探讨无菌原料药生产的无菌工艺验证

刘杰

刘杰(海正药业<杭州>有限公司浙江杭州311404)

【摘要】无菌原料药的生产需要进行无菌工艺验证，为了保证无菌工艺验证的科学性和合理性，需要注意一些相关问题，本文针对无菌工艺验证过程中的工艺流程以及环境模拟情况等进行分析，希望给相关工作单位提供一些有益借鉴。

【关键词】无菌原料药无菌工艺验证

【中图分类号】R94【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）10-0079-01

所谓无菌就是指完全没有活的微生物存在，无菌药品如果被某些微生物污染，可能会严重影响患者的身体健康，造成无法挽回的损失。生产无菌原料药的过程实际上是把精制过程与无菌工程相结合，把无菌过程作为生产工艺的一个单元来完成，这一过程又被称为无菌工艺流程。

一、无菌原料药生产的无菌工艺验证准备工作

无菌工艺验证要贯穿在整个无菌原料药的生产过程中，就要涉及到生产、质量等多个部门，为此在进行无菌工艺验证之前，要做好相应的准备工作，主要是通过对人、机、料、法、环进行分析，运用质量风险管理手段，保证验证工作的顺利开展，避免无菌工艺验证失败。

1.选择合适的模拟介质

模拟介质的性质直接影响无菌工艺验证的效果，按照相关法规、指南，模拟介质在使用之前要进行灭菌处理，确定模拟介质性质符合相关标准之后，在进行验证实验，一般情况下可以选择的模拟介质有乳糖、PEG6000等，综合这些模拟介质的特点总结出模拟介质应该具备四项基本特征，首先，模拟介质的溶解性会影响结果的验证，所以选择的模拟介质应该可以在培养基内有较好的溶解度，确保培养基不会发生浑浊的现象；其次，确保所选的模拟介质不会与设备发生化学反应，不会腐蚀设备，不会导致环境污染；再次，模拟介质在进行培养之后，要确保其不会影响培养基的pH和质量；最后，模拟介质必须不具备抑菌作用，而且最好可以促进细菌的生长。

2.模拟设备的清洗、灭菌

对模拟设备的清洗和灭菌是保证无菌工艺验证准确性的重要前提条件，为此，作业人员在进行无菌工艺验证之前，要对模拟设备进行必要的清洗、灭菌，保证模拟设备没有被污染，影响无菌工艺验证的结果。另外，模拟生产设施的设计也应充分考虑对环境的潜在污染，注重设备设计的细节，温度与湿度的控制一定要合理，尽量减少污染。通常情况下，模拟产品的无端暴露是导致无菌工艺验证试验失败的主要原因之一，为此，在试验之前，要对所有的模拟设施、计算机控制系统、无菌环境等进行验证，尽量降低产品发生污染的几率，对于暴露的产品要提供百级空气层流罩；对于灭菌完成的产品，要加强保护工作，避免人员对设施或材料进行接触性作业。

3.培养基的选择

培养基的选择必须依据微生物的不同性质进行选择，但是在进行无菌验证之前，工作人员无法确认系统中细菌的性质，这时候，实验人员可以根据实际的无菌工艺选择适宜于大多数微生物生长的培养基。譬如大豆酪蛋白消化物培养基，由于很多无菌原料药的生产都会与空气接触所以被污染的微生物大多都是真菌或者需氧菌，厌氧菌污染的几率较小。

二、无菌原料药生产的无菌工艺验证过程

1.无菌工艺验证的时间控制

无菌原料药在生产的过程中，每一个操作都有相应的操作时限，因为操作的时间越长，物品受污染的可能性就会越大，实际的生产过程中要必须充分保证已经完成灭菌的物品不会再受微生物的污染。但是在进行无菌工艺的验证过程中，应该尽量将操作时间延长，使产品在最差的状况下生产，特别是对于已灭菌的物品从灭菌到使用的保存时间至少要延长到规定的保存期限。

