简介：目的通过改良差速贴壁法分离纯化绵羊MDSC,探索转化生长因子（TGF-β1）诱导绵羊肌源性干细胞分化为平滑肌的可能性。方法取成年绵羊股四头肌细胞采用改良差速贴壁法（modifiedpreplatetechnique）进行优化、分离、纯化获得绵羊级源性干细胞（MDSC）。利用流式细胞仪鉴定CD44、CD34、CD31、CD45、CD14的表达;westernbloting法检测干细胞标志物desmin表达情况鉴定MDSC。然后利用10ng/mlTGF-β1诱导MDSC向平滑肌方向分化;随后利用Westernbloting法检测诱导培养基处理的MDSC中平滑肌蛋白标志物a-SMA和calponin的表达;结果通过对改良差速贴壁法成功分离出成年绵羊的肌源性干细胞（MDSC）。流式细胞仪鉴定其干细胞标志物CD44、CD34阳性表达,同时CD31、CD45、CD14表达阴性。Westernblotting检测MDSC中Desmin呈阳性表达。利用10ng/mlTGF-β1成功诱导MDSC向平滑肌方向分化。诱导过程中,平滑肌特异蛋白a-SMA和calponin在诱导细胞中的表达逐步上升。结论本研究通过对差速贴壁法成功分离出成年雌性绵羊的肌源性干细胞（MDSC）。并首次利用TGF-β1诱导羊肌源性干细胞（MDSC）成功向平滑肌方向分化。

简介：肌源性干细胞（muscle-derivedstemcell,MDSC）是在肌肉中发现的多功能干细胞。因其来源丰富,取材便捷和体外移植存活率高等特点,因而在血液病的治疗中MDSC展示出良好的应用前景。研究人员对MDSC进行体外培养时,在取材鼠的选择、MDSC分离和纯化等实验方法方面存在较大差异。此外,促进MDSC体外增殖并向造血细胞分化的培养条件以及相关作用机制还不清晰。本文主要就体外培养MDSC向造血方向转化的实验研究现状作一综述,讨论的具体问题包括MDSC的体外培养,MDSC的鉴定,MDSC的增殖和MDSC向造血方向的分化等。

简介：摘要目的探讨腺病毒载体介导神经生长因子(NGF)体外转染大鼠肌源干细胞(MDSCs)应用于基因治疗的可行性。方法培养并纯化MDSCs细胞株，采用具有高效转染能力的腺病毒载系统将NGF基因导入MDSCs中，采用绿色荧光蛋白(EGFP)荧光技术检测转染率、实时荧光定量PCR (qPCR)检测目的基因NGF的表达情况。结果腺病毒感染MDSCs的感染复数为1000时最佳，感染率可达80%。EGFP自72 h时荧光表达开始逐渐增强。转染的MDSCs中NGF基因高表达。结论通过携带NGF的腺病毒载体可以成功转染MDSCs,从而上调目的基因在肌源干细胞中的表达；且通过腺病毒介导转染的目的基因NGF不会导致肌源干细胞的过度增殖和凋亡。

简介：摘要肝脏是人体最重要的器官之一，肝脏疾病也是威胁人类健康和寿命的主要原因之一。由于各种原因，肝失代偿的治疗相当困难，体外肝支持装置无法解决这一问题，原位肝移植供体严重短缺。用多能干细胞诱导肝细胞和肝类器官不仅可以研究肝细胞的命运决定、肝发育、肝再生机制和肝脏疾病的病理生理学，而且也可用于筛选药物，并为未来的移植治疗提供稳定的功能性肝细胞来源。与肝脏发育类似，多能干细胞衍生的肝细胞和类器官的培养是一个自组织过程：从几个关键因素的变化开始，最终形成具有复杂功能的细胞/器官。现介绍目前多能干细胞来源的肝细胞和类器官培养的主要方法和进展，以期为今后的研究提供线索。

