2%和28.83%,全甲基化位点比例依次为11.58%、10.49%、10.50%、24.11%和18.40%。同一无性系外源基因在当年5~7月表达量最高,8~9月呈下降趋势,与基因组甲基化状态呈负相关趋势。结论:转基因白桦叶片成熟和衰老及外源基因表达量降低均可能与基因组DNA甲基化水平升高相关。

  • 标签: 转基因白桦 基因组 甲基化 甲基化敏感扩增多态性
  • 简介:基因差异表达分析是研究许多生物学过程分子基础一条直接、有效途径。自DDRT-PCR技术建立以来,一系列基于PCR基因差异表达分析技术,如SAGE、SSH、RDA和DNA微阵列等相继发展起来,为分析和克隆差异表达基因提供了更为快速、灵敏工具。本文对这几种方法进行了简要综述,比较了不同方法优缺点,并展望了今后基因差异表达研究技术发展方向。

  • 标签: PCR 基因差异表达 抑制消减杂交 代表性差异分析 DNA微阵列
  • 简介:基因芯片是近年来产生一项生物高技术。它是利用原位合成或合成后交联法,将大量核酸片段有规则地固定在固相支持物如载玻片、金属片、尼龙膜上,制成芯片,然后将要检测样品用荧光素或同位素标记,再与做成芯片充分杂交,通过对杂交信号检测来分析样品中信息。基因芯片技术已在基因表达水平检测、基因点突变及多态性检测、DNA序列测定、寻找可能致病基因和疾病相关基因、蛋白质作图、基因组文库作图等方面显示出了广阔应用前景。

  • 标签: 基因芯片 DNA芯片 DNA微阵列 基因组研究
  • 简介:目的:检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外源基因拷贝数及ATⅢ蛋白表达量,分析拷贝数与蛋白表达量相关性。方法:用Primer5.0软件设计外源基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH引物,以倍比稀释标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,通过标准曲线计算外源基因拷贝数;通过酶显色底物法检测ATⅢ蛋白含量。结果:依据ATⅢ和GAPDH基因标准曲线方程计算得到山羊个体间外源基因拷贝数相差很大,最少为5,最多为25,且不同转基因山羊间ATⅢ表达水平差别达10倍以上。结论:外源基因表达水平在受到拷贝数影响外,也受到整合位点等其他因素重要影响。

  • 标签: 抗凝血酶Ⅲ 基因拷贝数 蛋白表达量 转基因 山羊
  • 简介:基因治疗是一种新治疗手段,可用于癌症、遗传性疾病、感染性疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病等治疗。癌症基因治疗是基因治疗主要应用领域。过去几年里,全球基因治疗临床试验取得了很大进步,也遇到了很多困难。未来基因治疗主要目标是发展安全和高效基因导入系统,它们能将外源遗传物质靶向性地导入特异细胞。简要综述了基因治疗研究和应用进展、困难及其发展前景。

  • 标签: 基因治疗 体内疗法 体外疗法
  • 简介:目前,几乎所有的植物遗传转化都要通过使用选择标记基因,如抗生素或除草剂抗性基因等来筛选转化子,虽然没有研究结果表明选择标记基因影响人类健康或环境安全,但近年来也引发了人们对转基因产品安全性担心.为了消除公众对转基因食品安全性顾虑,无选择标记基因植物应运而生.本文综述了共转化系统、位点特异性重组系统(包括FLP/FRT、Cre/lox、R/RS及Gin/gix系统)和转座子系统(Ac/Ds转座子系统)在培育无选择标记转基因植物中应用.

  • 标签: 转基因植物 无选择标记 共转化 位点特异性重组
  • 简介:真核基因转录和转译调控是哺乳类细胞基因表达系统建立和发展基础,外源基因表达水平不仅决定于启动子/增强子强弱,还与剪接信号、终止信号和poly(A)信号以及质粒拷贝数等因素有关。另外,在基因治疗研究中,也已寻找到多种具有组织或肿瘤特异性启动子,来达到特异性肿瘤基因治疗目的。

  • 标签: 哺乳类细胞基因表达 启动子/增强子 剪接信号 质粒拷贝数
  • 简介:由于国际上对转基因产品安全性存在较大争议,因此对没有加施标签予以声明情况下大量进入中国市场基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大.本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料,通过比较分析外源CP4-EPSPS基因核苷酸序列和表达氨基酸序列,设计出两对不同引物,采用PCR方法分别对转基因油菜籽和大豆中外源CP4-EPSPS基因进行了检测.

  • 标签: 抗草甘膦油菜籽 抗草甘膦大豆 CP4-EPSPS PCR CP4-EPSPS基因 检测
  • 简介:随着肿瘤分子生物学技术及学科发展,人们认识到癌症是一种基因疾病,肿瘤发生发展是多种基因参与复杂过程,包括癌基因异常激活和肿瘤抑制基因失活。新近分离鉴定重要肿瘤抑制基因——卵巢癌基因1(OVCA1)在多种肿瘤中存在高频率缺失和突变,对多种癌细胞增殖有明显抑制作用,可能作用于肿瘤发生早期阶段,在哺乳动物中高度保守,提示在细胞中具有重要作用;OVCA1可能具有调控细胞周期、翻译、DNA损伤及胚胎发育等生物功能,具体作用机制尚不明确;体外研究显示,OVCA1缺失表达导致肿瘤发生可能与周期蛋白D1上调表达、P16下调表达相关,与p53基因突变可能存在相互作用;OVCA1缺失表达与卵巢癌发生发展及预后密切相关,与宫颈癌及人乳头瘤病毒感染、乳腺癌等恶性肿瘤关系尚在研究中。我们简要综述了OVCA1基因国内外研究进展,为卵巢癌等恶性肿瘤进行基因水平诊治提供理论依据。

  • 标签: 卵巢癌基因1 抑癌基因 肿瘤
  • 简介:阐述了酵母表达系统在表达外源基因特别是大分子真核生物基因方面的优越性,分析了由于酵母表达系统局限性如聚合体存在、信号肽加工不完全、内部降解等而造成产物不均一现象,提出了相应解决方法。

  • 标签: 酵母 基因工程 不均一性
  • 简介:研究人员将野生植物中一种基因移植到病害风险大西红柿和土豆中,结果增加了这些植物抵抗农业病菌能力。新成果发表在3月《自然一生物技术》期刊上,如果这一结果能广泛地复制,那么它将在减少作物大量损失同时,避免杀虫剂使用所造成环境、健康和成本问题。

  • 标签: 转基因作物 能力 病菌 农业 野生植物 病害风险