简介：目的利用错配杂交和化学发光技术,建立一种检测MGMT基因启动子区过甲基化的定量分析方法.方法基因组DNA经过亚硫酸氢钠修饰,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化.设计特异的PCR引物（不合CpG位点）,同时扩增含有CpG位点甲基化或非甲基化目的MGMT基因启动子区,用两条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物杂交,化学发光检测,通过两条探针的杂交信号强度之比确定样品DNA中MGMT甲基化的程度.结果检测混合样品中MGMT基因的甲基化水平与结果完全相符,并可用于肿瘤组织样品的MGMT甲基化定量检测.结论与现有方法相比,本法是一种检测快速、操作简便的MGMT基因甲基化的定量检测方法.

简介：摘要目的研究不明原因自然流产患者绒毛组织中H19启动子区域甲基化水平与正常早孕绒毛的差异，并分析其可能的发生机制。方法收集不明原因自然流产及正常早孕的绒毛组织各30例，对组织中H19基因启动区域甲基化水平进行检测及对照分析，并对两组绒毛组织中的三种甲基转移酶的表达水平进行对照分析。结果H19上游DMR中甲基化水平检测结果提示两组间绒毛组织中H19启动子区域甲基化水平存在差异，自然流产组中甲基化水平明显低于对照组，差异有显著性（P<0.01），自然流产组绒毛组织DNMT1mRNA及蛋白的表达量与正常早孕组无明显统计学差异（P>0.05），而自然流产组绒毛组织DNMT3a及DNMT3b的mRNA及蛋白的表达量明显低于正常早孕组，差异有显著性（P<0.01）。结论自然流产患者绒毛组织中H19DNA甲基化水平的明显下降，下调DNA甲基转移酶中DNMT3a与DNMT3b的表达可能是甲基化水平差异的重要机制之一。

简介：本研究通过对急性白血病病人及体外肿瘤细胞株的DNA甲基化及基因表达的实验,探讨死亡相关蛋白激酶（death-associatedproteinkinase,DAPK）基因在急性白血病中的表达情况及其启动子区域甲基化的状态,并分析两者之间的相关程度.应用RT-PCR检测DAPK基因在白血病细胞及正常骨髓细胞中的表达;用巢式甲基化特异性PCR（n-MSP）法检测急性白血病患者及细胞株DAPK基因启动子甲基化状况;从第二轮巢式MSP扩增出的随机产物中挑选2个随机引物,交予专业机构克隆后进行序列分析.结果表明：DAPK基因在10例正常对照者骨髓标本中均有表达,DAPKmRNA在急性白血病病人骨髓标本中表达平均值为0.61±0.40,低于正常对照者,差异有显著性（P＜0.05）,其中52.94％（9/17例）的急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本DAPKmRNA表达降低或缺失,急性髓系白血病病人数据为41.18％（42/102）;细胞株U-937显示基因表达正常,HL-60表达缺失;102例急性髓系白血病病人骨髓标本中33例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为32.4％（33/102）;17例急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本中8例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为47％（8/17）;7例正常人骨髓标本DAPK启动子区均为非甲基化;细胞株U-937DAPK启动子区非甲基化,HL-60DAPK启动子区甲基化.ALL组与AML组患者骨髓细胞DAPKmRNA表达与其启动子甲基化均呈显著负相关（ALL组r=-0.855,P＜0.05;AML组r=-0.343,P＜0.05）,提示两者有密切的关联.结论：急性白血病患者中DAPK基因启动区甲基化与其mRNA的异常表达或失表达有关.