简介：摘要目的探讨碱性成纤维细胞生长因子对大鼠阴茎肌源性干细胞体外增殖的影响。方法本试验自2020年12月至2021年6月在滕州市中心人民医院精准实验室完成。取健康雄性Wister大鼠5只，体质量（200±50）g，取其阴茎海绵体并采用酶消化法分离肌源性干细胞，应用密度梯度离心法和差速贴壁法进行纯化。取第2代肌源性干细胞分为两组进行培养，实验组：200 µl生长培养基+肌源性干细胞，分别用终浓度为10 µg/L、30 µg/L、50 µg/L、70 µg/L、90 µg/L外源性碱性成纤维细胞生长因子进行干预；对照组：加入200 µl生长培养基+肌源性干细胞。分别于培养24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h加入四甲基偶氮唑蓝（MTT）溶液。应用免疫细胞化学法鉴定大鼠阴茎肌源性干细胞，MTT比色法检测细胞增殖情况。统计学方法采用独立样本t检验、Tukey检验。结果（1）肌源性干细胞多呈Sca-1阳性反应［表达量为（79.90±1.82）%］，少数呈Desmin阳性反应［表达量为（68.60±0.72）%］。（2）两组肌源性干细胞均随培养时间的延长而明显增殖（均P<0.01），出现显著促增殖效应的培养时间均为96 h。（3）与对照组比较，实验组各浓度碱性成纤维细胞生长因子对肌源性干细胞均有明显的促增殖效应；当浓度从10～70 µg/L递增时，促增殖作用也随之均显著增强（均P<0.01），至70 µg/L时其促增殖作用接近顶峰。结论外源性碱性成纤维细胞生长因子可促进体外培养的大鼠阴茎肌源性干细胞增殖，且呈浓度-时间依赖性增加，96 h与70 µg/L为最佳的体外培养时间和浓度。

简介：摘要尿源干细胞(urine-derived stem cell，USC)是指从尿液中获取的一类间充质干细胞，因其提取简便快捷、获取途径无创、不存在伦理问题，在临床研究中相对于其他干细胞具有较多优势，从而备受学术界的关注。该文从尿源干细胞分离培养、细胞表征、来源、应用和外泌体方面对近年的研究进展做一综述。

简介：目的研究体外培养的成人骨髓源性神经干细胞的致瘤性.方法对骨髓源性神经干细胞分别进行细胞形态学观察、刀豆球蛋白A凝集试验和双层软琼脂培养以探明其是否具有恶性转化细胞的形态特征、表面结构及生长特性的变化;利用免疫细胞化学的方法检测骨髓源性神经干细胞的端粒酶和肿瘤相关基因的表达;将骨髓源性神经干细胞接种到裸鼠体内观察其成瘤性.结果骨髓源性神经干细胞不具有恶性转化细胞的形态特征,在不同刀豆球蛋白A浓度下均未见明显的凝集反应,在双层软琼脂不能形成细胞克隆;骨髓源性神经干细胞的c-myc、c-fos和p53基因均呈阴性表达,而端粒酶逆转录酶呈弱阳性表达;将骨髓源性神经干细胞接种于裸鼠皮下6个月未见肿瘤形成,亦未见其它组织形成.结论骨髓源性神经干细胞保持了正常细胞的生物学特征,体内和体外的各项指标均未提示其具有致瘤性,体外的培养条件没有使其发生恶性转化,从致瘤性方面证实了骨髓源性神经干细胞临床移植的安全性.

简介：目的评价体外培养的成人骨髓源性神经干细胞的遗传稳定性.方法制备骨髓源性神经干细胞的染色体标本,以常规染色和G显带进行染色体的核型分析.结果体外培养的成人骨髓源性神经干细胞的染色体数目为正常人类的46条染色体,未见非整倍体染色体像;G显带图像核型分析显示其为二倍体正常核型,染色体中未发现有缺失、倒位、易位、双着丝粒和环状染色体等结构异常.结论体外培养分化形成的骨髓源性神经干细胞保持了遗传学上的稳定性,为其进一步的临床应用提供了实验依据.

