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简介：AIM:Toinvestigatetheanti-tumoreffectsofnuclearfactor-κB(NF-κB)inhibitorSN50andrelatedmechanismsofSGC7901humangastriccarcinomacells.METHODS:MTTassaywasusedtodeterminethecytotoxiceffectsofSN50ingastriccancercelllineSGC7901.Hoechst33258stainingwasusedtodetectapoptosismorphologicalchangesafterSN50treatment.Activationofautophagywasmonitoredwithmonodansylcadaverine(MDC)stainingafterSN50treatment.Immunofluorescencestainingwasusedtodetecttheexpressionoflightchain3(LC3).MitochondrialmembranepotentialwasmeasuredusingthefluorescentprobeJC-1.Westernblottinganalysiswereusedtodeterminetheexpressionofproteinsinvolvedinapoptosisandautophagyincludingp53,p53upregulatedmodulatorofapoptosis(PUMA),damage-regulatedautophagymodulator(DRAM),LC3andBeclin1.Wedetectedtheeffectsofp53-mediatedautophagyactivationontheapoptosisofSGC7901cellswiththep53inhibitorpifithrin-α.RESULTS:TheviabilityofSGC7901cellswasinhibitedafterSN50treatment.Inductionsintheexpressionofapoptoticproteinp53andPUMAaswellasautophagicproteinDRAM,LC3andBeclin1weredetectedwithWesternblottinganalysis.SN50-treatedcellsexhibitedpunctuatemicrotubule-associatedprotein1LC3inimmunoreactivityandMDC-labeledvesiclesincreasedaftertreatmentofSN50byMDCstaining.CollapseofmitochondrialmembranepotentialΔψweredetectedfor6to24hafterSN50treatment.SN50-inducedincreasesinPUMA,DRAM,LC3andBeclin1andcelldeathwereblockedbythep53specificinhibitorpifithrin-α.CONCLUSION:Theanti-tumoractivityofNF-κBinhibitorsisassociatedwithp53-mediatedactivationofautophagy.

简介：Objective:Todeterminewhetherpyrrolidinedithio-carbamate(PDTC)enhancesTNFα-inducedapoptosisinculturedbreastcancercellsandexploretheroleofNF-κBinTNFα-inducedapoptosis.Methods:HumanbreastcancercelllinesMCF-7andMDA-MB-435sweretreatedwithTNFα,PDTCandcombinationtherapy.CellsurvivalsweredeterminedbyMTTassay.ApoptosiswasdetectedbyTUNELandflowcytometry.NF-κBDNAbindingactivitywasdetectedusingelectrophoresismobilityshiftassay(EMSA).WesternblotswereperformedtodemonstrateIκBα(InhibitorproteinofnuclearfactorκB)phosphorylationanddegradation.Results:CellgrowthwasnotsuppressedbyeitherTNFα(2000U/mlorless)orPDTCalone.BothcelllinestreatedwithTNFα(2000U/ml)combinedwithPDTC(50μmol/L)showedsignificantgrowthinhibition.PDTCinhibitedTNFα-inducedIκBαphosphorylationanddegradationinbothcelllines.EMSAshowedthatPDTCcontinuouslyinhibitedTNFαinducedNF-κBDNAbindingactivity.TNFαinducedapoptosis(TUNEL)wasincreasedsignificantlywhenbothcellswerepretreatedwithPDTC,andthiswasconfirmedbyFlowcytometry.Conclusion:PDTCenhancesTNFα-inducedapoptosisviainhibitingIκBαphosphorylationanddegradationinhumanbreastcancercells.NF-κBprotectsagainstTNFα-inducedapoptosis.

