简介：摘要胰岛β细胞功能紊乱和凋亡是2型糖尿病发生和发展的重要病理基础之一，内质网应激（ER-S）和炎症之间的串扰是胰岛β细胞凋亡的重要因素，而联接内质网应激和炎症的关键蛋白是硫氧还相互作用蛋白（TXNIP），本综述主要探讨内质网应激在胰岛β细胞功能紊乱和凋亡中的作用机制，旨在为2型糖尿病的发病机制研究和治疗策略提供线索。

简介：目的探究TXNIP的基因多态性和启动子区甲基化CpG岛、转录因子结合位点。方法利用生物信息学在线软件获得TXNIP基因3′UTR多态性和mRNA的表达情况；利用相关软件获得TXNIP启动子区序列，预测甲基化CpG岛及转录因子结合部位。结果TXNIP基因3′UTR多态性位点rs7211、rs7212和rs4755的不同基因型与mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．05）；启动子区序列中甲基化CpG岛位于1763—1943bp处。结论利用生物信息学分析可以更有效地了解基因多态性和启动子区在基因表达调控中的作用。

简介：摘要目的探讨TXNIP基因与Kiss-1基因在结直肠癌中表达的相关性以及TXNIP基因与结直肠癌临床病理特性的关系。方法采用免疫组化方法检测71例结直肠癌组织中TXNIP基因与Kiss-1基因的蛋白表达水平，RT-PCR方法分析51例结直肠癌组织中TXNIP与Kiss-1基因基因的mRNA水平。结果免疫组化和RT-PCR结果均表明在结直肠癌组织中TXNIP基因与Kiss-1基因的表达呈明显正相关性(P<0.05)。在结直肠癌组织中，伴淋巴结转移组、远处转移组和DukesC、D组TXNIP基因阳性表达率低于无淋巴结转移组、无远处转移组和DukesA、B期组(P<0.05)。结论TXNIP基因与Kiss-1基因在结直肠癌组织中的表达可能存在正相关，TXNIP基因可能与结直肠癌转移抑制基因Kiss-1具有相近的生物学功能，对结直肠癌的转移存在抑制作用。

简介：摘要目的探讨活性氧/硫氧还蛋白相互作用蛋白/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（ROS/TXNIP/NLRP3）通路在三氯乙烯（TCE）致敏小鼠皮肤损伤中的作用机制。方法于2020年8月，将40只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组（5只）、溶剂对照组（5只）、TCE处理组（15只）、TCE+（2-（2, 2, 6, 6-四甲基哌啶-1-氧基4-亚胺）-2-氧乙基）三苯基氯化磷（Mito TEMPO）联合处理组（15只），建立TCE致敏小鼠模型。在末次激发后24 h根据小鼠背部皮肤红斑和水肿情况将TCE处理组和TCE+Mito TEMPO联合处理组小鼠分别分为致敏阳性组和致敏阴性组。末次激发后72 h处死小鼠，取小鼠背部皮肤，观察小鼠皮肤损伤情况，免疫组织化学法检测小鼠背部皮肤组织NLRP3的表达情况，Western Blot检测小鼠背部皮肤NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase 1）、白介素1β（IL-1β）和TXNIP的相对表达情况，并检测背部皮肤组织细胞内ROS水平。结果TCE组和TCE+Mito TEMPO组小鼠致敏率分别为40.0%（6/15）和33.3%（5/15），两组间差异无统计学意义（P>0.05）。TCE致敏阳性组小鼠背部皮肤表皮明显增厚且有大量炎性细胞浸润，表皮细胞内线粒体数量明显减少，线粒体嵴消失并出现空泡变性；TCE+Mito TEMPO组损伤较之减轻，线粒体数量较多，细胞结构相对正常。TCE致敏阳性组和TCE+Mito TEMPO致敏阳性组小鼠皮肤NLRP3、ASC、Caspase 1、IL-1β和TXNIP蛋白相对表达水平以及ROS含量明显高于溶剂对照组和相应致敏阴性组（P<0.05）；TCE+Mito TEMPO致敏阳性组NLRP3、ASC、Caspase 1、IL-1β和TXNIP蛋白相对表达水平以及ROS含量明显低于TCE致敏阳性组（P<0.05）。结论在TCE所致药疹样皮炎中，ROS/TXNIP/NLRP3通路激活促进IL-1β的释放，加重皮肤损伤。

