抗癌药物全身主动过敏试验剂量设计探讨

贾芳芳沈姣岳鹏蔡鸣刘晶

贾芳芳沈姣岳鹏蔡鸣刘晶（通讯作者）

（南京工业大学江苏省药物研究所江苏南京210009）

【摘要】目的探讨全身主动过敏试验的剂量设计。方法以注射用盐酸吉西他滨为供试品，设计全身主动过敏试验，并观察试验结果。结果注射用盐酸吉西他滨全身主动过敏试验结果为阴性。结论抗肿瘤类药物的全身主动过敏试验，应按动物暴露剂量下的实际耐受情况，合理设计ASA试验的暴露剂量水平。

【关键词】被动皮肤过敏注射用盐酸吉西他滨剂量设计

【中图分类号】R979.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）17-0078-02

在药物安全性评价中，全身主动过敏试验是给致敏成立的动物静脉注射抗原，观察抗原与IgE抗体结合后导致肥大细胞、嗜碱性细胞脱颗粒、释放火星戒指而至的全身性过敏反应[1]。

药物安全性评价中，抗肿瘤药物是不可缺少的一环，而抗肿瘤药物往往伴随着对机体细胞的杀伤和抑制，例如注射用盐酸吉西他滨是一种人工合成的新型二氟核苷类抗代谢抗肿瘤药，临床上主要用于治疗局限晚期或已转移的非小细胞肺癌，局限晚期或已转移的胰腺癌[2]。其对血液系统作用产生的不良作用主要有对骨髓产生抑制作用，可出现贫血、白细胞降低和血小板减少[3]。笔者以注射用盐酸吉西他滨为例，探讨药物安全性评价中如何合理进行抗肿瘤药物的剂量设计。

1材料和方法

1.1材料

实验动物：24只普通级豚鼠，体重285-315g，雌雄各半，购于南京市江宁区青龙山动物繁殖场。动物饲养于托盘饲育架（180×50×200cm）上的悬吊式不锈钢饲育笼（40×30×20cm）内，每盒3只。动物室温度：20-26℃；相对湿度：40-70％；照明：150-300Lux(明暗各12h)；噪音：60dB以下；换气次数：10-18次/小时。动物饲料采用全价兔颗粒饲料，购于江苏省协同医药生物工程有限责任公司，批号20100322、20100531。

实验所用供试品及其他试剂相关信息见表1。

表1供试品及试剂相关信息

1.2方法

豚鼠24只分为4组，每组6只雌雄各半，分成注射用盐酸吉西他滨高剂量组（16.6mg/kg）、低剂量组（8.3mg/kg）、溶媒对照组和阳性对照组。致敏阶段共给药3次，隔日腹腔注射，给药体积为0.5ml/300g；在末次注射后的第14天静脉给予高、低剂量及卵清白蛋白2ml/300g进行攻击。观察动物注射后有无抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克甚至死亡等过敏反应症状。计算过敏反应发生率，进行综合判断。

攻击注射后，如发现有过敏反应时，应取健康未致敏豚鼠2只，自静脉注射供试品2ml，观察有无由于药物作用引起的类似过敏反应症状，以供作结果判断的参考。

2结果

注射用盐酸吉西他滨高、低剂量组激发注射后，豚鼠均未出现躁动、挠鼻、喷嚏、呼吸困难、死亡等过敏反应症状，过敏反应为阴性；阳性对照组激发注射后均出现阳性症状，极短时间内死亡。阴性对照组激发注射后，豚鼠均未出现过敏反应症状，过敏反应为阴性。结果见表4。

表4豚鼠全身主动过敏试验结果（n=6）

3讨论

注射用盐酸吉西他滨的成人临床用量为1000mg/m2（60kg成人体表面积约为1.620m2，按成人体重60kg计，成人推荐用量为27mg/kg），周期为1次/周，而在《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》[4]中要求，致敏间隔为隔日一次，共3-5次；受试物低剂量组给予临床最大剂量（/kg或m2），受试物高剂量组给予低剂量的数倍量[4]。

而注射用盐酸吉西他滨做为抗肿瘤药，短时间内的多次给药势必会引起豚鼠机体的变化，有可能对实验结果产生影响。因此在正式实验进行之前，进行预实验是非常有必要的。

预试验的给药体积及剂量设计及观察期结束时试验结果见表5。

表5注射用盐酸吉西他滨预试验剂量设计

注：在第2次致敏后观察期开始的2天内，高剂量组动物全部死亡。

在预试验中，33.2mg/kg（约为成人推荐剂量的1.2倍，成人体重按60kg计）组动物全部死亡，16.6mg/kg组动物在观察期结束时全部存活。在正式试验中，将高剂量定为16.6mg/kg，约为成人用推荐剂量0.6倍，低剂量为8.3mg/kg，约为成人用推荐剂量0.3倍。激发结束后，高、低剂量组动物ASA试验均未出现阳性结果，判定注射用盐酸吉西他滨被动皮肤过敏试验结果为阴性。

虽然试验高、低剂量低于成人推荐剂量，但ASA试验的主要目的并不是为了找出动物的中毒剂量或中毒靶器官，致敏阶段要保证动物暴露在毒物中后能够存活下来，进而保证试验的顺利进行[4]。

抗肿瘤类药物对试验动物机体的损害作用较为严重，在设计试验方案时，不仅应考虑药物的暴露剂量水平，还考虑动物暴露剂量下的实际耐受情况。因此我们要根据不同药物的药理、毒理作用，依据《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》[4]，设计合理的试验方案，才能真正做好药物安全性评价工作。

参考文献

[1]袁伯俊,廖明阳,李波.药物毒理学实验方法与技术[M].北京:化学工业出版社.2007:247-249.

[2]范玮，李安琪.盐酸吉西他滨对慢性粒细胞白血病急变期细胞增殖凋亡的影响[J].临床医学,2011,31(5):95-96.

[3]GiovannettiE,MeyV,LoniL,etal.Cytotoxicactivityofgemcitabineandcorrelationwithexpressionprofileofdrug-relatedgenesinhumanlymphoidcells[J].PharmacologicalResearch,2007,55(4):343-349.

[4]国家食品药品监督管理局组织编写.药物研究技术指导原则.北京:中国医药科技出版社.2006:116-132.