简介：摘要脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）可以激活许多与炎症发生的相关的细胞（如单核细胞和巨噬细胞等），引起相关细胞的细胞因子的合成以及释放，最终导致生物体全身炎症的发生。LPS可以与巨噬细胞表面上的Toll-4受体（TLR4）受体相结合，引起自噬反应的发生，从而利于巨噬细胞对生物体内病原体的吞噬。近些年来，大量的研究表明LPS-TLR4/NF-kB信号通路与生物的炎症密切相关，本文主要综述了LPS，TLR4，NF-kB以及它们之间形成的通路与抗炎免疫的关系，从而为临床上LPS引起的炎症的治疗提供新的途径。

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简介：摘要目的探讨百草枯对健康者外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcellPBMC)骨桥蛋白（osteopontinOPN），核转录因子-KB（Nuclearfactor-kB,NF-KB)的影响。方法健康体检者6例，取外周静脉血分离获得PBMC，以5×105个细胞/孔种入96孔细胞培养板，分3组培养12小时。A1组正常PBMC;A2组正常PBMC＋50ng/ml百草枯；A3组正常PBMC＋100ng/ml百草枯。观察培养前后细胞形态变化，收集各组细胞培养上清检测骨桥蛋白水平，收获细胞后检测胞内NF-KB。结果各组细胞培养前后细胞形态、数量无明显变化；从A1组到A3组，细胞培养上清骨桥蛋白水平及胞内NF-KB含量呈逐组增高。结论百草枯影响细胞内NF-KB，导致骨桥蛋白的大量分泌，可能是其引起肺组织损伤的原因。

简介：摘要目的探讨NF-кB在2型糖尿病大鼠肾组织中表达的变化。方法通过收集正常大鼠及糖尿病鼠的24小时尿标本，测定尿微量白蛋白；并摘取肾脏，行免疫组化观察NF-кB蛋白水平的变化。结果各组大鼠在肾小管可见NF-кB表达呈棕色颗粒样物，糖尿病小鼠中肾组织NF-кB表达明显升高（P＜0.01）；尿微量白蛋白与NF-кB的表达密切相关，r=0.84（P＜0.01）。结论2型糖尿病组大鼠肾脏组织NF-кB表达比正常组表达增强。

简介：目的：研究糖尿病大鼠肾组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达，以及用吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）抑制核转录因子-kB（NF—KB）对其表达的影响。方法：用Wistar大鼠建立STZ诱导的糖尿病模型，设立正常对照组（NC组）、糖尿病纽（DM组）、糖尿病PDTC干预组（DP组），8周末用免疫组化方法测定肾组织中ICAM—1含量；体外培养大鼠肾小管成纤维细胞（NRK），葡萄糖孵育下分6组：正常对照组、高糖1组、高糖2组合葡萄糖分别为5．6、15和30mmol／L，干预1～3组在葡萄糖30mmo／L基础上分别加入PDTC5、10、20μmol／L。24h、48h后采用RT—PCR及免疫细胞化学（ICC）法检测各组的ICAM-1表达情况。结果：8周末，DIM纽肾组织ICAM～1表达较NC组明显增高，DP组较DM组明显下降，但仍高于NC组。各组NRK细胞中，与正常组相比，高糖各组ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高（P〈0．05），且呈刺量时间依赖性；而不同浓度PDTC干预后，ICAM-1mRNA和蛋白表达水平显著下降（P〈0．05），而且与PDTC呈剂量时间依赖性。结论：无论在体内或体外实验中，抑制NF—kB可降低ICAM-1的表达。

简介：摘要目的观察槲皮素对大鼠缺血再灌注NF-kB表达的影响及意义。方法将大鼠随机分成四组肝损伤组（A组）、槲皮素干预组（B组）、假手术组（C组）、空白对照组（D组）。检测肝组织SOD（超氧化物歧化酶）活性、MDA（丙二醛)含量及TNF-α（肿瘤坏死因子-α)及IL-1（白细胞介素-1）含量；应用RT-PCR法检测肝组织中NF-kBmRNA表达量及应用Westernblot法检测肝组织中NF-kB含量。结果与A组比较，B组肝组织MDA含量降低及SOD活性升高(P<0.05)及肝组织TN-α和lL-1活性明显下降(P<0.05)；而且B组肝组织NF-kBmRNA表达量增强和NF-kB含量增加。结论槲皮素通过清除氧自由基来抑制NF-kB的表达，减少TN-α和lL-1生成，进而发挥保肝作用。