简介：摘要目的探讨淫羊藿次苷Ⅱ(ICA Ⅱ)通过调节miR-20b及其下游靶基因的表达，从而改善糖尿病性内皮细胞功能的研究。方法利用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立高糖联合晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的糖尿病性内皮细胞功能障碍模型，分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)和ICA Ⅱ处理组(DM+ICA Ⅱ组)，检测各组细胞中内皮功能标志蛋白表达和细胞迁移能力的变化，预测miR-20b的潜在靶基因并观察ICA Ⅱ对miR-20b及下游靶基因表达的影响。结果与NC组相比，DM组HUVECs中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、细胞迁移能力和miR-20b表达水平明显下降(P<0.05)，而晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达水平明显升高(P<0.05)，经ICA Ⅱ处理后，DM+ICA Ⅱ组的上述指标较DM组均得到显著改善(均P<0.05)。与DM组相比，DM+miR-20b激动剂类似物(miR-20b agomir)组中TXNIP基因的表达水平受到抑制(P<0.05)；miR-20b拮抗剂类似物(miR-20b antagomir)组的TXNIP的基因表达较NC组显著升高(P<0.05)，而与miR-20b antagomir组相比，miR-20b antagomir+ICA Ⅱ组中miR-20b的表达显著升高而TXNIP的表达显著下降(P<0.05)。结论ICA Ⅱ可通过miR-20b/TXNIP通路来改善糖尿病性内皮细胞的功能。

简介：摘要目的探讨血红素加氧酶-1（HO-1）对巨噬细胞炎症反应的抑制作用及其机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7，取对数生长期细胞用于实验。将RAW264.7细胞分为4组。空白对照组细胞于37 ℃下95%空气、5% CO2常规培养，不给予任何处理；脂多糖（LPS）模型组在培养基中加入1 mg/L的LPS制备LPS攻击模型；HO-1诱导组在培养基中加入30 μmol/L的HO-1诱导剂血红素孵育1 h后，再加入1 mg/L的LPS孵育；HO-1抑制组在培养基中加入5 μmol/L的HO-1特异性拮抗剂锌原卟啉Ⅸ（ZnPPⅨ）孵育0.5 h后，再加入1 mg/L的LPS孵育。各组加入LPS孵育48 h后取细胞上清液，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测HO-1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）及线粒体自噬标志物微管相关蛋白1轻链3B（LC-3B）的蛋白表达；采用免疫荧光染色法检测活性氧（ROS）的表达。结果与空白对照组比较，LPS模型组细胞发生了一定的应激反应，出现线粒体自噬，但部分炎症因子表达受限，与细胞功能受损有关，表现为HO-1、IL-1β、LC-3B、ROS的蛋白表达均明显升高，而TNF-α、TXNIP、NLRP3的蛋白表达均明显降低，说明LPS攻击后细胞受损严重，模型制备成功。与LPS模型组比较，HO-1诱导组HO-1蛋白表达明显增加（HO-1/GAPDH：0.31±0.03比0.22±0.03，P<0.05），TNF-α、IL-1β、TXNIP、NLRP3、LC-3B、ROS蛋白表达均被明显抑制〔TNF-α蛋白（TNF-α/GAPDH）：0.08±0.01比0.45±0.05，IL-1β蛋白（IL-1β/GAPDH）：0.50±0.01比0.82±0.03，TXNIP蛋白（TXNIP/GAPDH）：0.21±0.02比0.28±0.02，NLRP3蛋白（NLRP3/GAPDH）：0.11±0.01比0.17±0.02，LC-3B蛋白（LC-3B/GAPDH）：0.67±0.04比0.92±0.12，ROS（荧光强度）：80.9±12.5比94.1±19.5，均P<0.05〕，说明诱导HO-1表达可抑制炎症反应和氧化应激，减少线粒体自噬；而拮抗HO-1可促进炎症反应、氧化应激及线粒体自噬，表现为TNF-α、IL-1β蛋白表达被抑制程度较HO-1诱导组明显减轻〔TNF-α蛋白（TNF-α/GAPDH）：0.26±0.02比0.08±0.01，IL-1β蛋白（IL-1β/GAPDH）：0.76±0.01比0.50±0.01，均P<0.05〕，且TXNIP、NLRP3、LC-3B、ROS蛋白表达均较LPS模型组明显增加〔TXNIP蛋白（TXNIP/GAPDH）：0.43±0.02比0.28±0.02，NLRP3蛋白（NLRP3/GAPDH）：0.24±0.02比0.17±0.02，LC-3B蛋白（LC-3B/GAPDH）：1.12±0.07比0.92±0.12，ROS（荧光强度）：112.0±17.0比94.1±19.5，均P<0.05〕。结论HO-1可通过抑制TXNIP/NLRP3炎症小体活化减少炎症介质释放，从而降低炎症反应。