简介：摘要目的探讨Ｆａｓ蛋白、ＦａｓｍＲＮＡ的表达及Ｆａｓ基因的甲基化状态在非小细胞肺癌发生发展中的相互关系及临床意义。方法经手术治疗的非小细胞肺癌患者４２例（鳞癌１６例，腺癌２６例），收集肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织。采用免疫组化Ｓ－Ｐ染色方法、逆转录聚合酶链式反应、重亚硫酸盐修饰及甲基化特异性聚合酶链式反应分别检测非小细胞肺癌患者癌组织、癌旁组织及正常肺组织中Ｆａｓ蛋白、ＦａｓｍＲＮＡ的表达情况及Ｆａｓ基因甲基化状态，并分析其在非小细胞肺癌形成过程中的相互关系。结果非小细胞肺癌组织的Ｆａｓ蛋白阳性表达率为３５．７１％，ＦａｓｍＲＮＡ阳性表达率为４５．２４％，明显低于其在癌旁组织及正常肺组织中的表达率（Ｆａｓ蛋白阳性表达率分别为６９．０４％和８５．７１％，ＦａｓｍＲＮＡ阳性表达率分别为７６．１９％和９０．４８％）。非小细胞肺癌组织Ｆａｓ基因甲基化率６４．２９％明显高于其在癌旁组织及正常肺组织中的甲基化率（分别为３０．９５％和２１．４３％）。非小细胞肺癌Ｆａｓ蛋白、ＦａｓｍＲＮＡ分别与Ｆａｓ基因甲基化呈显著负相关（Ｆａｓ蛋白ｒ＝#０．４７１，Ｐ＜０．０１；ＦａｓｍＲＮＡｒ＝#０．４６９，Ｐ＜０．０１）。结论与癌旁组织及正常肺组织相比，非小细胞肺癌组织中存在显著的Ｆａｓ基因高甲基化，ＦａｓｍＲＮＡ及Ｆａｓ蛋白表达下调。非小细胞肺癌Ｆａｓ表达与Ｆａｓ基因甲基化显著负相关。结果提示，Ｆａｓ基因高甲基化可能导致Ｆａｓ基因失活，从而影响肿瘤细胞的凋亡，导致肿瘤细胞异常增殖及免疫逃逸。

简介：为了明确苹果三倍体杂种后代中基因组DNA甲基化水平及模式的变化特征，本文以‘金冠’ב四倍体嘎拉’苹果的6l份三倍体后代为试验材料，采用MSAP分子标记技术对其进行了分析。结果表明：（1）61份三倍体杂种后代的总甲基化率在10．74％～28．86％之间，全甲基化率在7．87％～24．22％之间，半甲基化率在2．10％～11．84％之间。与母本相比，总甲基化和全甲基化呈上升趋势，半甲基化呈下降趋势；与父本相比，均呈下降趋势。（2）在苹果三倍体杂种的基因组加倍和重组过程中，发生了大量过或超甲基化和去甲基化变异，少量发生了次甲基化现象，极少部分的甲基化状态介于双亲之间。（3）共获得4条DNA甲基化差异片段，有3条能够在苹果基因组中检测到，且同源性较高，分别位于第1条和第12条染色体的叠连群上，但是具体功能没有描述。研究结果表明，苹果三倍体杂种后代的DNA甲基化水平与倍性相关性不大，在其形成过程中发生了大量的过或超甲基化变异，为苹果三倍体育种中表观遗传变异的研究提供了依据。

