简介:摘要目的探讨极低密度脂蛋白受体(VLDLR)对人膀胱癌细胞迁移活性的影响及机制。方法采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人源膀胱癌细胞(J82、UMUC3与T24)与正常尿路上皮细胞(SV-HUC-1)VLDLR的表达水平;采用小干扰RNA(siRNA)建立VLDLR敲低T24细胞模型,通过划痕实验与Transwell实验评估细胞的迁移活性;采用蛋白印迹法测定波形蛋白(Vimentin)、蛋白激酶B(Akt)与磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)的蛋白含量。采用独立样本t检验进行统计。结果VLDLR在T24(2.70±0.55,t=5.294,P<0.05)、UMUC3(6.51±0.99,t=9.596,P<0.05)及J82中的含量(10.54±1.87,t=8.802,P<0.05)均显著高于SV-HUC-1(1.00±0.06);VLDLR敲低T24细胞模型建立成功,VLDLR核酸水平在siVLDLR-1(0.22±0.01,t=18.573,P<0.01)和siVLDLR-2(0.07±0.02,t=21.511,P<0.01)显著低于对照组;细胞相对迁移速率和发生迁移细胞数量在siVLDLR-1组(0.61±0.07,t= 3.368,P<0.05;107.00±14.53,t=14.865,P<0.01)和siVLDLR-2组(0.63±0.04,t=3.305,P<0.05;87.00±29.60,t=11.716,P<0.01)均显著低于对照组,差异均有统计学意义。蛋白印迹结果显示,VLDLR敲低后PI3K和Akt含量未见明显变化,p-PI3K、p-Akt及Vimentin的蛋白水平明显下调。结论敲低VLDLR可能通过PI3K/Akt通路抑制人膀胱癌细胞迁移活性。
简介:摘要:目前我国信息化的不断发展,建筑工程的不断增多,人们生活水平也越来越好,然而人们对建筑工程管理的要求也越来越严格。因此,在建筑工程的施工建设过程中就要通过严格的措施,在保证工程质量和安全的基础上,有效地缩短工程的施工工期,节约工程的造价成本,保证整个工程能够全面顺利的施工。另外,在工程的管理工作中工作人员的专业技能培训,也是整个工程管理的重点,它可以提高工作人员的综合素质,通过引进先进的技术和设备,保证整个工程的施工效率和水平。另外,还需要明确工作过程中每一个工种的实际责任,加强各工种之间的相互配合,实现整个工程施工现场管理水平的提升。减少一些偷工减料质量问题的出现,有效地维护整个工程施工现场的环境。
简介:摘要目的观察沉默非染色体结构维护凝缩蛋白Ⅰ复合体G亚基(NCAPG)基因对膀胱癌细胞增殖的影响。方法采用RNA干扰技术下调T24细胞中NCAPG的表达水平,采用细胞计数实验和流式细胞术分别检测细胞增殖活性,进一步采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹检测细胞周期基因的表达变化。采用单因素方差分析比较均值,统计方法为最小显著性差异法(LSD)和邓肯多重范围检验(Duncan)。结果NS-1和NS-2组的沉默效率分别为(84.6±4.4)%和(86.3±1.1)%。与NC组比较,NS-1组与NS-2组增殖速率明显减缓。相对增殖率(120 h)由(530.0±35.2)%降低至(398.9±11.0)%和(407.3±19.2)%,差异有统计学意义(NS-1组F=71.388,P<0.05,NS-2组F=46.435,P<0.05)。G0/G1期细胞比例由(53.7±0.6)%上升至(60.7±1.1)%和(59.8±1.6)%,差异有统计学意义(NS-1组F=86.691,P< 0.05,NS-2组F=34.791,P<0.05)。沉默NCAPG基因后,受试细胞内周期相关蛋白转录和翻译均明显下调。结论沉默NCAPG基因抑制人膀胱癌细胞增殖,其机制与细胞周期阻滞有关。