简介：摘要目的探讨硫氧还蛋白结合蛋白（thioredoxin-interacting protein，TXNIP）/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLR family pyrin domain containing 3，NLRP3）通路在妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）患者胎盘组织中的表达及其在胎盘滋养层细胞迁移和侵袭中的作用。方法收集25例GDM孕妇（GDM组）和25例糖耐量正常孕妇（正常组）的胎盘组织，将体外培养的人绒毛膜滋养层细胞分为对照组（未转染）、siNC组（转染阴性对照）、siTXNIP组（转染siRNA-TXNIP）、siTXNIP+pcDNA组（共转染siRNA-TXNIP和pcDNA3.1空载体质粒）和siTXNIP+NLRP3组（共转染siRNA-TXNIP和pcDNA3.1-Flag-NLRP3过表达质粒），采用实时荧光定量PCR检测TXNIP和NLRP3 mRNA表达水平，免疫印迹法检测TXNIP和NLRP3蛋白表达水平，噻唑蓝法检测细胞活力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell小室实验检测细胞侵袭。结果与正常组比较，GDM组患者胎盘组织中TXNIP和NLRP3在mRNA和蛋白水平上的表达均明显升高（P<0.05）；与对照组或siNC组比较，siTXNIP组细胞中TXNIP在mRNA和蛋白水平上的表达明显降低，而细胞活力和迁移率均明显升高，且穿膜细胞数明显增多（P<0.05）；而siNC组和对照组比较，上述各指标差异均无统计学意义（P>0.05）；与siTXNIP组或siTXNIP+pcDNA组比较，siTXNIP+NLRP3组细胞中NLRP3在mRNA和蛋白水平上的表达明显升高，而细胞活力和迁移率均明显降低，且穿膜细胞数明显减少（P<0.05）；但siTXNIP+pcDNA组和siTXNIP组之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论TXNIP/NLRP3通路与GDM发生发展密切相关，TXNIP可通过激活NLRP3抑制胎盘滋养层细胞迁移侵袭。