简介：摘要目的研究益肾蠲痹丸对CIA模型大鼠关节滑膜细胞NF-KB表达的影响。方法取Wistar大鼠40只，均分为4组，除空白组外，其余各组制作CIA大鼠模型。致炎后除模型组外，分别采用益肾蠲痹丸和雷公藤多苷灌胃治疗4周，后处死大鼠，采用Westernblot法检测滑膜细胞中NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα的表达。结果与空白组相比，模型组的蛋白表达明显增强；与模型组比较，益肾蠲痹丸和雷公藤多苷组表达明显下降。

简介：摘要目的探讨核因子kB(NF-kB)和抑癌基因P53在子宫内膜癌中的表达及其相关性。方法根据FIGO(2000年)病理分期分为4组，分别为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期组和健康对照组，采用酶联免疫法(ELISA)检测检测血清NF-kB和P53的表达。结果与对照组、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期相比较，Ⅳ期组的NF-kB和P53的水平明显上升（P<0.05）；NF-kB和P53与子宫内膜癌严重程度呈正相关（rNF-kB=0.69、rP53=0.73，P<0.05）。结论NF-kB和P53可能是促进子宫内膜癌发生发展的机制之一。

简介：摘要背景与目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人胃癌BGC823细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用，探讨EGCG通过NF-kB(p65)途径活化Caspase-3诱导移植瘤细胞凋亡作用的分子机制。方法建立人胃腺癌(BGC823)细胞裸鼠异种移植瘤模型，用不同剂量的EGCG进行治疗，并设对照；采用Westernblot法肿瘤组织的凋亡相关基因NF-kB(p65)、Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达情况。结果裸鼠异种移植瘤治疗实验结果显示，EGCG对移植瘤生长有明显抑制作用；Westernblot分析表明EGCG能下调NF-kB(p65)蛋白的表达，促使Bax/Bcl-2蛋白表达的比值增高，并且可以促进Caspase-3的活化。结论EGCG对人胃癌细胞裸鼠移植瘤有明显的抑制作用并能诱导移植瘤细胞凋亡。其机制可能与通过NF-kB(p65)的下调，促使Bax/Bcl-2比值增高，进而导致Caspase-3的活化而诱导细胞发生凋亡相关。

简介：目的研究紫草素抑制由脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症的机制。方法以淀粉培养基注射BALB/c小鼠腹腔，诱导并分离巨噬细胞，以APC标记F4/80染色，并用流式细胞仪检测分离巨噬细胞情况;用1mg?1T1的LPS刺激上述分离的巨噬细胞，分组如下:DMSO溶剂对照组，LPS对照组，LPS+低剂量紫草素组(0.1|junal*1T1);LPS+中剂量紫草素组（1|junol?高剂量紫草素组（10ijund?IT1);通过ELISA和实时定量PCR(qRT-PCR)方法分别测定各处理组培养上清液以及细胞中肿瘤坏死因子-ct(TNF-c〇、白细胞介素-lp(IL-lp)、白细胞介素^6(11^)和白细胞介素-IO(IL-IO)的表达情况;Westemblot分别测定Toll样受体4(TLR4)和核因子-kB(NF-kB)的P65亚基磷酸化表达情况。结果流式细胞检测可知，APC标记的F4/80染色巨噬细胞的纯度可达97.8%;ELISA和实时定量PCR结果显示，紫草素处理后可以抑制由LPS刺激细胞因子TNF-ct、IL-lp和IL-6的表达（P<0.05)，并增加IL-10的表达（P<0.05)，且呈现出一定的浓度依赖性；Westernblot结果显示，紫草素能下调由LPS刺激的TLR4的表达水平和NF-kB的P65亚基磷酸化表达。结论紫草素的抗炎机制可能是通过TLR4介导的信号通路活化NF-kB,抑制IL-lp、IL-6和TNF-ct的分泌，并促进IL-10的分泌。

