E-cadherin、NET-1在非小细胞肺癌中的表达及意义

李慧芳1龚幸春1孙慧元1王强2通讯作者

常州市武进人民医院江苏常州213017

【摘要】目的：探讨非小细胞肺癌中E-钙黏蛋白、NET-1的表达及意义。方法：采用免疫组织化学SP法，检测65例NSCLC及10例正常肺组织中E-cadherin、NET-1的表达，并探讨其意义。结果：（1）E-cadherin在NSCLC中的阳性表达率明显低于癌旁正常肺组织（p=0.000）。NET-1在NSCLC中的阳性表达率明显高于癌旁正常肺组织（p=0.007）。（2）NET-1、E-cadherin在NSCLC中的表达差异与患者性别、年龄、病理类型无关(p>0.05)，但与NSCLC组织的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移相关（p<0.05）。结论：E-cadherin、NET-1的表达越高，NSCLC的分化程度越低，临床分期越晚，淋巴结转移几率越大，恶性程度越高，可作为临床评估非小细胞肺癌恶性程度的指标，对判断NSCLC患者预后有参考价值。

【关键词】非小细胞肺癌；NET-1；E-cadherin

ExpressionsandSignificanceofE-cadherinandNET-1inNon-smallCelllungcancer

LIHuiFang1，GONGXingChun1，SUNHuiYuan1，WangQiang2.(1.DepartmentofPathology，2.DepartmentofCardiothoracicsurgery，Thepeople’shospitalofWujin，Changzhoug，Jiangsu213017，CHINA)

?【Abstract】ObjectiveToexploretheexpressionsandsignificanceofE-cadherinandNET-1inNSCLC.MethodsSPimmunohistochemicalstainingwasusedtoexaminetheexpressionsofE-cadherinandNET-1in65NSCLCspecimensandin10normallungtissues.Results(1)ThepositiverateofE-cadherininlungcancerwassignificantlylowerthanthoseinthenormaltissues.ThepositiveratesofNET-1inlungcancerwassignificantlyhigherthanthoseinthenormaltissue.(2)E-cadherinandNET-1expressionswerenotcorrelatedwithage,sex,pathologicalpatternandtumorposition(P>0.05)；butcorrelatedwithdifferential,clinicalstageandlymphnodesmetastasis(P<0.05)．ConclusionsThemorehigherexpressionsofNET-1、E-cadherininNSCLC,themorelowerthedegreeofNSCLC’sdifferentiation,themorehighertheclinicalstage,themorechancetolymphnodemetastasis,andthemorehigherthemalignantdegreeofNSCLC.NET-1andE-cadherinmaybevaluabletojudgetheprognosisandevaluatethemaglignantdegreeofNSCLC.

[Keywords]NSCLC;NET-1;E-cadherin

非小细胞型肺癌（NonSmallCellLungCancer,NSCLC）是肺癌的主要类型之一，约占肺癌总数的80-85%。E-钙黏蛋白（E-cadherin）主要介导同型细胞间的黏附反应，其表达缺失导致肿瘤易于扩散和转移。NET-1（(newESTtetraspannumbered1，NET-1)）在细胞信号转导、调节、黏附、移动、增生和分化中均起着重要作用[1]。我们通过检测E-cadherin、NET-1在NSCLC中的表达，探讨两者在评估NSCLC的恶性程度及预后中发挥的作用。

材料与方法

一、病例与标本收集2010年1月-2015年12月我院手术切除的NSCLC标本65例。全部病例的诊断与临床分期明确。65例标本中男性53例，女性12例；年龄35-86岁，中位年龄60岁。随机取10例NSCLC病人正常的肺组织作为对照组，所有肺组织均作免疫组化及HE染色。

二、主要试剂鼠抗人单克隆抗体E-cadherin，SP免疫组化检测试剂盒购自福州迈新生物技术公司，兔抗人多克隆抗体NET-1的制备由美国旧金山基因生物技术公司协助完成。

三、免疫组织化学方法常规脱蜡水化。组织抗原修复，DAB显色，苏木精复染，常规脱水中性树胶封片。选取已知阳性的组织切片作为阳性对照，未用一抗处理的切片作为阴性对照。

四、结果判断方法在低倍镜×100下寻找阳性肿瘤区域。E-cadherin、NET-1阳性染色均定位于癌细胞的细胞质或细胞膜上，呈棕黄色颗粒，对阳性表达分别采用双评分法、半定量积分法判断。

五、统计学处理应用SPSS13.5统计分析软件对相关数据进行统计处理。两组间比较采用双向有序列联表关联性分析，其与各临床病理特征之间的关系采用χ2检验，其与影响生存预后的联合效应采用Cox比例风险模型进行多因素分析。采用Spearman等级相关分析两指标间的关系。P<0.05视为差异有统计学意义。