简介：目的系统评价去甲基化药物治疗中高危骨髓增生异常综合征（MDS）的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、TheCochraneLibrary（2013年第3期）、webofScience、CNKI、VIP、WanFangData和CBM数据库，查找去甲基化药物治疗MDS的随机对照试验（RCT），检索时限均为从建库至2013年3月。南2位研究者按照纳入与排除标准筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后，采用RevMan5．1软件进行Meta分析。结果共纳人4个研究，816例患者。Meta分析结果显示：与最佳支持治疗方案相比，去甲基药物治疗方案对于中高危MDS患者在完全缓解率[OR=19．14，95％CI（5．33，68．7），P〈0．00001]、部分缓解率[OR=20．63，95％CI（5．76，73．93），P〈0．00001]、血液学缓解率[OR=3．58，95％CI（2．40，5．34），P〈0．00001]、Ⅲ／Ⅳ级粒细胞减少症发生率[OR=3．82，95％CI（2．67，5．47），P〈0．00001]、Ⅲ／Ⅳ级血小板减少症发生率[OR=3．98，95％CI（2．55，6．23），P〈0．00001]及病死率[OR=0．52，95％CI（0．35，0．77），P〈0．00001]方面更优，其差异均有统计学意义。部分患者会出现Ⅲ／Ⅳ级血细胞减少症及可耐受的非血液学不良反应。结论现有证据表明，去甲基化药物治疗MDS疗效明显，可延长疾病转化为白血病时间，降低病死率和提高患者生存质量。

简介：摘要在英语教学过程中，由于中英文表达方式的不同，学生往往会在句子结构复杂时出现错误。对此，运用“还原法”解决英语学习中的实际问题，可以使句子结构就一目了然。

简介：目的探讨组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM5A在人牙髓细胞（hDPC）中的表达模式及成牙本质分化诱导对其表达量的影响。方法体外培养hDPC,实时荧光定量聚合酶链反应和Westernblot检测第1代至第8代（P1-P8代）hDPC中KDM5AmRNA和蛋白的表达量;免疫荧光检测KDM5A在hDPC中的分布;对P3代细胞进行成牙本质分化诱导,于第7天和第14天分别检测KDM5AmRNA和蛋白的表达水平。结果体外传代培养hDPC中可检测到KDM5A的表达,KDM5AmRNA和蛋白量均呈先增加后减少的趋势;hDPC细胞质及细胞核中均表达KDM5A;成牙本质向分化诱导7和14d,KDM5AmRNA和蛋白量高于未诱导组细胞,诱导14d表达量高于诱导7d（P〈0.05）。结论hDPC表达KDM5A,矿化诱导可提高KDM5A的表达。

简介：目的：探讨组蛋白去甲基化酶JMJD3对骨髓基质干细胞（bonemarrowstromalcells，BMSCs）体外多潜能性及成骨分化的生物学调控作用。方法：用离心和贴壁培养相结合方法分离培养大鼠四肢骨BMSCs，分别用含JMJD3-shRNA的绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒干扰载体（实验组）及含无关序列的GFP慢病毒载体（对照组）转染BMSCs，Westernblot方法检测两组BMSCs中组蛋白H3第27位赖氨酸上三甲基化（H3K27me3）及干细胞多潜能转录因子Oct4、Nanog、Sox2的表达，并比较两组细胞的克隆形成率；实时定量RT-PCR、Westernblot、茜素红染色检测两组细胞的体外成骨分化能力。结果：与对照组相比，实验组BMSCs的H3K27me3表达水平升高，具有更强的克隆形成能力，且表达更强的Oct4、Nanog、Sox2等多潜能因子；体外成骨诱导7d后，实验组BMSCs中RUNX2等成骨分化基因表达下降，诱导14d后，钙结节形成较对照组少。结论：抑制JMJD3表达可增强BMSCs的干性特征，抑制其成骨分化。

简介：在所有的设计过程与逻辑里，一定是先满足生活机能，再考量风格呈现，让使用者回到家后能完全的放松。不管是建筑或者室内，设计师都强调“人”绝对是最重要的元素，从使用者出发，分析人的思想及行为，进而赋予建筑或者空间的性格，通过延伸设计，与环境结合在一起，打造符合个人需求的完美定制空间。

简介：东北的小小说创作,在全国范围内具有代表性。譬如曾写出《立正》的老作家许行,就是小小说的一面旗帜。还有白小易的《客厅里的爆炸》曾产生很大影响。九十年代以后,东北出现了于德北、袁炳发等中坚力量,《杭州路10号》《三笑》等被各种精华本选了又选,《一把炒米》《身后的人》等也多年为读者津津乐道。陈力娇的《不朽的情人》等也都是不可多得的佳作,田洪波的《小上海1972》,安石榴的《大鱼》都非常经典，奠定了在新一代小小说作家中的领先地位。

