简介:选择毕赤酵母GS115作为表达宿主,对抗菌肽Spinigerinα的突变体Spinigerinα′的基因进行胞外分泌表达,并选用致病性大肠杆菌、致病性的肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌作为敏感菌株,采用琼脂空穴扩散法对表达液进行抑菌效果的研究,并将其抑菌效果与突变前的抗菌肽Spinigerinα进行对比。结果表明,抗菌肽Spinigerinα′-1的抑菌活性降低,Spinigerinα′-2抑菌活性稍有增加,Spinigerinα′-3的抑菌活性最强,而Spinigerinα′-4和5酵母表达的蛋白无抑菌活性。为抗菌肽抑菌效果提高的研究奠定重要的基础。
简介:采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌。按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物,采用SOE—PCR法合成Brazzein基因,构建克隆载体pUC57-Bra与酵母表达载体pGAPZαA—Bra。将重组质粒线性化,电转导人Pichia.pastorisSMD1168中,用高浓度的Zeocin筛选高拷贝转化子。将重组菌株接种于YPD培养基诱导表达,进行SDS—PAGE分析。成功构建了分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌,SDS—PAGE表明,目标蛋白的相对分子量与理论值一致,诱导72h后的目的蛋白表达量达0.12dE。
简介:采用超声提取山楂粗黄酮,并测定了山楂粗黄酮对DPPH清除能力、总还原能力和β-胡萝卜素的漂白能力,结果表明,山楂粗黄酮具有良好的抗氧化活性,并且其抗氧化能力呈现出明显的剂量依赖关系,可作为一种新型的天然抗氧化剂。选取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉等5种菌种对山楂粗黄酮进行体外抑菌试验,结果表明,山楂粗黄酮对细菌有较强的抑制作用,而对于霉菌则效果不明显。山楂粗黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的最低抑菌质量浓度分别为3.125,1.5625,3.125mg/mL,最低致死质量浓度分别为6.25,3.125,6.25mg/mL。因此,山楂粗黄酮可以作为一种理想的抑菌添加剂使用。
简介:研究不同浓度的外源茉莉酸甲酯(MeJA)对"丰香"草莓(FragariaananassaDuchcv.Fengxiang)采后品质及果内抗氧化能力的影响。将供试草莓用MeJA在25℃下熏蒸处理9h并摊晾2h,最终MeJA浓度为1,100μmol/L。处理后置于5±1℃下贮藏(相对湿度90%~95%)。贮藏期间每隔3d取3盒(每盒30果)测定其各项指标。试验表明,1μmol/LMeJA维持草莓贮藏后期较高的可溶性固形物(TSS)、显著抑制整个贮藏期间还原糖积累。1μmol/LMeJA处理能显著提高PAL(Phenylalanineammonia-lyase)、C4H(Cinnamate-4-hydroxylase)活性,并延缓4CL(4-coumaroyl:CoA-ligase)活性的下降,从而有效诱导总酚和花青素类物质含量的增加,提高果实DPPH自由基清除能力,维持果实较高的抗氧化能力;100μmol/LMeJA处理对果实C4H和4CL活性的诱导效果不显著。适宜低浓度MeJA能够促进总酚和花青素的合成、提高DPPH自由基清除能力,可能是通过提高酚类、花青素等抗氧化成分合成途径关键酶PAL,C4H和4CL的活性实现的。因此,适宜浓度的MeJA处理在草莓采后抗氧化水平调节中具有重要作用。