简介:本文报告了BCR-ABL,融合蛋白及其与白血病表型的关系。首先报告BCR-ABL,融合基因的结构及其转录本,其中包括这些融合基因可分为M-bcr,m-bcr和u-bcr三种类型及其见于那些白血病;其次报告了BCR断点位置的变化,ABL的特殊断点,BCR-ABL信息RNA的拼接,BCR-ABL融合蛋白的结构与白血病表型的关系;此外,还介绍了BCR/ABL细胞有染色体的其它异常和Ph染色体的变种等;最后论述了BCR/ABL融合蛋白起源于何种细胞系,何种成熟阶段。少数文献报告此蛋白起始于多能干细胞。
简介:为了探索CML的治疗新思路研究了siRNA(smallinterferingRNA)对K562细胞株bcr-abl融合基因表达的抑制作用.制备特异性对应bcr-abl融合基因的siRNA,转染K562细胞株,采用RT-PCR法测定bcr-abl融合基因mRNA的表达.结果表明:siRNA对bcr-abl基因表达的抑制作用随浓度的增加而增强,0.2μgsiRNA能使bcr-abl融合基因mRNA的表达在24和48小时分别降低至对照组的19.9%和26.6%,但72小时时恢复到原水平,同时转染siRNA后细胞生长受到抑制.结论:siRNA可以有效的抑制K562细胞株中bcr-abl融合基因的表达.
简介:Objective:Toinvestigatetheinvitrocleavageabilityandeffectsonapoptosisandcellgrowthofthebcr-ablfusiongenespecificmulti-unitribozymes.Methods:Threefusionpointspecificribozymesweredesignedandthemulti-unitribozymes'invitrotranscriptionvectorandretroviralvectorwereconstructed.Theinvitrocleavageabilitywastested.TheretroviralvectorwastransfectedintoK562cellandtheeffectsonproliferation,apoptosis,cellcycleandcellstructurewereobserved.Results:Multi-unitribozymeshadinvitrocleavageefficiencyof70.8%,whichwasmoreefficientthansingle-unitanddouble-unitribozymes.TransfectionoftheretroviralvectoroftheribozymeintoK562cells,inducedinhibitionofcellgrowthandapoptosis.TheincorporationrateofDNAinribozymestransfectedK562cellswasgreatlydecreasedalongwithtimepassed,withaninhibitionrateofmorethan50%after96hoftransfection.UnderFCM,18.4%ofthecellsunderwentapoptosis72haftertransfectionandmorecellswereblockedinGphase,withtheratioinSphasegreatlydecreased(41.9%).Underelectronmicroscope,compactionofnuclearchromatinandapoptosisbodieswereobserved.Conclusion:Multi-unitribozymesspecifictobcr-ablfusiongenecanbeusedtotreatCMLandtopurgebonemarrowforself-grafting.
简介:慢性粒细胞白血病(CML)的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治CML的方向之一,包含BCR-ABL融合区的多肽具有良好的免疫原性,在体内、外可诱发BCR-ABL特异的T细胞克隆。以BCR-ABL融合肽瘤苗激发特异性T细胞应答CML免疫治疗有希望成为根治CML残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术,设计一个280bp的融合抗原基因片段,包含HLA-A2,HLA-A3,HLA-DR11等3
简介:为了探索检测Ph+/bcr-abl+急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的微小残留病变(MRD)的简便而灵敏的方法,对84例初治ALL患者和其中的缓解期患者的骨髓分别用细胞遗传学、流式细胞术和巢式RT-PCR检测.结果表明,缓解期患者骨髓中不存在Ph′染色体,巢式RT-PCR方法检测到11/14例缓解期患者存在MRD(bcr-abl融合基因)(阳性率78.57%),而流式细胞术检测到5/14的缓解期患者阳性(阳性率35.71%).巢式PCR的灵敏度达到10-6-10-7水平,流式细胞检测的灵敏度达到10-4-10-5水平.结论:Ph染色体核型分析技术检测MRD不够灵敏,而巢式RT-PCR检测MRD较流式细胞技术检测灵敏度更高,且更易于开展应用.