结果

一、NSCLC组与对照组中E-cadherin、NET-1表达情况的比较。

E-cadherin、NET-1均表达于癌细胞的细胞质或细胞膜上（分别为图片1-2，图片3-4）。65例NSCLC中，E-cadherin、NET-1的阳性率分别为56.92%、81.54%；对照组中E-cadherin、NET-1的阳性率分别为100.00%、30.00%。经统计学处理，NSCLC病人中，E-cadherin、NET-1的平均秩次为34.18（=2221.5/65）、40.56（=2636.5/65），对照组病人的平均秩次为62.85（=628.5/10）、21.35（=213.5/10）。Mann-WhitneyU统计量依次为76.5、158.5，WilcoxonW统计量依次为2.222E3、213.5，两法的Z检验统计量完全一致，依次为Z=-4.036，p=0.000（双侧）、Z=-2.707，p=0.007（双侧）。其两组人群RD值的分布均有显著性差异。见表1

表1E-cadherin、NET-1在NSCLC组与正常肺组织中表达的比较

二、NSCLC组织中E-cadherin、NET-1的表达与临床病理因素间的关系

NSCLC组织中E-钙黏蛋白、NET-1的表达与肿瘤的临床分期(F=20.963,p=0.000;F=5.035,p=0.028)、分化程度(F=6.235,p=0.015;F=20.843,p=0.000)及有无淋巴结转移（F=32.514,p=0.000;F=8.232,p=0.006）有显著相关（p<0.05），而与患者性别(F=0.012,p=0.915;F=0.031,p=0.862)、年龄(F=2.262,p=0.138;F=0.000,p=0.987)及病理类型(F=1.050,p=0.309;F=0.006,p=0.938)无显著相关（p>0.05）。见表2

表2E-cadherin、NET-1的表达与NSCLC临床病理因素的关系

三、NSCLC组织中E-钙黏蛋白、NET-1表达的相关关系

65例NSCLC组织中E-cadherin与NET-1的表达有相关性（χ2=21.8294，p<0.0001），进一步做spearman等级相关分析，结果发现两者在NSCLC中的表达呈负相关（r=0.7421，p<0.0001）。见表3

表3E-cadherin、NET-1在NSCLC组织中表达的相互关系

讨论

非小细胞肺癌的发生、侵袭与转移是恶性肿瘤最本质的生物学特征之一，因此对NSCLC转移和侵袭的研究具有重要的临床意义。

NET-1是由Serru等[1]于2000年在EST数据库中发现的。其在肿瘤细胞的增殖、迁移、内吞作用和诱导血管形成中起重要作用[2]。NET-1可以协同肿瘤生长因子促进肿瘤的生长，或识别宿主细胞以外的胞体直接刺激肿瘤细胞的增殖[3-4]。本研究发现肺癌中NET-1的表达较正常肺组织显著升高，且与肺癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移成正相关。因此NET-1的异常表达可能是引起和维持肺癌恶性表型的原因之一。

E-cadherin的表达降低或缺失可使得肿瘤细胞易于浸润及转移[5]。本研究中显示，E-cadherin在NSCLC中的表达率（56.92%）较对照组（100.00%）明显降低，且随着肺癌恶性程度的进展及淋巴结转移的出现，其表达率均随之下降。

我们通过对65例NSCLC中NET-1、E-cadherin进行联合检测，发现两者在NSCLCL中的表达呈负相关。

综上所述，E-cadherin和NET-1两者在NSCLC中的异常表达均与肿瘤的恶性生物学行为有关，且两者密切相关，提示其可作为临床评估NSCLC患者疾病进展及预后的重要指标。

参考文献

[1]SerruV，DessenP，BoucheixC，eta1.Seqenceandexpressionofsevennewtetraspans[J].BiochimBiophysActa，2000，1478(1):159-163.

[2]LeydenJ，MurrayD，MossA，eta1.NET-landMyeov:computationallyidentifiedmediatorsofgastriccancer[J].BrJCancer.2006，94:1204-1212.

[3]HouFQ，LeiXF，YaoJL，etal.Tetraspanin1isinvolvedinsurvival，proliferationandcarcinogenesisofpancreaticpancreaticcancer[J].OncologyReports，2015，34(6):3068-3076.

[4]邢娜娜，张慧慧，谢佳琪等.敲除TSPAN1抑制人结肠癌细胞的生长和侵袭[J].医学研究杂志，2016，45(1):29-33.

[5]YangYL，ChenMW，XianL，etal.PrognosticandclinicopathologicalsignificanceofdownregulatedE-cadherinexpressioninpatientswithnon-smallcell?lung?cancer(NSCLC):ameta-analysis[J].PLoSOne，2014，9(6):e99763.

本文已经本人认真校对，内容真实无误，文责自负，请以此稿为准。

【作者单位】常州市武进人民医院，江苏常州天宁区永宁北路2号，213017

【作者简介】李慧芳（1980-）女，病理科，主治医师，江苏常州人。email:[e-mail].；Tel:[phone]

【通讯作者】王强，(1979-)男，心胸外科，副主任医师，硕士，江苏常州人。主要研究方向：食管癌、肺癌的微创治疗。email:[e-mail]