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简介：AIMProstaglandinA1(PGA1)isacyclopentenoneprostaglandin.Recently,wereportedthatPGA1caninhibitexcitotoxin-inducedapoptosisofstriatalneuronsinvivoandrotenone-inducedapoptosisofculturedSH-SY5Ycells,suggestingthatPGA1mayhaveneuroprotectiveefficacy,possiblymediatedbyinhibitionofNF-kBactivation.ThepresentstudyevaluatedtheneuroprotectivepotentialofPGA1anditseffectonIKK/I(B/NF-kB/c-mycsignalingpathwayinratmodelsofpermanentfocalcerebralischemia.METHODSPermanentmiddlecerebralarteryocclusion(pMCAO)modelwasconstructedbyintraluminalsuturecannulationthroughtheinternalcarotidarteryinWistarrats.

简介：摘要目的探索急性心肌梗死通过氧化应激及NF-kb途径加重造影剂肾损害的机制。方法选取40只SD大鼠随机分为对照组，造影剂组，急性心肌梗死组和心肌梗死+造影剂组。造影剂注射2min，8min，15min，4h，24h连续观察肾动脉血流速度。造影剂组和心肌梗死+造影剂组大鼠注射前和后4h和12h行CT检查，扫描肾脏，并计算肾皮质的造影剂对比度。造影剂注射后每组分别于4小时和24小时处死并取下腔静脉血检测肌酐(Scr)，检测内皮素(ET-1)，血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)。取右侧肾脏组织检测组织活性氧(ROS)，并切取部分右侧肾脏组织提取RNA，通过Real-timePCR方法检测凋亡和氧化应激相关基因NF-kb及Caspase-3的表达水平。结果通过高频超声右肾动脉血流检测结果发现AMI+CM组在注射造影剂前0min,8min,15min,4h,24h的血流速度一直低于CM组在相同时间的血流速度，并且有显著差异，AMI+CM组和CM组的肾动脉血流速度随时间变化趋势基本相同。AMI和AMI+CM组在4小时和12小时行CT对两侧肾脏扫描，结果显示心肌梗死状态下造影剂在肾皮质滞留时间延长，AMI+CM组在4h时肾皮质CT对比度值显著高于CM组的肾皮质的CT对比度。AMI+CM组在24h的血肌酐值显著高于CM组在24h的血肌酐值，血浆内皮素ET-1及血管紧张素ⅡAngⅡ在24h升高最为明显，高于其他组。活性氧ROS也显著高于CM组。调节凋亡的基因和炎症及氧化应激相关Caspase-3和NF-kb在心肌梗死大鼠注射造影剂后都较其他组明显上调。结论心肌梗死状态下由于心排量突然下降，肾脏血流速度的下降，及内皮素，血管紧张素等缩血管物质的增多，一方面造成了肾脏特别是肾皮质缺血，从而造影剂在肾脏中滞留时间更长，另一方面因引起肾小管产生更多的活性氧造成了氧化应激从而损害肾实质，并且进一步激动凋亡基因和氧化应激相关NF-kb和Caspase-3上调从而导致了最终导致肾小管上皮细胞的氧化应激损害并进一步加重凋亡。

简介：摘要目的：探索黄皮新肉桂酰胺 B对 TNF-a的影响及对 TNF-a蛋白调控是否通过 TLR4/MyD88/NF-ΚB信号通路中对细胞炎症反应的调控。方法： ELISA法检测 TNF-a含量； MTT试验检测黄皮新肉桂酰胺 B和 LPS对 RAW264.7细胞抑制率的影响；对细胞随机分组， WesternBlot法检测分组后 TLR4、 NF-ΚB蛋白表达。结果：黄皮新肉桂酰胺 B、 LPS对细胞生长无明显抑制；黄皮新肉桂酰胺 B使 TNF-a水平降低；与 LPS组比较， LPS+MyD88抑制剂组、 LPS+黄皮新肉桂酰胺 B组、 LPS+黄皮新肉桂酰胺 B+MyD88抑制剂组明显抑制 TNF-a分泌，差异有统计学意义（ P<0.05)，分别使 TLR4和 NF-ΚB蛋白降低至 74%、 21%， 70%、 27%,44%、 8.5%。