简介：摘要目的探讨肌源干细胞(MDSCs)联合纤维蛋白胶支架对压力性尿失禁大鼠的治疗效应及相关机制。方法建立压力性尿失禁的大鼠模型，并根据注射介质的不同分为5组，其中FM组为MDSCs联合可注射性纤维蛋白胶组；M组为单纯MDSCs注射组；F组为单纯可注射性纤维蛋白胶组；D组为溶剂对照组；S组为假手术组。在注射后1、2周以及4周通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测注射部位近端尿道组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的mRNA和蛋白表达情况。通过第八因子相关抗原(FVⅢR Ag)表达检测毛细血管生长情况。通过HE染色观察注射部位的近端尿道组织病理变化。结果注射后1周，FM组的VEGF和IGF-1 mRNA表达均高于D和S组(均P<0.05)，VEGF mRNA和蛋白表达均高于M组(均P<0.05)，而VEGF和IGF-1蛋白表达均高于F、D、S组(均P<0.05)；注射后2周，FM组的VEGF、IGF-1 mRNA和蛋白表达均高于D组(均P<0.05)，而VEGF蛋白表达均高于F、D组(均P<0.05)；注射后1周，M组的VEGF和IGF-1 mRNA和蛋白均高于D组，VEGF mRNA高于S组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。注射后4周，FM组的VEGF和IGF-1 mRNA的表达降至正常水平，而VEGF和IGF-1的蛋白表达明显降低，两两比较差异均无统计学差别(均P>0.05)。注射后4周，FM组的近端尿道毛细血管密度均高于其他组(均P<0.01)，M组的近端尿道毛细血管密度均高于D组(均P<0.01)。与D组比较，FM组可见尿道外括约肌层增厚，注射部位有新生毛细血管及新鲜肌纤维形成，肌纤维密度增大；M组可见尿道外括约肌层增厚，注射部位可见部分新生肌纤维和少许新生毛细血管；F组肌层仍较疏松，注射部位可见新生毛细血管。结论MDSCs联合纤维蛋白胶作为组织工程支架可促进模型大鼠近端尿道的IGF-1、VEGF表达，促进新生毛细血管的形成和尿道肌层的再生修复。

简介：目的探讨小鼠脊髓源性神经干细胞与纹状体源性神经干细胞的分离培养方法及增殖特点，比较两种来源的神经干细胞发育时期上的异同，寻找更有利于脊髓损伤修复的种子细胞。方法利用显微解剖、无血清培养和单细胞克隆技术在孕14d小鼠的胎鼠的脊髓及纹状体中分离培养具有单细胞克隆能力的细胞，免疫荧光染色检测克隆细胞的神经巢蛋白（nestin）抗原和诱导分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达，并比较两种来源的干细胞在培养及分化方向上的异同点。结果从胎鼠的脊髓和纹状体中成功分离出神经干细胞，两种来源的干细胞均具有连续克隆能力，可传代培养，表达nestin。脊髓血清诱导分化后脊髓源性神经干细胞8．tubulinⅢ阳性细胞（13．5±0．8）较纹状体源性神经干细胞（17．4±1．1）减少，而nestin、GFAP阳性细胞明显增多（45．7±0．3vs539．2±1．2；25．2±1．3vs18．8±0．91，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论依据细胞增殖特点和分化结果的区别，证实纹状体源性神经干细胞更适合用于移植修复脊髓损伤。

简介：脂肪源性干细胞因具有生物学特性稳定、来源广泛、取材方便、数量充足、易于培养扩增的优点,且在特定的诱导条件下可以分化为心肌细胞,有望成为细胞治疗的理想来源。诱导方法的选择,影响分化因素的研究已成为了细胞治疗领域研究的热点。本文就脂肪源性干细胞向心肌细胞诱导分化的方法和机制的研究进展进行综述。

简介：尤以支架+成骨诱导ADSCs组新骨形成最为显著.支架+成骨诱导ADSCs组,每组6孔.①支架+成骨诱导ADSCs（A组）,但均以支架+成骨诱导ADSCs组最为显著.成骨诱导后的ADSCs促进了骨缺损的修复.

简介：摘要目的分析面部整形美容中自体脂肪源性干细胞应用价值。方法将2015年3月—2016年3月80例面部整形美容患者回顾性分析，并根据治疗方法分组，分别40例。对照组采用传统方法，研究组采用自体脂肪源性干细胞。比较两组面部整形美容效果；皮肤湿润度、美观度、光泽度评分；不良反应发生率。结果研究组面部整形美容效果高于对照组，P＜0.05；研究组皮肤湿润度、美观度、光泽度评分高于对照组，P＜0.05；两组均未出现感染和排斥等症状。结论面部整形美容中自体脂肪源性干细胞应用价值高，可提高皮肤湿润度、美观度、光泽度，改善整形效果，无明显副作用，值得推广。

简介：眼性前庭诱发肌源性电位（ocularvestibularevokedmyogenicpotential，oVEMP）是起源于椭圆囊的能够客观反映前庭-眼反射通路完整性一种无创电生理检查，是一项新的前庭功能检查技术，与眼震电图和颈性前庭诱发肌源性电位用于眩晕相关疾病诊断及鉴别诊断，全面评价前庭系统的功能状态。