简介：目的：探讨甲基化酶抑制剂5′-氮杂-2′-脱氧胞苷（5′-Aza-2′-deoxycytidine，5′-Aza-CdR）对结直肠癌细胞株HT-29和Lo-Vo中p16基因甲基化状态、mRNA及蛋白表达的影响。方法应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR法、SYBRGreenPCR法及蛋白印迹实验（Westernblot）检测不同浓度5′-Aza-CdR处理前后HT-29和LoVo细胞中p16基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达。结果TaqMan探针为基础的实时定量PCR法检测HT-29和LoVo细胞中p16蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转；实时荧光定量PCR和WesternBlot检测到0．5、1．0、1．5μM5′-Aza-CdR处理后p16基因mRNA和蛋白均重新表达，具有统计学意义（P均＜0．05）。结论结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中p16启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5′-Aza-CdR能够较成功的逆转结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中p16基因的甲基化状态，并能恢复mRNA及蛋白重新表达。

简介：在当前各地的高考政治试卷中，选择题都占有举足轻重的地位，如何正确、高效地解答选择题，是广大师生非常关心的话题。笔者在研读高考政治试题时发现，运用还原法，将选项按要求进行还原，然后与教材原理、试题情境、生活实际、试题立意或设问进行对照，能够帮助考生准确识别干扰项，进而找到问题的答案。下面以2013年高考试题为例，对该方法及其具体运用作简要介绍。

简介：摘要氧化还原反应对于高中学生，特别是高一学生来说是较难理解的一章内容。用生活中的简单事例加以类比，深入浅出的理解“氧化还原反应”，可以不断增加学生学习化学的兴趣，提高教师化学教学的有效性。

简介：每天早上到停车场取车，总能看见有那么几辆车在原地热车。有时好奇，刻薏掐表观察了一下，夸张的甚至有热车5分钟之后才起步离开的。每每看到这些，我总忍不住想多事儿，上去跟人说几句，但又感觉如此普遍的误区，仅靠口语相传只怕是毫无意义。于是乎，就有了今天的话题。过去原地热车是不得已而为之从驾校，到用户手册，没有—个地方告诉车主要原地热车，为何众车主却要乐此不疲呢？原因很简单：老师傅都这么说。

简介：因媒体报道“三一重工迂都”一事而被涉及其中，中联重科的权益受到了损害，中联重科的全体独董“被逼”发起、主导了独立调查，以弄清楚事实真相，并公告了调查结果，是为A股首例独董独立调查。

简介：信托财产权能分割的设计不仅为信托制度的发展带来了巨大的弹性空间,也给信托课税法律制度的构建带来了巨大的难题.英美法系信托财产的“双重所有权”与大陆法系的财产权制度本就有所冲突,我国信托法对财产归属的悬空处置更为信托课税制造了重重阻碍.诠释信托财产的独立性,还原信托课税的真实属性,是构建信托课税法律制度的基础和前提.

简介：人教版义务教育教科书《化学》九年级上册第六单元课题1中木炭还原氧化铜演示实验，学生是从这个实验中初次接触还原反应的，该实验在整个化学学习中是一个很重要的实验，也是初中阶段一个疑难问题实验。如果老师只是一味地照本宣科，即按照教材所提供的实验器材、设计方案及操作步骤进行实验，一般得不到教材所描述的实验现象或实验现象不明显，达不到验证碳的还原性和有效教学的目的。

简介：

简介：进餐数数法进餐时细嚼慢咽能帮助消化、减轻胃肠道的负担，还有利于营养的吸收。可以边嚼边数，直嚼得满口香甜。胃肠道功能欠佳的人，尤其应当采用此法。