简介：摘要目的探讨X盒结合蛋白1（XBP1）调控硫氧还蛋白互作蛋白-NOD样受体3（TXNIP-NLRP3）通路对小鼠肾小管上皮细胞（TCMK-1）缺氧复氧（H/R）模型的影响及其作用机制。方法根据干预的不同将细胞分为4组：si-NC组：转染小干扰RNA（siRNA）阴性对照（si-NC）；si-XBP1组：转染靶向沉默XBP1的siRNA（si-XBP1）；si-NC+H/R组：转染si-NC后H/R处理；si-XBP1+H/R组：转染si-XBP1后H/R处理。磷脂结合蛋白Ⅴ/碘化丙啶双标染色法检测细胞凋亡，JC-1探针染色法检测线粒体膜电位（MMP），MitoSOX™探针染色法检测线粒体活性氧（mROS），Western印迹和实时定量PCR检测XBP1的蛋白质和mRNA水平以验证干扰效率，Western印迹检测TXNIP、NLRP3和白细胞介素-1β（IL-1β）的蛋白质水平变化，免疫荧光法检测线粒体和TXNIP共定位变化。使用独立样本t检验比较组间差异。结果与si-NC组相比，si-NC+H/R组细胞凋亡率较高，mROS产生较多，MMP较低；与si-NC+H/R组相比，si-XBP1+H/R组细胞凋亡率较低（12.08±0.51比19.01±1.80，P<0.05），mROS产生较少（34.63±0.64比48.17±1.84，P<0.01），MMP较高（1.03±0.11比0.45±0.08，P<0.05）；在H/R时干扰XBP1U（蛋白质：1.31±0.18比0.23±0.02，P<0.01；mRNA：1.12±0.07比0.38±0.01，P<0.001）和XBP1S（蛋白质：1.13±0.17比0.28±0.07，P<0.01；mRNA：8.39±0.63比2.45±0.22，P<0.001）表达后，TXNIP（0.15±0.02比0.04±0.01，P<0.01）、NLRP3（1.13±0.12比0.51±0.12，P<0.05）、IL-1β（1.02±0.04比0.19±0.06，P<0.001）蛋白质的表达更低，同时，线粒体和TXNIP的共定位水平也更低。结论抑制XBP1表达能够减轻TCMK-1的H/R损伤，其机制可能是通过抑制TXNIP介导的NLRP3炎症小体的活化。

简介：摘要目的探究七氟醚后处理对脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）损伤大鼠的脑保护作用及对活性氧（reactive oxygen species, ROS）/硫氧还蛋白结合蛋白（thioredoxin interacting protein, TXNIP）/NOD样受体相关蛋白3（NOD-like receptor associated protein 3, NLRP3）信号通路的影响。方法60只SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组（sham组）、I/R组、七氟醚后处理组（SP组），每组20只。采用大脑中动脉线栓法制备脑I/R模型，SP组造模后即刻吸入2.4%七氟醚30 min。对各组大鼠进行神经功能缺损评分；获取大鼠脑组织，H-E染色和2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride, TTC）染色观察组织病理学变化和脑梗死体积；分析大鼠脑水肿程度及血脑屏障通透性；TUNEL法检测脑组织细胞凋亡率；检测血清炎性因子（IL-1β和IL-18）及脑组织氧化应激指标[ROS、丙二醛（malondialdehyde, MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GPx）]的水平；Western blot法检测TXNIP/NLRP3通路相关蛋白[TXNIP、NLRP3、凋亡相关点样蛋白（apotosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC）、半胱氨酸天冬氨酸酶-1（cysteine aspartase, caspase-1）]的表达。结果与sham组比较，I/R组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积明显升高（P<0.05），脑组织水肿程度及血脑屏障通透性也明显增加，脑细胞凋亡率升高（P<0.05），血清IL-1β和IL-18含量明显升高（P<0.05），脑组织中ROS和MDA含量及TXNIP、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），而GPx和SOD活性降低（P<0.05）；与I/R组比较，SP组神经功能缺损评分和脑梗死体积降低（P<0.05），脑水肿程度及血脑屏障通透性下降，脑细胞的凋亡率降低（P<0.05），血清IL-1β和IL-18含量明显降低（P<0.05），脑组织中ROS和MDA含量及TXNIP、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平明显降低（P<0.05），而GPx和SOD活性升高（P<0.05）。结论七氟醚后处理能够有效减轻大鼠脑I/R损伤，可能与其对ROS/TXNIP/NLRP3信号通路的抑制有关。