简介：曾被认为是废物的脂肪组织正成为国外生物学上新的研究热点。近年来，在脂肪组织中发现一新的成体干细胞：脂肪源性成熟基质细胞（adipose-derivedadultstromalcells，ADAScells），因其具有易获取，易扩增的特性和多向分化的潜能而倍受关注。

简介：【摘要】目的：研究体外诱导骨髓间质干细胞分化成心肌样细胞和其低免疫源性的相关性。方法：选取我实验室 50只实验鼠进行对比研究，分别为单一反应细胞组、反应细胞 +刺激细胞组和骨髓间质干细胞 +反应细胞、骨髓间质干细胞 +反应细胞 +刺激细胞。结果：体外诱导后，部分的细胞结蛋白和心肌特异性肌钙蛋白表现出阳性反应，观察组 1的抑制率显著低于对照组 1，观察组 2的抑制率显著高于对照组 1。结论：骨髓间质干细胞具有潜在的分化功能，分化后骨髓间质干细胞对于异体淋巴细胞的增殖依赖性增强，因此具有低免疫源性，其在异体移植治疗中具有重要意义。

简介：摘要目前处理伤口的方式主要包括减低局部压力、抑制伤口细菌感染、彻底清创换药、加强局部血液循环、负压封闭吸引术和湿性敷料等，多数可获得较好的预后，但仍有部分患者出现创面不愈合、组织缺血性坏死甚至坏疽，严重者甚至需要截肢。近年来，随着干细胞研究的迅速深入，利用其旁分泌功能治疗慢性创面受到普遍关注，干细胞源性外泌体的应用已成为治疗创面不愈合的一种新策略。外泌体是细胞分泌的脂质双重膜囊，直径30~100 nm，是干细胞旁分泌的产物。干细胞外泌体通过多种途径参与创面修复，包括控制炎症反应、调节细胞外基质的生长和扩张、促进血管生成和抑制瘢痕形成等。不同干细胞来源的外泌体对修复伤面的调节作用机制不同。通过对干细胞来源的外泌体在创面治疗中的作用和相关机制进行综述，为外泌体治疗创面不愈合提供理论基础。

简介：摘要目的在体外培养的大鼠脂肪源性干细胞（ADSCs）中检测神经生长因子受体TrkA的表达，为将来ADSCs和NGF联合应用于大鼠压力性尿失禁治疗的动物试验研究提供理论依据。方法分离并培养SD大鼠ADSCs，采用Westernblot方法检测ADSCs中TrkA的表达情况，采用MTT法观察NGF对ADSCs增殖的作用。结果Westernblot实验结果表明，ADSCs中的TrkA表达明显升高。MTT实验结果表明NGF能有效的促进ADSCs的增殖，与空白对照组相比，增值率有显著差异（P＜0.05），且有明显的量效剂量关系。结论ADSCs的NGF特异性受体TrkA表达显著，外源性的NGF能有效的促进ADSCs的增殖。

简介：【摘要】目的 在 体外培养的 大鼠脂肪源性干细胞（ ADSCs） 中 检测神经生长因子受体 TrkA的 表达，为将来 ADSCs和 NGF联合 应用于大鼠压力性尿失禁治疗的动物试验研究提供理论依据。方法 分离并培养 SD大鼠 ADSCs， 采用 Western blot方法检测 ADSCs中 TrkA的表达情况， 采用 MTT法观察 NGF对 ADSCs增殖的作用。结果 Western blot实验结果 表明， ADSCs中 的 TrkA表达明显升高 。 MTT实验结果 表明 NGF能有效的促进 ADSCs的增殖， 与空白对照组相比， 增值率有显著差异 （ P＜ 0.05），且有明显的量效剂量关系。结论 ADSCs的 NGF特异性受体 TrkA表达显著， 外源性的 NGF能有效的促进 ADSCs的增殖。

简介：牙周炎是一种慢性炎症性疾病，它可以破坏牙周组织，甚至导致牙齿丧失。随着对其发病机理的深入研究．牙周治疗的重点已从阻止疾病发展转变为促进牙周组织的再生和重建。牙周组织工程技术已成为牙周组织再生治疗的发展方向。干细胞群体的选择是组织工程最关键的部分之一。牙源性干细胞因其优良的再生和分化潜能，成为牙周组织再生治疗的重要来源。本文就牙周组织再生治疗中牙源性干细胞的研究进展作一综述。