简介：TheaimofthisstudyistoinvestigatethefeasibilityandmechanismofhIL-2-preSDNAvaccineaspreventionandtherapeuticapproachagainstHepatitisB.EukaryonexpressionvectorinvolvinghIL-2andpreSgenewasconstructedwithrecombinanttechniqueandtransferredintonormalBALB/cmiceandHBVtransgenicmice(Tg-Mice)respectively.Tnenaseriesofdetectionwereperformed:detectionofanti-preS2,HBsantibodyandHBsAginBALB/cmiceandTg-micewithELISA,quantificationofHBVDNAcopiesinHBVTg-miceserumwithreal-timePCR,determinationofhepatitisdegreewithimmunopathologicalHEstaininganddetectionofliverfunction.Anti-preS1canbedetectedat4^th,6^thand10^thweekininoculatedBALB/cmice.Injectionwithgenegungainedanadvantageovermuscularandsubcutaneousinjectionsinceitacquiredjust1/10inoculationquantity(10μg/mouse).HighestexpressionofIgG2aat4^thweeksuggestedThl-mediatedimmuneresponse,whichfacilitatedHBVcleaning.OfallinoculatedHBVTg-mice,80%ofthemshowedanfi-preS2,HBsantibodypositiveandHBVDNAdecreased,and20%showednegativeforHBsAg.HEstainingtohepatictissueshowedobviousinfiltrationofinflammatorycells,swellingandgranulardegenerationofhepatocytes.Inourstudy,IL-2-preSDNAvaccinewhichcanprovokethehumoralandcellularimmuneresponseandbreaktheimmunetolerancesupportsthedesignationandconstructionofnewvaccineagainstHBVandspecificimmuneremedyforHBVcontinuousinfection.
简介：ＳＴＵＤＹＯＮＭＥＴＡＳＴＡＳＩＳＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＧＥＮＥＳＣＲＥＥＮＥＤＢＹＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＹＨＩＬＱｉＴｅｎｇｐｉｎｇ齐藤平；Ｚｈａｎｇｐｅｉｊｉ张沛基；ＷｅｉＳｈｕｇｕａｎｇ魏曙光；ＣｈｅｎＤｏｎｇ陈东；ＬｉＲｅｎ李仁；Ｗ...
简介：摘要目的构建hIL-10基因的酵母表达载体，为hIL-10在毕赤酵母高效表达和生物学功能研究奠定基础。方法采用PCR从质粒pORF5-hIL-10中扩增hIL-10基因，以内切酶EcoRI/XbaI对hIL-10基因和质粒pPICZαA进行酶切，将酶切产物进行连接，纯化连接产物并电转化E.coliDH5α，用含Zeocin的LB培养基筛选重组大肠杆菌并抽提质粒进行酶切和DNA测序鉴定；以重组质粒电转化感受态毕赤酵母，以不同浓度Zeocin的YPDS平板筛选重组酵母菌株并对重组酵母作菌落PCR鉴定。结果经PCR从质粒pORF5-hIL-10中扩增获得大小约540bp的片段；重组质粒经EcoRI/XbaI酶切后获得约540bp和3500bp的两种片段；DNA测序结果与Genbank中hIL-10基因序列一致；重组酵母经菌落PCR也获得540bp的片段。结论成功构建了hIL-10基因的酵母表达载体pPICZαA-hIL-10。
简介：摘要目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）前S1抗原（Pre-S1）与乙肝病毒DNA（HBV-DNA）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）之间的相关性，为乙型肝炎的诊断、疗效评估提供科学依据。方法1120例临床标本分别采用定量PCR技术检测HBV-DNA载量；采用酶联免疫法（ELISA）法检测HBeAg;采用酶联免疫法（ELISA）检测前S1抗原。结果569例HBV-DNAPCR阳性标本中，前S1抗原阳性448例，HBeAg阳性252例，两种检测结果间存在显著差异（P<0.05）。结论血清前S1抗原、HBeAg与HBV复制密切相关。作为反映HBV复制的指标，前S1抗原优于HBeAg，前S1抗原在乙肝流行病学调查上和临床诊断及疗效观察方面有重要的临床价值。
简介：ToanalyzetheantitumorpotentialandmechanismofactionofsimultaneousNewcastlediseasevirus(NDV)hemagglutinin-neuraminidase(HN)andhumaninterleukin18(hIL-18)genetransferinC57BL/6micewithH22hepatoma,themousemodelwithH22hepatomawasestablishedinC57BL/6mice,andtheantitumoreffectsofthecombinedapplicationofNDVHNandhIL-18wereevaluatedinvivo.Theresultsshowthatthegrowthofestablishedtumorsinmiceimmunizedwithadenovirus(Ad)-HNinconjunctionwithAd-hIL-18wassignificantlyinhibitedcomparedwiththatinmiceimmunizedwithAd-HN,Ad-hIL-18alone,ortheemptyvector(Ad-mock).Furthermore,theimmunizationofmicewithAd-HNinconjunctionwithAd-hIL-18elicitedstrongnaturalkilleractivityandH22tumor-specificcytotoxicTlymphocyte(CTL)responsesinvivo.Inaddition,TcellsfromthelymphnodesofmiceimmunizedwithAd-hIL-18orAd-HN+Ad-hIL-18secretedhighlevelsoftheTh1cytokineIL-2andinterferon-γ(IFN-γ),indicatingthattheregressionoftumorcellsisrelatedtoaTh1-typedominantimmuneresponse.TheseresultsdemonstratethatvaccinationwithNDVHNtogetherwithhIL-18maybeanovelandpowerfulstrategyforcancerimmunotherapy.
