简介:摘要目的了解云南省手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)监测中分离到的2株柯萨奇病毒A12型(Coxsackievirus A12, CV-A12)VP1区基因序列特征。方法对HFMD监测中获得的临床标本开展RD细胞上的病毒分离培养,通过荧光定量PCR和测序方法鉴定为CV-A12的毒株,进一步对其VP1区进行序列测定,并搜集GenBank中CV-A12其他型别的参考株,共同构建系统进化树,分析CV-A12的VP1区基因特征。结果获得2株CV-A12分离株的VP1区序列(888 bp),与2018年的云南参考株毒株同源性最高,其VP1区氨基酸在多个位点上与其他云南参考株存在特异突变。结论云南省HFMD标本中发现的CV-A12已经发生地区特异性VP1基因变异。
简介:摘要目的2016年冬季出现了一种重组型GII.2[P16]诺如病毒(norovirus,NoV),并造成了我国急性胃肠炎大规模暴发,本研究旨在探究2016—2017年该病毒在我国的进化动力学和时空传播模式。方法利用MEGA 7.0和BEAST等软件对先前获得的暴发标本中GII.2[P16] NoV全基因组、主要结构蛋白(viral protein 1,VP1)和RNA依赖RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因全编码区序列进行分析。结果序列分析显示此次重组型病毒VP1相比于RdRp基因的进化速度更快,在暴发中期,VP1蛋白的第256位出现了特异性氨基酸突变,即Val256Ile突变,且该突变位点形成的新型变异株在暴发后期成为优势流行株。基于该毒株P二聚体晶体结构的分析,发现该病毒VP1蛋白中第256位残基位点可能参与了B细胞抗原表位的组成,提示Val256Ile突变可能导致了新型变异株的抗原性发生改变,这可能是该病毒在暴发后期优势流行的原因之一,但需要进一步血清学实验的验证。基于贝叶斯地理推演结果显示,广东省可能为我国此次病毒流行的起源地,对该病毒在我国的暴发流行起了重要的作用。结论鉴于出现功能性改变的GII.2[P16]新型变异株和广东省为我国该型病毒的暴发中心,提示有必要在珠江三角洲地区对GII.2[P16] NoV开展持续的监测和研究。
简介:摘要目的观察2型糖尿病患者罹患新型冠状病毒肺炎后的主要临床特征及转归,并与非糖尿病患者进行比较。方法采取单中心回顾性观察性研究的方法,纳入于2020年1月1日至2月26日在中部战区总医院确诊为新冠肺炎的88例住院患者,分为糖尿病组和非糖尿病组,各44例。收集患者病史、实验室检查、院内治疗方案和疾病转归等相关信息并进行比较。结果糖尿病组患者临床症状多样,主要为发热(75.0%)、咳嗽(75.0%)、乏力(52.3%)等。与非糖尿病组相比较,糖尿病组入院时收缩压偏高[131.50(120.00, 140.75)对125.00(120.00,131.75)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa, P=0.021]、血氧饱和度偏低[96.00%(94.25%,97.00%)对97.00%(95.00%,98.00%),P=0.038];糖尿病组既往多合并高血压及慢性肾病;糖尿病组空腹血糖[7.64(6.12,15.43)对5.62(5.25,6.50)mmol/L,P<0.01]、白细胞介素6(IL-6)[19.85(6.50,43.38)对10.80(3.03,20.90)pg/ml,P=0.046]均显著高于非糖尿病组。病程中糖尿病组更容易出现继发感染(27.3%对9.1%,P=0.027)、ARDS(22.7%对4.5%,P=0.013)和休克(4.5%对0%,P<0.01);治疗上更多给予机械通气治疗(20.5%对4.5%,P=0.024);更易进展为危重型(20.5%对4.5%,P=0.024),进展为重症状态的时间更短[3(1.75, 5.25)对6(3.00, 12.00)天,P=0.019];重症状态的持续时间更长[26.5(15.00, 31.50)对9(8.00, 13.00)天,P=0.026]。结论感染新冠肺炎的2型糖尿病患者临床症状多样;多合并高血压、慢性肾病等疾病;炎症反应更明显;COVID-19并发症多,更容易短时间进展为持续重症状态。
简介:目的建立H9N2型禽流感病毒BALB/c小鼠模型。方法从江苏某农场新分离得到禽流感病毒A/Chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2),以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对该病毒的HA、NA基因进行鉴定和测序以确证。病毒经狗肾传代细胞(MDCK)3次单克隆纯化,之后肺对肺传代感染BALB/c小鼠,通过体重丢失、死亡率、半数致死量(LD50)评价病毒的感染性和模型的建立。结果A/chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2)型禽流感病毒通过肺对肺传代能感染小鼠,并且毒性逐渐增强,4次传代后能使小鼠致死,10次传代后病毒的LD50为10^-2.17。结论H9N2型禽流感病毒能在实验条件下感染哺乳类,并建立了研究禽流感病毒的BALB/c小鼠模型。
简介:摘要目的构建并拯救增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)标记的EGFP-EV-A71重组病毒。方法利用重叠PCR技术,以pMD19T-SDLY107全长质粒为模板,将2A蛋白酶识别序列加入到结构蛋白VP4的5′端;以pEGFP-N1质粒作为模板,扩增获得EGFP目的片段,将其插入到上述重组质粒中,得到重组质粒pMD19T-107-EGFP。经酶切和体外转录后,转染横纹肌细胞肉瘤(RD),拯救获得重组病毒EGFP-EV-A71。采用Karber法计算细胞培养半数感染量(CCID50)以测定病毒滴度。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同时间点的病毒复制水平,并绘制病毒复制曲线,比较重组病毒与母本病毒的复制力有无差异。乳酸脱氢酶(LDH)和细胞增殖(CCK-8)实验分别测定被感染细胞的细胞损伤率和存活率。结果包含EGFP的重组EV-A71感染性cDNA克隆被成功构建;转染RD细胞后,出现典型的细胞病变并且表达出较强的绿色荧光;重组病毒与母本病毒具有相似的复制动力学特征和致细胞病变效应。结论成功拯救了EGFP标记的重组病毒EGFP-EV-A71。
简介:摘要:薄壁零件刚性差,强度弱,在加工过程中由于材质本身的状态和加工过程中热应力等因素的影响,易产生变形,加工质量不易保证。本文主要从零件结构、技术要求、材料特点、工艺流程等方面对零件进行工艺研究,通过优化工艺流程,为控制零件变形提供保证,也为钣金类薄壁圆环(即平垫圈)零件加工提供了一套可鉴、可参考的完整的工艺方法。