2.无菌工艺验证的流程模拟

无菌原料药的生产工艺经过结晶过程时会出现相变的现象，为此，无菌工艺验证不可能完全按照原来的实际生产工艺进行模拟，在验证过程中主要分两步进行，首先，使用纯化水来取代原材料，然后经过除菌过滤等环节，从过滤器的底部将水放掉；其次，过滤器进行蒸汽灭菌之后，加入已经完成灭菌的模拟介质，并按照实际的生产工艺进行干燥和分装。另外，还应该注意在试验过程中温度的变化，观察模拟介质对温度是否敏感。

3.无菌工艺条件的模拟

为了保证验证结果的真实性，无菌工艺验证的工艺条件一定要严格依据实际生产条件，下面介绍三种主要的无菌工艺条件。首先是无菌工艺验证中的结晶操作，在结晶过程中经常会有相变产生，这在一定程度上增加了模拟的难度，为此，实验人员一方面可以选择2种模拟介质，使这两者在结晶的过程中发生反应生产第三种模拟介质；另一方面实验人员可以使用同一种液体进行介质模拟结晶过程流经所有管路加到结晶罐中。如果结晶过程中有加晶的操作，无菌工艺验证的过程中也应该进行此项操作，为了保证晶体粒度均匀，在结晶过程中要注意降温，但是在进行无菌验证时可以取消这一环节，因为大多数的微生物在低温环境下不易于生长。

其次，注意物料的暴露操作，无菌原料药的生产工艺涉及的设备较多，并且不同环节的生产工艺各不相同，在进行无菌工艺验证的过程中，应该根据不同工艺的特点选择不同的模拟介质，尽量减少模拟设备、物料以及产品的暴露，对于一些开口处，最好用呼吸器加以保护。另外，对于所有的暴露产品都要进行本区域内的环境检测，主要包括对无菌室的温度、湿度、悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、换气次数以及表面微生物的检测，保证无菌工艺验证环境符合相关标准，增强验证结果的准确性。

最后，实验员要注意干燥和分装的验证环节，在无菌原料药的干燥过程中，温度一般会抑制微生物的生长，甚至会杀死微生物，为了避免无菌工艺验证失败，应该保证干燥的过程在室温下进行；对于无菌原料药的分装量一般会比较大，为此，在分装时应该不断减慢速度，增加产品的暴露机会，使无菌工艺验证在较差的环境下进行，保证无菌工艺验证的科学性和严格性。此外，在生产过程中会对每一个生产环节取样进行无菌测验，在取样时，试验人员一定要把握取样的数量和频率，保证取样的科学性和规范化以及所取样品应有代表性，使得取样测试结果能真正反映无菌原料药的实际情况，并确保样品不被污染。

4.无菌工艺验证的评定标准

在无菌原料药的生产过程中，包装的单位越大，总分装的容器量数就会越小，进而导致抽样测试的结果没有准确性。所以如果发现一个容器中的产品感染了细菌，就要对整个无菌生产工艺流程进行检查，并重复验证，保证至少连续3批产品全部合格之后才确认整个无菌工艺符合无菌要求。

5.无菌工艺验证的结果评价

无菌工艺验证完成之后，需要撰写相应的验证报告，通常情况下，无菌工艺验证报告的内容主要包括，验证目的、验证范围、验证职责、验证内容、验证过程分析以及验证结论等。最后，验证报告应该交由参与验证的生产、质量等相关部门进行审核批准之后，企业方可进行无菌原料药的生产。

结语

无菌原料药的无菌工艺验证是贯穿整个无菌原料药的生产过程中，包括配制溶液、除菌、结晶、过滤、洗涤、干燥、粉碎、混合和分装等环节，在无菌原料药的生产过程中，每个环节都应该注重灭菌，而且只有经过无菌验证之后才能确保无菌原料药的无菌性能，试验人员要选择合适的介质模拟无菌原料药，以符合整个生产工艺流程需要，同时检测介质中是否存在细菌。