简介：摘要目的分析乙肝PreS1抗原及抗体在乙肝诊断中的应用效果。方法选取80例行乙肝五项指标检查结果中几种常见模式为样本，使用酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体。结果9例样本检测PreS1抗原呈阳性，大三阳5例，小三阳2例，45例样本检测PreS1抗体呈阴性，大三阳1例，小三阳12例。乙肝病毒PreS1抗原阳性组和阴性组与HBV-M进行分析，乙肝表面抗原、乙型肝炎E抗原、乙肝核心抗体阳性数和阴性数差异有统计学意义（P＜0.05），乙型肝炎表面抗体和乙型肝炎E抗体的阳性数和阴性数差异无统计学意义（P＞0.05）。结论乙肝病毒PreS1抗原及抗体检查可辅助乙肝两对半检查，有助于及时发现乙肝感染患者。
简介：出血是大剂量电离辐射后所致损伤的主要临床症状之一，且可发展在民致命的出血综合征，国内外均尝试在辐射或化疗动物模型上用一些细胞因子促进血小板恢复，以减少出血，但由于多次注射等不尽人意，因此人们仍在进行新措施的研究，用病毒载体进行基因治疗有一定的优势，但也有可能增加感染的几率，本实验尝试运用质粒载体对辐射损伤进行基因治疗，本研究观察了辐射对体内质粒载体基因转移效率的影响，以及转移hIL-6基因后对照射小鼠造血恢复的影响，经6.5Gy照射的小鼠一次肌内注射表达IL-6的质粒DNA后，用ELISA方法检测血浆IL-6水平，以蛋白表达量评价基因转移效率，结果显示，治疗组从照后4天hIL-6开始增加，于照后1天左右达峰值，而此时对照组仍处于低水平，治疗组照后28天时蛋白表达仍维持在较高水平，不同照射剂量治疗组的结果相比，7.5Gy照射组hIL-6水平约为5.0Gy照射组的两倍，体内高表达的hIL-6明显促进照射小鼠造血恢复，治疗组不仅血小板物最低值明显提高，而且骨髓细胞中CFU-GEMM和CFU-Meg也明显增加，外周血血小板板数的增加部分是由于网织血小板的增加，说明巨核细胞释放血小板的速度加快，以上结果表明电离辐射要以明显提高IL-6质粒DNA的体内转染效率，为质粒载体基因的方法治疗辐射所至的造血损伤奠定了实验基础。
简介：【摘要】：集体备课活动是现代教学中不可或缺的重要内容，说课是集体备课中的重要环节，通过有效措施提高教师说课水平，达到提升集体备课效果的目的，从而整体提高课堂教学质量。
简介：二次根式(a~2)~(1|2)和((a~2)~(1|2))有什么区别吗?主要表现在下面三个方面:1．读法不同．(a~2)~(1|2)读作根号a的平方,而((a~2)~(1|2))读作括号根号a括号的平方．2．表示的意义不同．(a~2)~(1|2)是求a~2。的算术平方根．((a~2)~(1|2))求的是a的算术平方根的平方．一个表示求一
简介：Twonewdicyanamidecoordinationpolymers,{Mn(dmpz)[N(CN)2]2}2(1)and{Cu(dmpz)[N(CN)2]2}2(2)(dmpz=3,5-dimethylpyrazole),weresynthesizedandcharacterizedbysinglecrystalX-raydiffractionanalysisandIRspectroscopy.In1and2themetalionshavetwodifferentcoordinationmodes,whereoneiscoordinatedtofourdicyanamideanionsandtwomonodentatedmpzmoleculestoformaslightlydistortedoctahedralgeometry,whiletheotheradoptsoctahedralgeometry,surroundedbyfournitrileNatomsandtwoamideNatomsofthedicyanamideanions.Bothcomplexescontaintwoalternatingchainsthatareparalleltoeachother.
简介：摘要目的使用preS1-tp融合蛋白作为新型的载体，介导针对乙型肝炎病毒（HBV）核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区的小干扰RNA(siRNA)进入感染HBV的肝细胞，从而抑制HBV复制和共价闭合环状DNA的形成。方法以慢病毒感染系统为基础，建立表达人牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽的HepG2.2.15细胞；针对HBV NLS区设计合成siRNA；表达纯化preS1-tp融合蛋白，检测其进入细胞和与DNA结合的能力；以preS1-tp融合蛋白为载体，介导NLS siRNA递送至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞中,观察其对HBV复制和共价闭合环状DNA水平的影响。多组间比较采用方差分析，计量资料用t检验分析组间差异。结果成功构建HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞株并合成筛选出显著抑制HBV复制的HBV NLS siRNA。纯化并大量表达preS1-tp融合蛋白，以该融合蛋白为载体靶向输送HBV NLS siRNA，结果显示，融合蛋白可以有效靶向输送siRNA至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞，不仅可有效抑制细胞中HBV mRNA，HBsAg和HBeAg表达，还能显著降低HBV DNA和共价闭合环状DNA的水平。结论preS1-tp融合蛋白利用preS1与肝细胞HBV受体结合，tp与核酸结合的双功能特点，将针对HBV NLS的siRNA靶向至感染HBV的靶细胞，靶向阻断rcDNA转运入细胞核，使siRNA发挥抑制HBV复制和共价闭合环状DNA合成的作用，为HBV感染所致慢性乙型肝炎治疗提供新策略，为彻底清除体内HBV提供新的研究视角。
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