简介：目的比较患者体外冲击波碎石术（ESWL）术后行腹腔镜下输尿管切开取石术（RLU）、输尿管镜取石术（URS）和经皮肾镜取石术（PCNL）的疗效和并发症。方法回顾性分析2006年9月至2014年8月贵州医大附属医院行ESWL术后采用RLU（A组）、URS（B组）和PCNL（C组）3种微创手术方法治疗输尿管上段残石患者共651例资料。比较3组患者基本情况、手术效果及并发症。并采用修改后的Clavien-Dindo评分系统来评估并发症的严重程度。结果RLU组手术成功率（100%）、清石率（100%）均高于URS、PCNL两组。URS组手术时间为（46±9.1）min，均短于RLU组（54±10.3）min、PCNL组（62±15.2）min。URS组出血量最少（12±5.1）mL。胃肠功能恢复时间RLU组（23±2.2）h，明显长于URS组（8±0.6）h和PCNL（11±4.3）h（P〈0.05），3组术后下床活动时间和止痛药的使用无显著差异（P〉0.05）。PCNL组并发症发生率（21.9％）高于RLU组和URS组，RLU组没有严重并发症。RLU组术后有4例患者发热，明显低于URS组（24例）和PCNL组（21例）。RLU组术后未出现尿脓毒血症，而URS组有11例、PCNL组有13例患者分别出现尿脓毒血症。结论RLU是处理输尿管上段结石EWSL失败后一种更安全有效的微创手术方法。

简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.