简介：目的：探讨改良免疫组化染色法在诊断乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）的应用前景。方法：改良免疫组化染色法采用高温高压＋XXIV型蛋白酶消化的抗原修复法，行一抗和二抗两步孵育法，其中二抗与酶标多聚体相连。病人肾组织标本同时行免疫荧光染色法检测作对照。结果：（1）40例血清学HBsAg阳性患者的肾穿组织标本中，改良免疫组化染色法HBsAg阳性27例，阳性率为67．5％；HBcAg阳性7例（其中HbsAg同时阳性6例，HbsAg阴性1例），阳性率为17．5％；HbsAg、HBcAg同时阴性12例。免疫荧光染色法HBsAg阳性29例（72．5％）；HBcAg阳性10例（25．0％，均同时呈HbsAg阳性）；HbsAg、HBcAg同时阴性11例。（2）两种染色比较，HbsAg阳性率相近（改良组化67．5％VS荧光72．5％），其中同时阳性的有22例，同时阴性的5例，总一致率为67．5％（27／40），阳性一致率在改良免疫组化染色中为81．5％（22／27），在免疫荧光染色中为75．9％（22／29）。（3）10例血清丙氨酸转氨酶升高的患者中，改良免疫组化HbsAg染色阳性9例，免疫荧光染色阳性7例；血白蛋白〈30g／L而尿Pro定量未达到〉3．5g／24h的患者7例；6例病理呈膜性或／和膜增殖性肾炎（其中改良组化染色阳性5例，荧光染色阳性3例）。有2例行肝组织穿刺活检，病理显示肝脏病变。结论：改良免疫组化染色可提高HBV-GN的乙肝抗原检测率，有临床应用推广价值。

简介：目的探讨腺病毒介导的白介素-24（IL-24）基因转移对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（GMC）增生的抑制作用。方法构建携带IL-24基因的复制缺陷型腺病毒载体（Ad．IL-24）和携带绿色荧光蛋白的对照载体（Ad．GFP），在293细胞中扩增，5％FCS／DMEM中分组培养GMC，转染Ad．IL-24或Ad．GFP，加或不加LPS（10mg／L），分别用RT-PCR和ELISA检测IL-24mRNA和蛋白的表达；MTT（四甲基偶氮唑蓝法）和流式细胞术检测系膜细胞增生活性。结果培养GMC及LPS激活的GMC均未见IL-24表达。AdIL-24感染GMC后4～48hIL-24mRNA有稳定表达，培养上清IL-24含量在24和48h分别为（79．00±3．61）μg／L和（98．00±2．00）μg／L。感染AdIL-24对系膜细胞增生无影响，但可显著抑制LPS诱导的GMC增生。结论外源性IL-24基因转移可有效抑制LPS诱导的系膜细胞增生，Ad．IL-24有可能成为一种针对GMC增生的基因治疗方法。

简介：目的探讨腺病毒介导的野生型p53在前列腺癌基因治疗中的可能性及其机制.方法培养前列腺癌细胞系PC3M,转染腺病毒介导的野生型p53,检测其增殖和凋亡水平变化,并检测其bax蛋白及mRNA水平.结果腺病毒介导的野生型p53可高水平地转染入PC3M细胞,转染后的PC3M细胞增殖受到抑制、凋亡水平增高,细胞中bax蛋白及mRNA水平皆增高.结论腺病毒介导的野生型p53可抑制PC3M细胞增殖并促进其细胞凋亡.其促进凋亡的机制可能是通过促进bax表达而实现的.

简介：肾病综合征并发肺结核、乙型病毒性肝炎,三者在发病机制、病情发展上错综复杂,可相互影响致病情加重危及患者生命。但在治疗上有矛盾之处,处理棘手,值得临床进一步探讨。现报告我院收治1例肾病综合征并发急性粟粒型肺结核及慢性乙型病毒性肝炎,给以中西医结合治疗及观察其疗效和安全性,为临床治疗此类复杂病例提供更多的论据。病例患者,55岁,女性,因＂双下肢水6月,伴多汗、咳嗽、乏力2周＂入院。

简介：目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞，观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞，用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平，并采用Transwel!小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后，与对照组和空白对照组相比，体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高，而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低（P〈0．01）。结论Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达，并显著抑制T24细胞的侵袭能力。

简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.