五淋散胶囊中栀子苷和芍药苷的HPLC含量测定

张顺平

曲靖市食品药品检验检测中心655000

摘要：目的：建立五淋散胶囊中栀子苷和芍药苷的HPLC含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法（DiamonsilC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相：甲醇-水（20∶80），流速：1.0ml/min，检测波长：235nm；柱温：30℃；进样量：20μL。）结果：栀子苷及芍药苷2种成分的分离度良好，标准曲线在检测范围内均呈良好线性。结论：本方法简便、准确、快速、灵敏度高、重现性好，可作为五淋散胶囊中栀子苷和芍药苷的定量控制质量标准。

关键词五淋散胶囊；栀子苷；芍药苷；HPLC含量测定

Abstract：Objective：ToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofthemajorcomponentsinWulinsancapsule.Methods：TheseparationwasperformedonaDiamonsilC18chromatographiccolumn（4.6mm×250mm，5μm）withthemobilephaseofmethylalcoholwaterattheflowrateof1ml/min.UVdetectionwavelengthwasat235nm.Columntemperaturewasat30.Results：TherewasgooddeterminationbetweenthetwocomponentsintheWulinsancapsuleandthestandardcurveshowedagoodlinearintherangeofdetection.Conclusion：Themethodisverysimpleandaccurate，besidesitcanbeusedforcontrollingthequantitativeofWulinsancapsule.

前言

五淋散胶囊包括了五种中药材，分别是甘草、当归、山贵子、赤茯苓以及赤芍，具有着清热、利水、凉血的功效，主要适用于治疗尿路感染、淋症以及尿路结石等疾病，而且其疗效极其明显，所具有的毒性作用极小。在本文中，通过建立一种方法来对五淋散胶囊中栀子苷以及芍药苷的HPLC含量进行测定。

正文

一、实验材料

实验仪器：高效液相色谱仪，电子天平，分光光度计；药材及标准品：芍药苷对照品（批号）、栀子苷对照品（批号）、五淋散胶囊（批号）；试药试剂：甲醇（色谱纯）、蒸馏水、其他试剂为分析纯。

二、实验的方法与结果

1、色谱条件：

（1）色谱柱：DiamonsilC18柱；流动相：甲醇：水（20：80）；流速：1ml/min；检测波长：235nm；色谱柱温度：30℃；进样量：20uL，系统适用性试验分别以栀子苷对照品与芍药苷对照品峰面积计应不低于于1500。

（2）测定的波长选择：

分别取栀子苷对照品溶液和芍药苷对照品溶液进行吸光度扫描，波长范围为200nm到600nm，根据扫描结果显示，在235nm处有最大吸收，由此可以确定二者的测定波长为235nm是最佳的选择，另外，通过相关资料的分析，紫外检测的波长可以确定为235nm。

（3）供试品溶液的制备：取五淋散胶囊内容物约0.01g，精密称定，，置25ml量瓶中，加入75%的甲醇20ml，称重，超声提取30分钟（控制超声温度在20℃-32度℃），冷却，再次称重，用75%的甲醇补足减失的重量，弃去初滤液，续滤液用微孔滤膜滤过，即可。（供试品应当在10小时以内进行测定。）

（4）对照品溶液的制备：分别取栀子苷对照品及芍药苷的对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含栀子苷对照品及芍药苷的对照品24ug的溶液，即得。

（5）对线性关系的考察：

对照品的线性关系以及范围如下：

栀子苷：回归方程式y=25005x+6598，线行范围0.072-13.38ug，检测限17.56ng，定量限66.72ng，r值是0.9999；

芍药苷：回归方程式y=20609x+5968，线行范围0.052-15.30ug，检测限15.05ng，定量限56.52ng，r值0.9999。

通过上述实验结果显示，栀子苷以及芍药苷2种成分的分离度良好，标准曲线在检测范围内均呈良好线性。

（6）仪器精密度的测试：取混合对照品，按色谱条件连续测试5次，记录每次的峰面积，计算其RSD。通过测定显示，仪器的精密度良好。

（7）（？？做什么测试）取五淋散胶囊内容物适量，按供试品溶液的制备方法进行操作，按色谱条件进行测定，测定的时间分别是0h、2h、4h、8h、12h、20h、24h、30h、36h，记录峰面积，计算2种成分峰面积的RSD。通过测定显示，供试品溶液可以在36小时以内保持稳定。

（8）样品含量测定

选择不同厂家的五淋散胶囊依法进行测定，。根据测定的结果显示，在南宁生产（具体厂家）的五淋散胶囊，其栀子苷含量为31.9mg每克胶囊内容物，芍药苷含量为32.96mg每克胶囊内容物；在玉林生产的五淋散胶囊，其栀子苷含量为30.5mg每克胶囊内容物，芍药苷含量为32.55mg每克胶囊内容物；在亳州生产的五淋散胶囊，其栀子苷含量为31.18mg每克胶囊内容物，芍药苷含量为32.95mg每克胶囊内容物。（数据统计表）

三、实验结论与讨论

根据相关研究资料可知，山栀子和赤芍在五淋散胶囊中是君药。这两种药材现在所知道的主要成分是栀子苷以及芍药苷，五淋散胶囊的药效取决于这两种主要成分的含量。在本次试验中，建立了一种简单可行而且精准的HPLC定量测定的方法用来对栀子苷与芍药苷的HPLC含量进行测定，经过检测实践的检验，该种方法可以作为测定五淋散胶囊含量的质量标准。

结语

本研究建立的方法操作简单、结果准确，具有较好的重复性和稳定性，可用于青叶胆类药材的鉴定及质量评价。

参考文献：

[1]李忠林，任淑娟，张鹏，方志远，牛安琪.HPLC法测定愈银片中芍药苷的含量[J].中国药师.2009（05）

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